中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-16页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-15页 |
技术流程图 | 第15-16页 |
第一部分 人源性促甲状腺素受体抗体Fab片段噬菌体抗体库的构建 | 第16-47页 |
1.1 材料和方法 | 第17-33页 |
1.1.1 材料 | 第17-20页 |
1.1.2 PCR引物 | 第20页 |
1.1.3 方法 | 第20-33页 |
1.2 结果 | 第33-39页 |
1.2.1 外周血总RNA提取 | 第33页 |
1.2.2 轻、重链基因PCR扩增 | 第33-35页 |
1.2.3 噬粒pComb3Hss的扩增 | 第35页 |
1.2.4 轻链库的构建 | 第35-37页 |
1.2.5 噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定 | 第37-39页 |
1.3 讨论 | 第39-45页 |
1.3.1 单克隆抗体的发展 | 第39-41页 |
1.3.2 噬菌体抗体库成功构建的必要条件 | 第41-44页 |
1.3.3 辅助噬菌体作用机理以及扩增 | 第44-45页 |
1.3.4 噬菌体抗体库的机遇和挑战 | 第45页 |
1.4 小结 | 第45-47页 |
第二部分 人源性TRAb Fab片段的筛选及初步鉴定 | 第47-63页 |
2.1 材料和方法 | 第48-55页 |
2.1.1 材料 | 第48-51页 |
2.1.2 方法 | 第51-55页 |
2.2 结果 | 第55-58页 |
2.2.1 TRAb Fab噬菌体抗体的筛选结果 | 第55页 |
2.2.2 Phage-ELISA检测噬菌体抗体 | 第55-56页 |
2.2.3 TRAb阳性克隆的鉴定 | 第56-58页 |
2.2.4 TRAb Fab片段的获取 | 第58页 |
2.3 讨论 | 第58-62页 |
2.3.1 用于筛选的抗原 | 第58-59页 |
2.3.2 噬菌体抗体库的筛选技术的原理及影响因素 | 第59-61页 |
2.3.3 人源性TRAb Fab噬菌体抗体的筛选 | 第61-62页 |
2.4 小结 | 第62-63页 |
第三部分 人源性TRAb Fab片段的初步纯化及鉴定 | 第63-82页 |
3.1 材料和方法 | 第64-69页 |
3.1.1 材料 | 第64-66页 |
3.1.2 方法 | 第66-69页 |
3.2 结果 | 第69-73页 |
3.2.1 可溶性TRAb Fab ELISA鉴定 | 第69页 |
3.2.2 SDS-PAGE电泳结果 | 第69-70页 |
3.2.3 免疫学活性鉴定:Western-Blotting | 第70-71页 |
3.2.4 采用CBG定量法对可溶性TRAbFab的表达蛋白定量 | 第71-72页 |
3.2.5 抗体重链和轻链可变区DNA序列的测序分析 | 第72-73页 |
3.3 讨论 | 第73-81页 |
3.4 小结 | 第81-82页 |
全文结论 | 第82-83页 |
创新点及展望 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-90页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第90-91页 |
综述 | 第91-120页 |
综述 促甲状腺素受体及其抗体 | 第91-100页 |
综述 噬菌体抗体库 | 第100-113页 |
参考文献 | 第113-120页 |
致谢 | 第120-121页 |