摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
文献综述 | 第12-22页 |
第一章 趋化因子CCL17 的相关研究进展 | 第12-22页 |
·趋化因子概述 | 第12-13页 |
·趋化因子 | 第12页 |
·趋化因子受体 | 第12-13页 |
·趋化因子CCL17 概述 | 第13-14页 |
·CCL17 结构及生物学特性 | 第13-14页 |
·CCL17 在某些疾病中的研究概况 | 第14-19页 |
·CCL17 与特应性皮炎 | 第14-15页 |
·C CL17 与支气管哮喘 | 第15-19页 |
·C CL17 与系统性红斑狼疮 | 第19页 |
·CCL17 与STAT6 的相关研究 | 第19-21页 |
·STAT6 概述 | 第19-20页 |
·JAK/STAT 信号转导途径 | 第20页 |
·CCL17 与STAT6 的研究 | 第20-21页 |
·展望 | 第21-22页 |
试验研究 | 第22-55页 |
第二章 猪CCL17 基因的克隆及序列分析 | 第22-32页 |
·材料 | 第22-24页 |
·组织来源 | 第22页 |
·主要试剂和工具酶 | 第22-23页 |
·菌株及载体 | 第23页 |
·主要仪器与设备 | 第23页 |
·培养基及试剂配制 | 第23-24页 |
·CaCl2 法转化用材料 | 第24页 |
·主要分子生物学软件 | 第24页 |
·方法 | 第24-28页 |
·基因CCL10 的序列来源 | 第24页 |
·CCL17 基因的分子克隆 | 第24-28页 |
·阳性重组质粒的酶切鉴定 | 第28页 |
·CCL17 基因序列测定与结果分析 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-30页 |
·通过EST 数据库得到的猪CCL17 基因的序列 | 第28-29页 |
·CCL17 基因的PCR 扩增 | 第29-30页 |
·重组克隆载体pMD-CCL17 的构建与测序 | 第30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·小结 | 第31-32页 |
第三章 猪CCL17 基因在大肠杆菌中的表达 | 第32-42页 |
·材料 | 第32-35页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·菌株与质粒 | 第32页 |
·主要工具酶和试剂 | 第32-33页 |
·CaCl2 法转化所需材料 | 第33页 |
·普通试剂的配制 | 第33页 |
·SDS-PAGE 常用试剂配制 | 第33-35页 |
·方法 | 第35-38页 |
·CCL17 基因原核表达载体质粒的构建 | 第35-36页 |
·重组质粒的提取 | 第36页 |
·重组质粒转化E.coli BL21 | 第36-37页 |
·重组质粒的鉴定 | 第37页 |
·重组质粒在大肠杆菌中的表达 | 第37页 |
·表达产物的SDS-PAGE 检测 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·CCL17 基因的PCR 扩增 | 第38-39页 |
·重组克隆载体pMD-CCL17 的构建与测序 | 第39页 |
·重组原核表达载体pET-CCL17 的双酶切鉴定 | 第39-40页 |
·CCL17 重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41页 |
·原核表达系统的选择 | 第41页 |
·CCL17 外源蛋白融合表达的特点 | 第41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第四章 猪CCL17 基因在哺乳动物细胞中的表达 | 第42-55页 |
·材料 | 第42-45页 |
·质粒与菌株 | 第42页 |
·主要试剂、工具酶和耗材 | 第42页 |
·主要仪器与设备 | 第42-43页 |
·细胞培养用试剂 | 第43页 |
·D-Hanks 液的配制(1 000mL) | 第43-44页 |
·细胞消化试剂 ATV(Antibiotic trypsin versen) | 第44页 |
·免疫印迹所需材料 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-50页 |
·CCL17 重组克隆载体质粒的构建 | 第45-47页 |
·CCL17 基因真核重组表达质粒的构建 | 第47-48页 |
·pEGFP-CCL17 重组质粒大提 | 第48-49页 |
·pEGFP-CCL17 及pEGFP-C1 质粒转染SUVEC 细胞 | 第49页 |
·Western-Blot 检测pEGFP-CCL17 在SUVEC 中的表达 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·CCL17 基因的PCR 扩增结果 | 第50页 |
·重组克隆载体pMD-CCL17 的构建与测序 | 第50-51页 |
·重组真核表达载体pEGFP-CCL17 的鉴定 | 第51页 |
·重组质粒pEGFP-CCL17 在SUVEC 细胞中的转染 | 第51-52页 |
·pEGFP-CCL17 在SUVEC 表达产物的Western-Blot 检测 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
·脂质体介导的基因转染 | 第53页 |
·真核表达载体的选择 | 第53-54页 |
·CCL17 转染SUVEC 细胞 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附录 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
个人简介 | 第65页 |