| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 引言 | 第13-17页 |
| 第一部分 MIL75FAB在哺乳动物细胞表面展示及母本抗体MIL75表达纯化 | 第17-31页 |
| 1.实验目的 | 第17页 |
| 2.材料与方法 | 第17-21页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.2 方法 | 第18-21页 |
| 3.结果 | 第21-27页 |
| 3.1 MIL75基因合成 | 第21-22页 |
| 3.2 pFRT-IgG1K-MIL75和pFRT-FTMK-MIL75Fab表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 3.3 MIL75的表达 | 第23-24页 |
| 3.4 MIL75的纯化及鉴定 | 第24-26页 |
| 3.5 MIL75-Fab稳定展示细胞株的流式鉴定 | 第26-27页 |
| 3.6 AID酶的表达 | 第27页 |
| 4.讨论 | 第27-29页 |
| 第一部分 小结 | 第29-31页 |
| 第二部分 基于AID酶的抗体筛选 | 第31-45页 |
| 1.实验目的 | 第31页 |
| 2.材料与方法 | 第31-35页 |
| 2.1 材料 | 第31-32页 |
| 2.2 方法 | 第32-35页 |
| 3.结果 | 第35-42页 |
| 3.1 基于AID酶 的MIL75Fab抗体库的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 流式筛选新的抗PD-1 的抗体 | 第36-38页 |
| 3.3 序列分析确定了三株新的抗PD-1 的抗体 | 第38-39页 |
| 3.4 FV56，FV60，FV70全长表达载体的构建 | 第39-40页 |
| 3.5 FV56，FV60，FV70的瞬时表达 | 第40页 |
| 3.6 三株新抗体的表达纯化 | 第40-42页 |
| 4.讨论 | 第42-43页 |
| 第二部分 小结 | 第43-45页 |
| 第三部分 抗体的体内外活性评价 | 第45-59页 |
| 1.实验目的 | 第45页 |
| 2.材料方法 | 第45-49页 |
| 2.1 材料 | 第45-46页 |
| 2.2 方法 | 第46-49页 |
| 3. 结果 | 第49-55页 |
| 3.1 新筛选的抗体能够结合其抗原PD-1 | 第49页 |
| 3.2 新筛选的抗体不能与CD28家族其他分子结合 | 第49-50页 |
| 3.3 新筛选的抗体亲和力的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.4 FV56、FV60和FV70识别抗原表位的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.5 FV56、FV60和FV70阻断PD-1/PDL1相互作用 | 第52页 |
| 3.6 抗体的体外生物活性 | 第52-54页 |
| 3.7 FV56与MIL75的体内生物学活性 | 第54-55页 |
| 4.讨论 | 第55-57页 |
| 第三部分 小结 | 第57-59页 |
| 全文总结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-63页 |
| 综述 | 第63-75页 |
| 参考文献 | 第71-75页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
