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家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)抑制家蚕BmN细胞凋亡的功能研究

致谢第7-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-14页
第1章 文献综述第15-28页
    1.1 微孢子虫概述第15-16页
    1.2 微孢子虫结构、组成与侵染方式第16-19页
        1.2.1 微孢子虫的细胞结构与组成第16-17页
        1.2.2 微孢子虫的侵染方式第17-19页
    1.3 细胞凋亡研究概述第19-24页
        1.3.1 细胞凋亡研究进展第20-21页
        1.3.2 家蚕细胞凋亡通路研究进展第21-22页
        1.3.3 细胞色素C与昆虫细胞凋亡的关系第22-24页
    1.4 细胞凋亡与病原微生物的关系第24-26页
    1.5 研究意义与目标第26页
    1.6 研究内容与技术路线第26-28页
        1.6.1 研究内容第26-27页
        1.6.2 技术路线第27-28页
第2章 差异蛋白质组分析家蚕微孢子虫对宿主BmN细胞的影响第28-44页
    2.1 实验材料第29-33页
        2.1.1 生物材料第29页
        2.1.2 主要仪器与设备第29页
        2.1.3 主要试剂及配制第29-33页
    2.2 实验方法第33-37页
        2.2.1 家蚕微孢子虫繁殖、纯化及细胞感染第33页
        2.2.2 透射电镜观察家蚕微孢子虫感染BmN细胞第33-34页
        2.2.3 蛋白样品的提取和定量第34-35页
        2.2.4 样品总蛋白的双向电泳第35-36页
        2.2.5 不同处理样本的质谱分析及数据库搜索第36-37页
    2.3 结果第37-42页
        2.3.1 电镜观察微孢子虫胞内增殖情况第37-38页
        2.3.2 不同细胞样品蛋白浓度第38-39页
        2.3.3 不同感染时期和未感染细胞总蛋白的双向电泳分析第39-40页
        2.3.4 质谱鉴定结果第40-42页
    2.4 讨论与分析第42-44页
第3章 生物信息学分析以及相关蛋白的验证第44-64页
    3.1 实验材料第44-46页
        3.1.1 生物材料第44-45页
        3.1.2 主要仪器与设备第45页
        3.1.3 主要试剂及配置第45-46页
    3.2 实验方法第46-52页
        3.2.1 相关蛋白点的生物信息学分析第46页
        3.2.2 家蚕微孢子虫的繁殖、纯化及细胞感染实验第46页
        3.2.3 家蚕微孢子虫感染4龄幼虫实验第46-47页
        3.2.4 相关蛋白的细胞水平表达检测第47-50页
        3.2.5 相关蛋白的组织水平表达检测第50-51页
        3.2.6 谷胱甘肽酶活性测定第51-52页
    3.3 实验结果第52-60页
        3.3.1 生物信息学分析蛋白点功能分类第52-54页
        3.3.2 差异蛋白分析第54-55页
        3.3.3 细胞水平mRNA验证结果第55-57页
        3.3.4 组织水平mRNA验证结果第57-60页
        3.3.5 谷胱甘肽-S-转移酶活性测定变化第60页
    3.4 讨论与分析第60-64页
第4章 家蚕微孢子虫对宿主BmN细胞凋亡的抑制作用第64-84页
    4.1 实验材料第64-69页
        4.1.1 生物材料第64-65页
        4.1.2 主要仪器与设备第65页
        4.1.3 主要试剂及配制第65-69页
    4.2 实验方法第69-75页
        4.2.1 家蚕微孢子虫的繁殖、纯化及细胞感染第69页
        4.2.2 家蚕BmN细胞凋亡诱导实验第69页
        4.2.3 家蚕微孢子虫感染BmN细胞后凋亡片段观察第69-70页
        4.2.4 流式细胞术分析家蚕微孢子虫感染BmN细胞后凋亡实验第70页
        4.2.5 ROS检测第70页
        4.2.6 凋亡相关基因的表达分析第70-73页
        4.2.7 细胞色素C表达量分析第73-75页
        4.2.8 数据统计分析第75页
    4.3 实验结果第75-81页
        4.3.1 ActD不同处理时间诱导BmN细胞DNA片段化分析第75-76页
        4.3.2 家蚕微孢子虫抑制ActD诱导的BmN细胞DNA片段化结果第76-77页
        4.3.3 流式细胞术检测家蚕微孢子虫抑制BmN细胞凋亡结果第77-78页
        4.3.4 家蚕微孢子虫感染后BmN细胞的ROS检测结果第78-80页
        4.3.5 凋亡相关基因的表达分析结果第80页
        4.3.6 细胞色素C表达量分析结果第80-81页
    4.4 讨论与分析第81-84页
第5章 后记第84-86页
参考文献第86-96页
博士学习期间发表的论文第96-97页
附录1 主要缩略词第97-98页
附录2 差异蛋白的生物信息分析第98-99页
    附图A KEGG代谢信号通路分析结果第98页
    附图B 参与细胞成分蛋白聚类结果第98-99页
    附图C 参与生化过程蛋白聚类结果第99页
    附图D 蛋白分子功能聚类结果第99页

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