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人源性TRAb Fab段抗体库的构建筛选与鉴定

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第10-12页
前言第12-16页
    研究现状、成果第12-14页
    研究目的、方法第14-15页
    技术流程图第15-16页
第一部分 人源性促甲状腺素受体抗体Fab片段噬菌体抗体库的构建第16-47页
    1.1 材料和方法第17-33页
        1.1.1 材料第17-20页
        1.1.2 PCR引物第20页
        1.1.3 方法第20-33页
    1.2 结果第33-39页
        1.2.1 外周血总RNA提取第33页
        1.2.2 轻、重链基因PCR扩增第33-35页
        1.2.3 噬粒pComb3Hss的扩增第35页
        1.2.4 轻链库的构建第35-37页
        1.2.5 噬菌体Fab抗体库的构建和鉴定第37-39页
    1.3 讨论第39-45页
        1.3.1 单克隆抗体的发展第39-41页
        1.3.2 噬菌体抗体库成功构建的必要条件第41-44页
        1.3.3 辅助噬菌体作用机理以及扩增第44-45页
        1.3.4 噬菌体抗体库的机遇和挑战第45页
    1.4 小结第45-47页
第二部分 人源性TRAb Fab片段的筛选及初步鉴定第47-63页
    2.1 材料和方法第48-55页
        2.1.1 材料第48-51页
        2.1.2 方法第51-55页
    2.2 结果第55-58页
        2.2.1 TRAb Fab噬菌体抗体的筛选结果第55页
        2.2.2 Phage-ELISA检测噬菌体抗体第55-56页
        2.2.3 TRAb阳性克隆的鉴定第56-58页
        2.2.4 TRAb Fab片段的获取第58页
    2.3 讨论第58-62页
        2.3.1 用于筛选的抗原第58-59页
        2.3.2 噬菌体抗体库的筛选技术的原理及影响因素第59-61页
        2.3.3 人源性TRAb Fab噬菌体抗体的筛选第61-62页
    2.4 小结第62-63页
第三部分 人源性TRAb Fab片段的初步纯化及鉴定第63-82页
    3.1 材料和方法第64-69页
        3.1.1 材料第64-66页
        3.1.2 方法第66-69页
    3.2 结果第69-73页
        3.2.1 可溶性TRAb Fab ELISA鉴定第69页
        3.2.2 SDS-PAGE电泳结果第69-70页
        3.2.3 免疫学活性鉴定:Western-Blotting第70-71页
        3.2.4 采用CBG定量法对可溶性TRAbFab的表达蛋白定量第71-72页
        3.2.5 抗体重链和轻链可变区DNA序列的测序分析第72-73页
    3.3 讨论第73-81页
    3.4 小结第81-82页
全文结论第82-83页
创新点及展望第83-84页
参考文献第84-90页
发表论文和参加科研情况说明第90-91页
综述第91-120页
    综述 促甲状腺素受体及其抗体第91-100页
    综述 噬菌体抗体库第100-113页
    参考文献第113-120页
致谢第120-121页

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