| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-14页 |
| 1.1 葡萄风信子概述 | 第10页 |
| 1.1.1 葡萄风信子的起源及分布 | 第10页 |
| 1.1.2 葡萄风信子花色形成研究进展 | 第10页 |
| 1.2 二氢黄酮醇4-还原酶(DIHYDROFLAVONOL4-REDUCTASE,DFR)研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2.1 DFR基因的结构和作用 | 第10-11页 |
| 1.2.2 DFR基因的分离 | 第11页 |
| 1.2.3 DFR基因的底物特异性 | 第11-12页 |
| 1.2.4 DFR基因的时空表达分析 | 第12页 |
| 1.3 大肠杆菌表达系统研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第13页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第13-14页 |
| 第二章 葡萄风信子DFR基因在大肠杆菌表达系统中的表达 | 第14-30页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 载体与菌株 | 第14页 |
| 2.1.2 仪器和试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 常用培养基及缓冲液的配置 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-22页 |
| 2.2.1 原核表达载体的构建 | 第15-19页 |
| 2.2.2 大肠杆菌表达系统中重组融合蛋白的表达及条件优化 | 第19页 |
| 2.2.3 SDS-PAGE鉴定重组融合蛋白表达 | 第19-21页 |
| 2.2.4 重组融合蛋白的纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.5 体外酶促反应 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-28页 |
| 2.3.1 原核表达载体pET-28a(+)-MaDFR2b、pMAL-c5x-MaDFR2b的构建 | 第22页 |
| 2.3.2 重组融合蛋白在BL21-CodonPlus-(DE3)-RIPL细胞中的表达 | 第22-26页 |
| 2.3.3 葡萄风信子MaDFR2b融合蛋白的纯化结果 | 第26-27页 |
| 2.3.4 酶促反应结果 | 第27-28页 |
| 2.4 小结 | 第28-30页 |
| 第三章 农杆菌介导的瞬时转化研究 | 第30-38页 |
| 3.1 材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 质粒载体 | 第30页 |
| 3.1.3 菌株 | 第30页 |
| 3.1.4 试剂 | 第30页 |
| 3.1.5 常用缓冲液的配置 | 第30页 |
| 3.1.6 仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 葡萄风信子DFR过量表达载体的构建 | 第31-33页 |
| 3.2.2 农杆菌介导的瞬时转化 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-37页 |
| 3.3.1 葡萄风信子DFR过量表达载体的构建 | 第34-36页 |
| 3.3.2 GUS染色结果 | 第36页 |
| 3.3.3 表型观察 | 第36-37页 |
| 3.4 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
