| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论（文献综述及课题背景介绍） | 第9-23页 |
| 1.1 转录因子PAX5 | 第9-12页 |
| 1.1.1 概述 | 第9-10页 |
| 1.1.2 转录因子PAX5 与其他转录因子调节网络 | 第10-11页 |
| 1.1.3 PAX5 与肿瘤 | 第11-12页 |
| 1.2 转录因子TFII-I | 第12-14页 |
| 1.2.1 概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 TFII-I 转录调节功能 | 第13页 |
| 1.2.3 TFII-I 蛋白家族 | 第13-14页 |
| 1.2.4 TFII-I 蛋白其它功能 | 第14页 |
| 1.3 细胞内主要信号通路 | 第14-17页 |
| 1.3.1 MAPK 信号通路概述 | 第14-15页 |
| 1.3.2 P38 MAPK 信号通路 | 第15页 |
| 1.3.3 ERK MAPK 信号通路 | 第15-16页 |
| 1.3.4 NF-κB 信号通路 | 第16-17页 |
| 1.4 转录因子IRF4 | 第17-20页 |
| 1.4.1 IRF4 基因概述 | 第17-19页 |
| 1.4.2 IRF4 基因与血液肿瘤 | 第19-20页 |
| 1.5 课题的研究意义和必要性 | 第20-21页 |
| 1.6 课题的研究路线和方法 | 第21-23页 |
| 第2章 试验材料和方法 | 第23-39页 |
| 2.1 质粒构建 | 第23-27页 |
| 2.1.1 试剂配制 | 第23页 |
| 2.1.2 TFII-I Promotor 连入PGL3-Promotor 质粒的构建 | 第23-27页 |
| 2.1.3 IRF4 连入PGL3-Promotor 质粒的构建 | 第27页 |
| 2.2 细胞培养和转染 | 第27-30页 |
| 2.2.1 细胞系 | 第27页 |
| 2.2.2 细胞培养基的配制 | 第27-28页 |
| 2.2.2.1 1640 细胞培养基 | 第27-28页 |
| 2.2.2.2 DMEM 细胞培养基 | 第28页 |
| 2.2.3 细胞复苏，冻存和传代 | 第28-29页 |
| 2.2.3.1 细胞复苏 | 第28页 |
| 2.2.3.2 细胞传代 | 第28-29页 |
| 2.2.3.2.1 悬浮细胞传代 | 第28页 |
| 2.2.3.2.2 贴壁细胞传代 | 第28-29页 |
| 2.2.3.3 细胞冻存 | 第29页 |
| 2.2.4 细胞转染 | 第29-30页 |
| 2.2.4.1 IM9/PAX5 敲低的稳转细胞系中转染报告基因质粒 | 第29页 |
| 2.2.4.2 IM9/PAX5 敲低的稳转细胞系中转染双链SiRNA | 第29-30页 |
| 2.3 报告基因分析 | 第30页 |
| 2.4 Western blotting | 第30-32页 |
| 2.4.1 所需溶液配方 | 第30-31页 |
| 2.4.2 所需抗体 | 第31页 |
| 2.4.3 试验步骤 | 第31-32页 |
| 2.5 RT-PCR | 第32-34页 |
| 2.5.1 细胞中总RNA 的提取方法 | 第32页 |
| 2.5.2 RNA 反转录成cDNA | 第32-33页 |
| 2.5.3 反转录后的cDNA 下游扩增 | 第33页 |
| 2.5.4 反转录RT-PCR 所用引物序列 | 第33-34页 |
| 2.6 染色质免疫共沉淀 | 第34-36页 |
| 2.6.1 所需溶液及其试剂 | 第34页 |
| 2.6.2 试验步骤 | 第34-36页 |
| 2.6.3 PCR 扩增片段所需引物序列 | 第36页 |
| 2.7 细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
| 2.7.1 细胞凋亡检步骤 | 第36-37页 |
| 2.8 细胞增殖检测 | 第37-39页 |
| 2.8.1 细胞增殖检测步骤 | 第37-39页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第39-49页 |
| 3.1 PAX5 对于TFII-I 的转录调控机制 | 第39-42页 |
| 3.1.1 多发性骨髓瘤细胞IM9 稳定敲低PAX5 后TFII-I 蛋白表达量上调 | 第39页 |
| 3.1.2 PAX5 直接参与TFII-1 的转录调控 | 第39-40页 |
| 3.1.3 TFII-I 启动子报告基因活性分析 | 第40-41页 |
| 3.1.4 多发性骨髓瘤细胞中敲低PAX5 可以增加骨髓瘤细胞对万珂药物的敏感性 | 第41-42页 |
| 3.2 PAX5 对于IRF4 的转录调控机制 | 第42-45页 |
| 3.2.1 多发性骨髓瘤细胞IM9 稳定敲低PAX5 后IRF4 蛋白表达量下调 | 第42页 |
| 3.2.2 IRF4 启动子及染色质免疫共沉淀分析 | 第42-43页 |
| 3.2.3 IRF4 启动子报告基因活性分析 | 第43-44页 |
| 3.2.4 IRF4 和PAX5 对于细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 PAX5 影响到IM9 细胞信号通路 | 第45-46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 全文总结 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
