| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第11-12页 |
| 1.1.1 干旱会造成细胞膜系统遭到破坏, | 第11-12页 |
| 1.1.2 影响叶片光合作用与呼吸作用 | 第12页 |
| 1.1.3 内源激素代谢失调 | 第12页 |
| 1.1.4 自由基积累和膜脂过氧化 | 第12页 |
| 1.2 干旱胁迫对水稻生产的影响 | 第12-13页 |
| 1.3 水稻抗旱的生理生化机制 | 第13-16页 |
| 1.3.1 细胞壁的调节 | 第13页 |
| 1.3.2 渗透调节 | 第13-14页 |
| 1.3.3 激素调节 | 第14页 |
| 1.3.4 抗氧化保护性酶类 | 第14-15页 |
| 1.3.5 水稻抗性的分子遗传研究 | 第15页 |
| 1.3.6 水稻抗旱基因的研究 | 第15-16页 |
| 1.4 富含半胱氨酸的短肽 | 第16-17页 |
| 1.4.1 植物CRPs蛋白的概念、分布、特性 | 第16-17页 |
| 1.4.2 植物CRPs蛋白的生理功能 | 第17页 |
| 1.5 水稻CRP蛋白OsDT11的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 转录组技术在植物基因功能研究中的应用 | 第18-20页 |
| 1.6.1 RNA-seq技术 | 第18-20页 |
| 1.7 研究目的和意义 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-25页 |
| 2.1 植物材料和来源 | 第20页 |
| 2.2 菌株 | 第20页 |
| 2.3 核酸操作 | 第20-23页 |
| 2.3.1 水稻基因组DNA抽提 | 第20-21页 |
| 2.3.2 质粒抽提 | 第21页 |
| 2.3.3 DNA片段的纯化和乙醇沉淀 | 第21页 |
| 2.3.4 酶切反应 | 第21页 |
| 2.3.5 连接反应 | 第21-22页 |
| 2.3.6 水稻总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.3.7 RT-PCR和定量RT-PCR分析 | 第22-23页 |
| 2.3.8 克隆载体序列测定 | 第23页 |
| 2.4 表达谱测序 | 第23页 |
| 2.4.1 RNA样品的准备 | 第23页 |
| 2.4.2 RNA-seq的测序实验流程 | 第23页 |
| 2.5 烟草瞬时表达体系的分析 | 第23-24页 |
| 2.5.1 瞬时表达载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.5.2 融合PCR制备基因OsDT11点突变载体 | 第24页 |
| 2.5.3 注射烟草观察荧光 | 第24页 |
| 2.6 蛋白操作 | 第24-25页 |
| 2.6.1 原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.6.2 融合蛋白的诱导表达 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-42页 |
| 3.1 OsDT11转基因植株转录组测序 | 第25页 |
| 3.2 差异表达基因筛选 | 第25-26页 |
| 3.3 上调差异表达基因的GO功能显著富集分类 | 第26-34页 |
| 3.4 对转录组测序中候选基因的验证分析 | 第34页 |
| 3.5 定量RT-PCR验证候选基因 | 第34-35页 |
| 3.6 启动子驱动的报告基因与OsDT11共表达 | 第35-37页 |
| 3.7 OsDT11可能功能位点的分析 | 第37-40页 |
| 3.7.1 烟草瞬时表达体系对OsDT11功能位点的验证 | 第37-39页 |
| 3.7.2 定量验证OsDT11功能位点 | 第39-40页 |
| 3.8 OsDT11蛋白功能的分析 | 第40-42页 |
| 3.8.1 OsDT11对水稻抗旱性的研究 | 第40-41页 |
| 3.8.2 体外喷施OsDT11蛋白对水稻的研究 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 4.1 OsDT11抗旱路径的探究 | 第42-43页 |
| 4.2 OsDT11可能功能位点的探讨 | 第43-44页 |
| 4.3 OsDT11体外施用的可能性 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-59页 |
| 附录Ⅰ：本研究所用的引物 | 第59-60页 |
| 附录Ⅱ：常规培养基及溶液的配置 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |