摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第14-28页 |
1.1 引言 | 第14-16页 |
1.2 WSSV的病原学 | 第16-22页 |
1.2.1 WSSV的命名和分类地位 | 第16页 |
1.2.2 WSSV的形态结构 | 第16-17页 |
1.2.3 WSSV的基因组结构 | 第17-18页 |
1.2.4 WSSV的结构蛋白 | 第18-22页 |
1.3 WSSV的流行病学 | 第22-23页 |
1.3.1 WSSV的宿主范围 | 第22页 |
1.3.2 WSSV的传播途径 | 第22-23页 |
1.4 白斑综合征(WSD)病症 | 第23-24页 |
1.5 WSSV的检测方法 | 第24-25页 |
1.5.1 目视检查法 | 第24页 |
1.5.2 病理学方法 | 第24页 |
1.5.3 免疫学检测法 | 第24-25页 |
1.5.4 分子生物学检测法 | 第25页 |
1.6 WSSV的防治措施 | 第25-26页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
2 对虾白斑综合征病毒(WSSV)PCR检测方法的确定 | 第28-34页 |
2.1 试验材料 | 第28-29页 |
2.1.1 对虾及病毒样品 | 第28页 |
2.1.2 主要试剂 | 第28页 |
2.1.3 主要仪器 | 第28-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-30页 |
2.2.1 虾样处理 | 第29页 |
2.2.2 对虾基因组DNA的提取 | 第29页 |
2.2.3 套式PCR扩增 | 第29-30页 |
2.2.4 PCR产物的凝胶电泳和测序 | 第30页 |
2.2.5 结果判定 | 第30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-32页 |
2.3.1 WSSV的PCR扩增结果 | 第30-31页 |
2.3.2 样品测序分析 | 第31-32页 |
2.3.3 一扩和二扩的结果比较 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
3 广西区内凡纳滨对虾WSSV携带情况调查 | 第34-41页 |
3.1 材料与试剂 | 第34页 |
3.1.1 虾样来源 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
3.1.3 主要仪器 | 第34页 |
3.2 方法 | 第34-35页 |
3.2.1 虾样采集 | 第34页 |
3.2.2 虾样处理 | 第34-35页 |
3.2.3 DNA的提取 | 第35页 |
3.2.4 PCR反应 | 第35页 |
3.2.5 电泳 | 第35页 |
3.2.6 测序 | 第35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-38页 |
3.3.1 不同养殖区对虾WSSV的检测结果 | 第35-36页 |
3.3.2 不同生长阶段养殖对虾WSSV的携带情况 | 第36页 |
3.3.3 不同年份采集的养殖对虾WSSV的携带情况 | 第36-37页 |
3.3.4 不同地区WSSV的分子遗传学比较 | 第37-38页 |
3.4 讨论 | 第38-41页 |
4 凡纳滨对虾WSSV结构蛋白VP24和VP51的克隆与表达 | 第41-54页 |
4.1 材料与试剂 | 第41-43页 |
4.1.1 实验样品 | 第41页 |
4.1.2 主要试剂 | 第41页 |
4.1.3 主要溶液配制 | 第41-42页 |
4.1.4 主要仪器 | 第42-43页 |
4.2 试验方法 | 第43-47页 |
4.2.1 WSSV的DNA提取 | 第43页 |
4.2.2 PCR扩增vp24和vp51基因 | 第43页 |
4.2.3 vp24和vp51基因的克隆 | 第43-45页 |
4.2.4 重组表达载体的构建 | 第45-46页 |
4.2.5 表达产物SDS-PAGE电泳 | 第46-47页 |
4.3 结果与分析 | 第47-52页 |
4.3.1 vp24基因的克隆与鉴定 | 第47-48页 |
4.3.2 vp51基因的克隆与鉴定 | 第48-51页 |
4.3.3 vp24与vp51表达载体的构建和鉴定 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
6 参考文献 | 第55-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |