缩略词表 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
1. 引言 | 第11-24页 |
1.1 精子发生 | 第11-13页 |
1.1.1 精子发生过程简介 | 第11-13页 |
1.2 精子的形态建成 | 第13-17页 |
1.3 精子尾部畸形,以及MMAF的发病机制研究现状 | 第17-20页 |
1.4 GGN/GGNBP1的研究进展 | 第20-24页 |
2. 材料与方法 | 第24-40页 |
2.1 实验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 实验动物 | 第24页 |
2.1.2 主要的药品和试剂以及来源 | 第24页 |
2.1.3 主要实验仪器及设备 | 第24-25页 |
2.1.4 主要试剂的配制及贮存 | 第25-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-40页 |
2.2.1 GGNBP1基因敲除小鼠的构建 | 第28-30页 |
2.2.2 小鼠基因组的提取 | 第30页 |
2.2.3 小鼠基因型鉴定 | 第30-31页 |
2.2.4 小鼠精子活力测定 | 第31页 |
2.2.5 小鼠组织石蜡包埋及切片 | 第31-32页 |
2.2.6 苏木精—伊红染色(HE) | 第32-33页 |
2.2.7 高碘酸-Schiff染色(PAS) | 第33页 |
2.2.8 小鼠睾丸组织石蜡切片免疫荧光 | 第33-34页 |
2.2.9 冰冻切片免疫荧光 | 第34-35页 |
2.2.10 小鼠精子免疫荧光 | 第35页 |
2.2.11 细胞凋亡检测 | 第35-36页 |
2.2.12 电镜样品的制备及切片 | 第36-37页 |
2.2.13 免疫印迹检测 | 第37-38页 |
2.2.14 考马斯亮蓝染色 | 第38页 |
2.2.15 蛋白体外表达与纯化 | 第38-39页 |
2.2.16 数据分析 | 第39-40页 |
3. 实验结果 | 第40-54页 |
3.1 GGNBP1敲除小鼠模型的构建 | 第40页 |
3.2 GGNBP1敲除小鼠的鉴定 | 第40-41页 |
3.3 GGNBP1定位于线粒体 | 第41-42页 |
3.4 GGNBP1敲除导致小鼠生精过程异常和精子活力降低 | 第42-44页 |
3.5 GGNBP1敲除导致小鼠产生各种畸形精子 | 第44-48页 |
3.6 TEM检测GGNBP1敲除对小鼠精子超微结构的影响 | 第48-50页 |
3.7 GGNBP1敲除小鼠中生精细胞发生凋亡 | 第50页 |
3.8 GGNBP1敲除主要影响精子的塑形过程 | 第50-54页 |
4. 讨论 | 第54-59页 |
4.1 GGNBP1敲除严重影响了小鼠的生精过程 | 第54-55页 |
4.2 GGNBP1与MMAF | 第55页 |
4.3 GGNBP1与精子发生及其互作蛋白的后续研究 | 第55-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第64页 |