摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1.1 松脂醇二糖苷及其相关物质的结构与功能以及在自然界中的分布 | 第14-16页 |
1.1.1 松脂醇二糖苷及相关物质的结构与理化特性 | 第14-15页 |
1.1.2 松脂醇二糖苷及相关物质的功能活性 | 第15-16页 |
1.1.3 松脂醇二葡萄糖苷及相关物质在自然界中的分布 | 第16页 |
1.2 松脂醇二葡萄糖苷及相关物质的生物合成途径 | 第16-20页 |
1.3 松脂醇二糖苷及相关物质的获得方式 | 第20-21页 |
1.3.1 从植物中提取 | 第20-21页 |
1.3.2 化学合成 | 第21页 |
1.3.3 生物合成 | 第21页 |
1.4 植物内生菌代谢合成植物源活性成分的研究进展 | 第21-22页 |
1.5 代谢途径的研究方法 | 第22-24页 |
1.5.1 静息细胞转化法 | 第22页 |
1.5.2 前体饲喂法 | 第22-23页 |
1.5.3 稳定同位素示踪法 | 第23-24页 |
1.5.4 代谢产物的分类鉴定 | 第24页 |
1.6 本文的研究目的与意义 | 第24页 |
1.7 论文的研究内容与技术路线 | 第24-26页 |
1.7.1 论文的主要研究内容 | 第24-25页 |
1.7.2 论文实施的技术路线 | 第25-26页 |
第二章 拟茎点霉属XP-8 在不同天然培养基上的PDG合成能力 | 第26-41页 |
2.1 材料与仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.1 菌种和原料 | 第26页 |
2.1.2 培养基 | 第26页 |
2.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-30页 |
2.2.1 天然原料的选择依据和水分含量的测定 | 第27页 |
2.2.2 促进PDG合成的天然原料筛选 | 第27页 |
2.2.3 菌种在绿豆培养基上合成PDG的条件优化 | 第27-28页 |
2.2.4 PDG的提取,检测和确定 | 第28-30页 |
2.2.5 数据分析 | 第30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
2.3.1 天然原料的水分含量 | 第30页 |
2.3.2 样品中PDG的分析鉴定 | 第30页 |
2.3.3 不同天然原料上PDG的产量 | 第30-34页 |
2.3.4 原料种类对菌落形态和PDG产量的影响 | 第34-36页 |
2.3.5 绿豆培养基上合成PDG的条件优化 | 第36-38页 |
2.4 讨论 | 第38-40页 |
2.5 小结 | 第40-41页 |
第三章 绿豆中促进拟茎点霉属XP-8 合成PDG的主要成分解析 | 第41-57页 |
3.1 材料与仪器设备 | 第41-42页 |
3.1.1 菌种和原料 | 第41页 |
3.1.2 培养基 | 第41页 |
3.1.3 主要试剂 | 第41-42页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第42页 |
3.2 实验方法 | 第42-45页 |
3.2.1 绿豆成分分析及主要组分的分离提取 | 第42-43页 |
3.2.2 静息细胞转化体系 | 第43页 |
3.2.3 绿豆分离组分对菌体生长和产物合成的影响 | 第43页 |
3.2.4 绿豆水溶性多糖的单糖组分对PDG及相关产物合成的影响 | 第43-44页 |
3.2.5 菌体干重的计算 | 第44页 |
3.2.6 代谢产物的提取与测定 | 第44-45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-54页 |
3.3.1 拟茎点霉XP-8 在绿豆颗粒培养基上的产物分析 | 第45-48页 |
3.3.2 绿豆主要成分分析及各分离组分对产物种类和得率的影响 | 第48-49页 |
3.3.3 绿豆水溶性多糖的单糖组分对PDG及相关产物合成的影响 | 第49-54页 |
3.4 讨论 | 第54-55页 |
3.5 小结 | 第55-57页 |
第四章 茎点霉属XP-8 利用绿豆水溶性多糖与淀粉合成PDG与相关产物的作用机制 | 第57-72页 |
4.1 材料与仪器设备 | 第57-58页 |
4.1.1 菌种和原料 | 第57页 |
4.1.2 培养基 | 第57页 |
4.1.3 主要试剂 | 第57-58页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第58页 |
4.2 实验方法 | 第58-61页 |
4.2.1 静息细胞转化体系 | 第58页 |
4.2.2 转化体系中相关中间产物的积累与相关酶活变化 | 第58-59页 |
4.2.3 待测物的提取、检测验证及含量计算 | 第59-60页 |
4.2.4 相关酶类活性的分析检测 | 第60-61页 |
4.3 结果与分析 | 第61-71页 |
4.3.1 转化体系中所得产物的质谱检测结果 | 第61-64页 |
4.3.2 绿豆淀粉促进PDG及相关产物合成的作用机制 | 第64-67页 |
4.3.3 绿豆水溶性多糖促进PDG及相关产物合成的作用机制 | 第67-71页 |
4.4 讨论 | 第71页 |
4.5 小结 | 第71-72页 |
第五章 拟茎点霉属XP-8 合成PDG及相关产物的代谢流解析 | 第72-106页 |
5.1 材料与仪器设 | 第72-73页 |
5.1.1 菌种 | 第72页 |
5.1.2 培养基 | 第72页 |
5.1.3 主要试剂 | 第72页 |
5.1.4 主要仪器与设备 | 第72-73页 |
5.2 实验方法 | 第73-76页 |
5.2.1 静息细胞转化体系和培养条件 | 第73页 |
5.2.2 拟茎点霉转化不同氨基酸为产物的能力 | 第73页 |
5.2.3 苯丙氨酸和酪氨酸对产物合成和相关酶类活性的影响 | 第73-74页 |
5.2.4 苯丙烷途径中的前体物质对产物合成的影响 | 第74页 |
5.2.5 亮氨酸和葡萄糖对产物合成的影响 | 第74页 |
5.2.6 以13C标记的葡萄糖和13C标记苯环的苯丙氨酸为底物时的产物积累 | 第74-75页 |
5.2.7 产物的提取和测定 | 第75页 |
5.2.8 相关酶类的活性检测 | 第75页 |
5.2.9 数据处理和分析 | 第75-76页 |
5.3 结果与分析 | 第76-103页 |
5.3.1 氨基酸对产物合成的影响 | 第76-78页 |
5.3.2 含葡萄糖的转化体系中添加苯丙氨酸对产物合成和相关酶类活性的影响 | 第78-80页 |
5.3.3 含葡萄糖转化体系中添加肉桂酸和对香豆酸对产物合成的影响 | 第80-81页 |
5.3.4 不含葡萄糖的转化体系中添加苯丙烷途径前体物质对产物合成的影响 | 第81-83页 |
5.3.5 含葡萄糖转化体系中添加酪氨酸对产物合成及相关酶类活性的影响 | 第83-84页 |
5.3.6 含葡萄糖转化体系中添加亮氨酸对产物合成和相关酶类活性的影响 | 第84-86页 |
5.3.7 葡萄糖对产物合成的影响 | 第86-88页 |
5.3.8 以不同底物合成产物的代谢流分析 | 第88-94页 |
5.3.9 稳定同位素示踪结果分析 | 第94-103页 |
5.4 讨论 | 第103-105页 |
5.5 小结 | 第105-106页 |
第六章 静息细胞转化产物的抑癌活性与作用机制 | 第106-122页 |
6.1 材料与仪器设备去 | 第106-108页 |
6.1.1 菌种和细胞 | 第106页 |
6.1.2 培养基 | 第106页 |
6.1.3 主要试剂 | 第106-107页 |
6.1.4 主要仪器设备 | 第107-108页 |
6.2 实验方法 | 第108-112页 |
6.2.1 静静息细胞转化化体系的条条件优化与提提取液制备备 | 第108页 |
6.2.2 提取液中主要物质种类与浓度检测 | 第108-109页 |
6.2.3 细胞培养 | 第109页 |
6.2.4 细胞活力和细胞增殖能力分析 | 第109页 |
6.2.5 细胞周期和细胞凋亡分析 | 第109-110页 |
6.2.6 提取液对细胞黏附能力和迁移能力的影响 | 第110页 |
6.2.7 细胞凋亡相关基因的表达分析 | 第110-111页 |
6.2.8 提取液对MMP 9 表达的影响 | 第111-112页 |
6.2.9 数据处理与分析 | 第112页 |
6.3 结果与分析 | 第112-120页 |
6.3.1 转化体系的选择 | 第112页 |
6.3.2 提取液对细胞活力的影响 | 第112-113页 |
6.3.3 提取液对细胞周期和细胞凋亡的影响 | 第113-115页 |
6.3.4 提取液对细胞凋亡相关基因的影响 | 第115-116页 |
6.3.5 提取液对癌细胞黏附能力和迁移能力的影响 | 第116-117页 |
6.3.6 提取液对MMP-9 表达的影响 | 第117-118页 |
6.3.7 提取液中有效成分分析 | 第118-120页 |
6.4 讨论 | 第120-121页 |
6.5 小结 | 第121-122页 |
第七章 结论、创新点与展望 | 第122-124页 |
7.1 结论 | 第122-123页 |
7.2 本论文的创新点 | 第123页 |
7.3 展望 | 第123-124页 |
参考文献 | 第124-136页 |
致谢 | 第136-137页 |
作者简介 | 第137页 |