| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 英文缩写词 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 转录因子RB家族的生理功能 | 第8-10页 |
| 1.1.1 成视网膜母细胞瘤 | 第8页 |
| 1.1.2 RB调节机制 | 第8-9页 |
| 1.1.3 RB蛋白与肿瘤的相关性 | 第9-10页 |
| 1.2 RB蛋白的翻译起始机制 | 第10-13页 |
| 1.3 内部核糖体进入位点的研究现状 | 第13-16页 |
| 1.3.1 IRES活性的检测方法 | 第13-14页 |
| 1.3.2 IRES的结构序列特征及其反式作用因子（IRES transacting factors，ITAFs） | 第14页 |
| 1.3.3 IRES介导的翻译的生理意义 | 第14-16页 |
| 1.4 立题意义和主要研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第18-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 2.1.1 菌株、细胞株及质粒来源 | 第18页 |
| 2.1.2 引物序列 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 常用培养基及溶液配制 | 第21页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第21-22页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第22页 |
| 2.2.4 目的基因及载体酶切体系 | 第22页 |
| 2.2.5 产物直接纯化回收及割胶回收 | 第22-23页 |
| 2.2.6 连接与转化 | 第23页 |
| 2.2.7 质粒抽提 | 第23页 |
| 2.2.8 双荧光素酶报告基因表达检测 | 第23-24页 |
| 2.2.9 RT-PCR分析 | 第24-25页 |
| 2.2.10 Q-PCR分析 | 第25-26页 |
| 2.2.11 PrimeSTAR? HS DNA Polymerase PCR | 第26页 |
| 2.2.12 PrimeSTAR DNA Polymerase PCR | 第26-27页 |
| 2.2.13 RNA-蛋白免疫共沉淀实验 | 第27页 |
| 2.2.14 细胞压力处理 | 第27-28页 |
| 2.2.15 细胞周期分析 | 第28页 |
| 2.2.16 细胞转染后压力处理 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-43页 |
| 3.1 转录因子RB家族成员 5′UTR IRES活性的检测 | 第29-34页 |
| 3.1.1 RB家族成员 5′UTR序列与结构分析 | 第29-30页 |
| 3.1.2 RB家族成员 5′UTR IRES活性的初步检测 | 第30-32页 |
| 3.1.3 RB15′UTR IRES活性的进一步确认 | 第32-33页 |
| 3.1.4 不同细胞中RB15′UTR IRES活性的比较 | 第33-34页 |
| 3.2 转录因子RB1 IRES活性中心的探究 | 第34-39页 |
| 3.2.1 RB15′UTR截短重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 RB15′UTR点突变序列重组质粒的构建 | 第35页 |
| 3.2.3 RB15′UTR IRES的活性中心的探究 | 第35-38页 |
| 3.2.4 RB15′UTR反式作用因子的初步探究 | 第38-39页 |
| 3.3 转录因子RB15′UTR IRES细胞生理的初步探究 | 第39-43页 |
| 3.3.1 不同的细胞周期时相对RB15′UTR IRES活性的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.2 RB15′UTR IRES与临床的相关性 | 第41-43页 |
| 第四章 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 4.1 主要结论 | 第43页 |
| 4.2 展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |
