| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-32页 |
| 1.1 糖尿病与二肽基肽酶Ⅳ | 第14-20页 |
| 1.1.1 糖尿病概述 | 第14-16页 |
| 1.1.2 Ⅱ型糖尿病的治疗策略及药物 | 第16-17页 |
| 1.1.3 胰高血糖素样肽-1(GLP-1)和二肽基肽酶Ⅳ(DPP-Ⅳ) | 第17-20页 |
| 1.2 DPP-Ⅳ抑制剂 | 第20-23页 |
| 1.2.1 DPP-Ⅳ抑制剂的作用机理 | 第20页 |
| 1.2.2 化学合成DPP-Ⅳ抑制剂 | 第20-21页 |
| 1.2.3 化学合成DPP-Ⅳ抑制剂的安全问题 | 第21-22页 |
| 1.2.4 DPP-Ⅳ抑制剂体外的评价方法 | 第22-23页 |
| 1.3 生物活性肽及DPP-Ⅳ抑制肽 | 第23-29页 |
| 1.3.1 生物活性肽概述 | 第23-24页 |
| 1.3.2 生物活性肽制备方法 | 第24-25页 |
| 1.3.3 生物活性肽的分离纯化及分析方法 | 第25-26页 |
| 1.3.4 生物信息学分析与生物活性肽研究 | 第26-27页 |
| 1.3.5 生物活性肽的抗胃肠消化及吸收研究 | 第27-28页 |
| 1.3.6 食源性DPP-Ⅳ抑制活性肽 | 第28-29页 |
| 1.4 立题依据及意义 | 第29-30页 |
| 1.5 研究内容 | 第30-32页 |
| 第二章 生物信息学预测牛、羊乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制肽 | 第32-51页 |
| 2.1 前言 | 第32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-36页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.2 主要设备 | 第33页 |
| 2.2.3 文献已报道DPP-Ⅳ抑制肽序列的搜集和分析 | 第33页 |
| 2.2.4 牛、羊乳酪蛋白一级序列的比较分析 | 第33页 |
| 2.2.5 生物信息学预测牛、羊乳酪蛋白中DPP-Ⅳ抑制序列及潜能 | 第33-34页 |
| 2.2.6 胰蛋白酶模拟水解牛、羊乳酪蛋白 | 第34页 |
| 2.2.7 乳酪蛋白源肽的化学固相合成 | 第34-35页 |
| 2.2.8 合成多肽的DPP-Ⅳ体外抑制活性的测定 | 第35页 |
| 2.2.9 数据处理及统计分析 | 第35-36页 |
| 2.3 结果和分析 | 第36-49页 |
| 2.3.1 DPP-Ⅳ抑制肽的结构特性 | 第36-41页 |
| 2.3.2 生物信息学预测比较牛、羊乳酪蛋白的DPP-Ⅳ抑制序列及潜能 | 第41-45页 |
| 2.3.3 DPP-Ⅳ抑制体外活性测定方法的优化 | 第45-47页 |
| 2.3.4 牛、羊乳酪蛋白的胰蛋白酶模拟水解及潜在DPP-Ⅳ抑制序列的筛选验证 | 第47-49页 |
| 2.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第三章 乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制肽的酶法制备及组成特性 | 第51-73页 |
| 3.1 前言 | 第51页 |
| 3.2 材料与方法 | 第51-58页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第51页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第51-52页 |
| 3.2.3 主要设备 | 第52页 |
| 3.2.4 乳酪蛋白的制备 | 第52-54页 |
| 3.2.5 牛、羊乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制水解产物的酶法制备 | 第54-55页 |
| 3.2.6 乳酪蛋白酶解产物水解度的测定 | 第55-56页 |
| 3.2.7 乳酪蛋白酶解产物DPP-Ⅳ抑制活性的测定 | 第56页 |
| 3.2.8 Tricine-SDS-PAGE电泳比较牛、羊乳酪蛋白酶解产物的组成 | 第56-57页 |
| 3.2.9 RP-HPLC分析牛、羊乳酪蛋白酶解产物组成 | 第57页 |
| 3.2.10 牛、羊乳酪蛋白酶解产物的超滤分离 | 第57-58页 |
| 3.2.11 牛、羊乳酪蛋白酶解产物不同超滤组分的酶抑制特性分析 | 第58页 |
| 3.2.12 数据处理和统计分析 | 第58页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第58-72页 |
| 3.3.1 自制牛、羊乳酪蛋白蛋白质组成比较 | 第58-59页 |
| 3.3.2 牛、羊乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制活性肽的酶法制备 | 第59-65页 |
| 3.3.3 牛、羊乳酪蛋白水解产物组成特性的比较 | 第65-67页 |
| 3.3.4 牛、羊乳酪蛋白水解产物超滤组分的DPP-Ⅳ抑制活性分析 | 第67-69页 |
| 3.3.5 牛、羊乳酪蛋白水解产物超滤组分的DPP-Ⅳ抑制特性分析 | 第69-72页 |
| 3.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第四章 DPP-Ⅳ抑制肽的分离分析和鉴定 | 第73-100页 |
| 4.1 前言 | 第73页 |
| 4.2 材料与方法 | 第73-78页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第73-74页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第74页 |
| 4.2.3 主要仪器设备 | 第74-75页 |
| 4.2.4 羊乳酪蛋白水解物<5 kDa超滤组分薄层色谱分离方法的建立 | 第75-76页 |
| 4.2.5 羊乳酪蛋白水解物<5 kDa超滤组分的二维薄层色谱半制备分离 | 第76页 |
| 4.2.6 高效液相色谱(RP-HPLC)验证二维薄层色谱分离效果 | 第76-77页 |
| 4.2.7 羊乳酪蛋白多肽的RP-HPLC半制备分离 | 第77页 |
| 4.2.8 羊乳酪蛋白多肽的LC-ESI-MS/MS分析 | 第77页 |
| 4.2.9 化学固相合成多肽及其DPP-Ⅳ抑制活性评价 | 第77-78页 |
| 4.2.10 牛、羊乳酪蛋白水解物DPP-Ⅳ抑制分离组分及活性序列的比较 | 第78页 |
| 4.2.11 TLC/RP-HPLC联用色谱方法分离蛋白水解物的适用性 | 第78页 |
| 4.2.12 数据统计分析 | 第78页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第78-99页 |
| 4.3.1 羊乳酪蛋白水解物<5kDa超滤组分的一维和二维硅胶薄层色谱分析 | 第78-81页 |
| 4.3.2 羊乳酪蛋白水解物<5kDa超滤组分的二维硅胶薄层色谱半制备分离 | 第81-84页 |
| 4.3.3 RP-HPLC验证二维薄层色谱分离效果 | 第84-86页 |
| 4.3.4 羊乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制活性肽的质谱鉴定 | 第86-88页 |
| 4.3.5 牛乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制活性肽的TLC/RP-HPLC联用分离及质谱鉴定 | 第88-92页 |
| 4.3.6 TLC/RP-HPLC联用色谱方法分离蛋白水解物活性组分的适用性 | 第92-96页 |
| 4.3.7 合成多肽的DPP-Ⅳ抑制活性评价及构效分析 | 第96-99页 |
| 4.4 本章小结 | 第99-100页 |
| 第五章 DPP-Ⅳ抑制活性肽的抑制特性和抑制机理 | 第100-122页 |
| 5.1 前言 | 第100页 |
| 5.2 材料与方法 | 第100-105页 |
| 5.2.1 主要材料 | 第100-101页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第101页 |
| 5.2.3 主要设备 | 第101页 |
| 5.2.4 DPP-Ⅳ抑制活性肽的理化性质分析 | 第101页 |
| 5.2.5 DPP-Ⅳ酶抑制动力学研究 | 第101-104页 |
| 5.2.6 DPP-Ⅳ酶对合成活性肽的降解作用 | 第104页 |
| 5.2.7 活性肽组合对DPP-Ⅳ酶抑制作用的相互影响 | 第104页 |
| 5.2.8 合成活性肽对猪和人源DPP-Ⅳ酶抑制作用的比较研究 | 第104页 |
| 5.2.9 分子对接 | 第104-105页 |
| 5.2.10 数据处理及统计分析 | 第105页 |
| 5.3 结果和分析 | 第105-120页 |
| 5.3.1 DPP-Ⅳ抑制肽的理化特性分析 | 第105-106页 |
| 5.3.2 DPP-Ⅳ抑制活性肽的酶抑制动力学分析 | 第106-109页 |
| 5.3.3 DPP-Ⅳ抑制肽对DPP-Ⅳ酶水解作用敏感性分析 | 第109-113页 |
| 5.3.4 不同抑制机制DPP-Ⅳ抑制肽之间的相互作用 | 第113-114页 |
| 5.3.5 合成肽对猪和人源DPP-Ⅳ酶抑制作用的比较研究 | 第114-117页 |
| 5.3.6 分子对接探讨抑制活性肽和DPP-Ⅳ酶的作用位点及方式 | 第117-120页 |
| 5.4 本章小结 | 第120-122页 |
| 第六章 DPP-Ⅳ抑制肽的胃肠模拟消化吸收及对胰岛细胞功能研究 | 第122-136页 |
| 6.1 前言 | 第122页 |
| 6.2 材料与方法 | 第122-126页 |
| 6.2.1 实验材料 | 第122-123页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第123页 |
| 6.2.3 主要设备 | 第123页 |
| 6.2.4 乳酪蛋白酶解产物和DPP-Ⅳ抑制肽的胃肠消化稳定性 | 第123-124页 |
| 6.2.5 DPP-Ⅳ抑制活性肽对小肠上皮细胞生长的影响 | 第124页 |
| 6.2.6 小肠上皮细胞对DPP-Ⅳ抑制活性肽的摄入 | 第124-125页 |
| 6.2.7 乳酪蛋白DPP-Ⅳ抑制水解产物对胰岛细胞的功能研究 | 第125-126页 |
| 6.2.8 数据统计分析 | 第126页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第126-135页 |
| 6.3.1 乳酪蛋白酶解产物和DPP-Ⅳ抑制纯肽的抗胃肠消化研究 | 第126-130页 |
| 6.3.2 DPP-Ⅳ抑制活性肽对小肠上皮细胞生长的影响及其吸收性研究 | 第130-134页 |
| 6.3.3 乳酪蛋白水解产物对胰岛细胞的功能研究 | 第134-135页 |
| 6.4 本章小结 | 第135-136页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第136-138页 |
| 7.1 全文总结 | 第136-137页 |
| 7.2 创新点 | 第137页 |
| 7.3 展望 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-148页 |
| 致谢 | 第148-149页 |
| 附录 | 第149-156页 |
| 个人简介 | 第156页 |
