缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-15页 |
前言 | 第16-18页 |
文献回顾 | 第18-31页 |
第一部分 NEDD9在人肝细胞癌组织中的表达及意义 | 第31-50页 |
1 材料(包括所涉及的手术切除标本、所用的试剂耗材以及设备仪器) | 第31-33页 |
1.1 试验中所涉及的组织标本 | 第31页 |
1.2 实验中所用的试剂及耗材 | 第31-32页 |
1.3 实验中所用到的设备和仪器 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-40页 |
2.1 组织标本的采集以及临床病理资料的获取 | 第33页 |
2.2 RT-q PCR方法分析组织细胞中NEDD9 m RNA的表达水平 | 第33-35页 |
2.3 Western blot检测组织中NEDD9蛋白的表达 | 第35-38页 |
2.4 免疫组织化学染色 | 第38-39页 |
2.5 读片 | 第39-40页 |
2.6 随访和预后评估 | 第40页 |
2.7 统计分析 | 第40页 |
3 结果 | 第40-48页 |
3.1 不同组织中NEDD9 m RNA表达水平的差异 | 第40-41页 |
3.2 不同组织中NEDD9蛋白表达水平的差异 | 第41页 |
3.3 NEDD9免疫组织化学染色 | 第41-43页 |
3.4 NEDD9表达水平与临床病理参数之间的关系 | 第43-44页 |
3.5 NEDD9表达水平与肝癌患者的术后复发以及生存预后之间的关系 | 第44-45页 |
3.6 单因素和多因素Cox风险回归分析 | 第45-46页 |
3.7 NEDD9在不同肝癌亚组中的预后价值 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
第二部分 NEDD9对肝癌细胞增殖、迁移以及侵袭能力的影响 | 第50-77页 |
1 材料(包括实验中所涉及的细胞系、所用的试剂耗材以及设备仪器) | 第50-52页 |
1.1 实验所涉及的细胞系 | 第50页 |
1.2 试验中所用试剂以及耗材 | 第50-51页 |
1.3 实验中所用到的设备和仪器 | 第51-52页 |
2 方法 | 第52-64页 |
2.1 细胞培养 | 第52-53页 |
2.2 细胞转染 | 第53-54页 |
2.3 RT-q PCR检测细胞中NEDD9 m RNA的表达 | 第54-57页 |
2.4 Western blot检测细胞中NEDD9蛋白的表达 | 第57-59页 |
2.5 MTT法测定细胞活力 | 第59页 |
2.6 平板克隆形成实验 | 第59-60页 |
2.7 Transwell小室细胞迁移实验 | 第60-61页 |
2.8 Transwell小室细胞侵袭实验 | 第61-62页 |
2.9 细胞划痕修复实验 | 第62页 |
2.10 裸鼠皮下成瘤实验 | 第62-63页 |
2.11 裸鼠肝癌肺转移模型的建立 | 第63页 |
2.12 统计学分析 | 第63-64页 |
3 结果 | 第64-72页 |
3.1 各种肝癌细胞系以及正常肝脏细胞系中NEDD9的差异性表达 | 第64-65页 |
3.2 不同种类细胞系的迁移、侵袭能力的比较。 | 第65页 |
3.3 不同种类细胞系的增殖能力的比较 | 第65-66页 |
3.4 通过基因重组的方法上调和下调不同肝癌细胞系中NEDD9的表达 | 第66-67页 |
3.5 NEDD9表达水平对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第67-68页 |
3.6 NEDD9表达水平对肝癌细胞侵袭能力的影响 | 第68-69页 |
3.7 NEDD9表达水平对肝癌细胞增殖能力的影响 | 第69-71页 |
3.8 NEDD9对MHCC-97H细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤能力的影响 | 第71页 |
3.9 NEDD9在体内对肝癌细胞的侵袭转移能力的影响。 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-77页 |
第三部分 NEDD9影响肝癌细胞增殖、迁移以及侵袭的机制 | 第77-91页 |
1 材料(包括实验中所涉及的细胞系、所用的试剂耗材以及设备仪器) | 第77-78页 |
1.1 实验所涉及的细胞系 | 第77页 |
1.2 实验中所用试剂以及耗材 | 第77页 |
1.3 设备仪器 | 第77-78页 |
2 方法 | 第78-83页 |
2.1 免疫荧光染色细胞骨架 | 第78页 |
2.2 细胞转染 | 第78-80页 |
2.3 Western blot检测细胞中目的基因蛋白的表达 | 第80-83页 |
3 结果 | 第83-86页 |
3.1 NEDD9表达水平与细胞骨架重塑 | 第83页 |
3.2 NEDD9表达水平对Fascin蛋白表达的影响 | 第83-84页 |
3.3 NEDD9表达水平对Snail、Slug以及E-cadherin表达的影响 | 第84-85页 |
3.4 NEDD9表达水平对MMP-2、MMP-9 表达的影响 | 第85-86页 |
4 讨论 | 第86-91页 |
小结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-107页 |
个人简历和研究成果 | 第107-108页 |
致谢 | 第108-109页 |