| 论文创新点 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第—章 研究背景 | 第13-50页 |
| 第一节 HIV-1复制与宿主因子 | 第13-37页 |
| 章节概述 | 第13页 |
| 1.1 HIV-1复制及编码的病毒蛋白 | 第13-21页 |
| 1.1.1 HIV的发现 | 第13-14页 |
| 1.1.2 HIV病毒颗粒结构 | 第14-15页 |
| 1.1.4 HIV-1的复制周期 | 第15-17页 |
| 1.1.5 HIV-1编码的病毒蛋白及功能 | 第17-21页 |
| 1.2 支持HIV-1复制的宿主因子 | 第21-32页 |
| 1.2.1 病毒吸附与入侵 | 第21-23页 |
| 1.2.2 脱壳与逆转录 | 第23-25页 |
| 1.2.3 核转运 | 第25-26页 |
| 1.2.4 整合 | 第26-28页 |
| 1.2.5 潜伏池 | 第28页 |
| 1.2.6 转录、mRNA加工、核输出 | 第28-30页 |
| 1.2.7 蛋白翻译、转运、组装、病毒出芽与成熟 | 第30-32页 |
| 1.3 限制HIV-1复制的宿主因子 | 第32-35页 |
| 1.3.1 TRIM5α | 第32-33页 |
| 1.3.2 APOBEC3G | 第33页 |
| 1.3.3 Tetherin | 第33-34页 |
| 1.3.4 SAMHD1 | 第34-35页 |
| 1.4 HIV/AIDS治疗 | 第35-36页 |
| 1.5 章节小结 | 第36-37页 |
| 第二节 RNAi与HIV-1治疗 | 第37-50页 |
| 章节概述 | 第37页 |
| 2.1 治疗用siRNA的产生机制 | 第37-39页 |
| 2.2 基于RNAi的HIV/AIDS基因治疗 | 第39-41页 |
| 2.3 siRNA递药途径 | 第41-44页 |
| 2.3.1 非病毒载体递药途径 | 第41-43页 |
| 2.3.2 病毒载体递药途径 | 第43-44页 |
| 2.4 siRNA靶向HIV-1病毒基因 | 第44-45页 |
| 2.5 siRNA靶向HIV-1复制必须的宿主因子 | 第45-46页 |
| 2.6 siRNA及病毒载体的安全性问题 | 第46-48页 |
| 2.6.1 siRNA的安全性问题 | 第46-47页 |
| 2.6.2 病毒载体的安全性问题 | 第47-48页 |
| 2.7 章节小结 | 第48-50页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第50-66页 |
| 1 实验器材、试剂及生物材料 | 第50-53页 |
| 1.1 实验仪器 | 第50页 |
| 1.2 实验耗材 | 第50-51页 |
| 1.3 实验试剂 | 第51页 |
| 1.4 工具酶与试剂盒 | 第51-52页 |
| 1.5 载体、菌种及细胞系 | 第52-53页 |
| 2 分子生物学实验技术 | 第53-60页 |
| 2.1 质粒DNA提取 | 第53-54页 |
| 2.2 聚合酶链式反应(PCR) | 第54-55页 |
| 2.3 限制性酶切反应 | 第55页 |
| 2.4 DNA片段回收 | 第55-56页 |
| 2.5 连接反应 | 第56页 |
| 2.6 感受态细胞的制备(Inoue方法) | 第56-57页 |
| 2.7 转化 | 第57页 |
| 2.8 哺乳动物细胞RNA的提取 | 第57页 |
| 2.9 逆转录PCR | 第57-58页 |
| 2.10 基因定点突变 | 第58-59页 |
| 2.11 Western杂交 | 第59-60页 |
| 2.12 实时荧光定量PCR | 第60页 |
| 3 细胞实验技术 | 第60-63页 |
| 3.1 细胞传代培养 | 第60页 |
| 3.2 细胞冻存与复苏 | 第60-61页 |
| 3.3 细胞转染 | 第61页 |
| 3.4 基于慢病毒转导的稳定细胞系的建立 | 第61-62页 |
| 3.5 荧光素酶活性测定 | 第62页 |
| 3.6 流式细胞仪检测细胞膜蛋白的表达 | 第62-63页 |
| 4 病毒实验技术 | 第63-66页 |
| 4.1 慢病毒制备 | 第63-64页 |
| 4.2 HIV-1病毒制备 | 第64-65页 |
| 4.2.1 侵染性HIV-1病毒制备 | 第64页 |
| 4.2.2 单复制周期假型HIV-1病毒制备 | 第64页 |
| 4.2.3 病毒滴度(感染单位)测定 | 第64-65页 |
| 4.3 HIV-1 p24核心抗原ELISA检测 | 第65-66页 |
| 第三章 阻断HIV-1辅助受体CXCR4的无毒副作用新方法研究 | 第66-93页 |
| 1 引言 | 第66-68页 |
| 2 材料和方法 | 第68-73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-89页 |
| 3.1 筛选能有效抑制HIV-1复制的CXCR4突变体 | 第73-76页 |
| 3.2 CXCR4 dual-shRNA能更有效地抑制HIV-1复制 | 第76-79页 |
| 3.3 基于自剪切T2A肽策略表达CXCR4 dual-shRNA和CXCR4突变体的重组慢病毒载体构建 | 第79-83页 |
| 3.4 CXCR4突变体P191A功能置换内源性CXCR4及其对HIV-1的抑制 | 第83-87页 |
| 3.5 重组慢病毒载体转导的细胞系的功能及毒性分析 | 第87-89页 |
| 4 讨论与展望 | 第89-93页 |
| 全文总结 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-117页 |
| 在读期间发表及待发表的论文 | 第117页 |
| 在读期间获得的授权专利 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
