摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第1章 绪论 | 第11-31页 |
1.1 DNA损伤的生物学意义及危害 | 第11-14页 |
1.1.1 DNA链的损伤类型 | 第11-12页 |
1.1.2 DNA损伤的修复过程——识别与修复 | 第12-14页 |
1.2 PARP酶的结构、功能、意义与现有检测方法 | 第14-21页 |
1.2.1 PARP家族及PARP1结构 | 第15-16页 |
1.2.2 PARP1功能实现——PAR链的生成 | 第16-17页 |
1.2.3 PARP1活性检测 | 第17-20页 |
1.2.4 PARP1抑制剂抗癌研究 | 第20-21页 |
1.3 尿嘧啶DNA糖基化酶结构、功能、意义及现有检测方法 | 第21-26页 |
1.3.1 尿嘧啶DNA糖基化酶简介 | 第21页 |
1.3.2 尿嘧啶DNA糖基化酶对尿嘧啶的切除 | 第21-23页 |
1.3.3 尿嘧啶-DNA糖基化酶的检测方法 | 第23-26页 |
1.4 新分析传感平台 | 第26-29页 |
1.4.1 超电荷绿色荧光蛋白 | 第26-27页 |
1.4.2 金纳米团簇(AuNCs) | 第27-28页 |
1.4.3 鸟嘌呤四链体脱氧核酶(G4-DNAzyme) | 第28-29页 |
1.5 本文构思 | 第29-31页 |
第2章 一种基于scGFP-AuNCs平台简便免标记的PARP1活性分析方法 | 第31-42页 |
2.1 前言 | 第31-33页 |
2.2 实验部分 | 第33-34页 |
2.2.1 实验材料与仪器设备 | 第33-34页 |
2.2.2 绿色荧光蛋白(scGFP)的表达和纯化 | 第34页 |
2.2.3 多肽模板合成负电AuNCs | 第34页 |
2.2.4 PARP-1 活性的检测与其抑制实验 | 第34页 |
2.3 结果与讨论 | 第34-41页 |
2.3.1 scGFP-AuNCs平台用于PARP1活性分析可行性研究 | 第34-35页 |
2.3.2 scGFP-AuNCs平台可行性研究 | 第35-36页 |
2.3.3 scGFP-AuNCs平台对PARP1响应优化 | 第36-39页 |
2.3.4 PARP1活性分析 | 第39-40页 |
2.3.5 scGFP-AuNCs平台对PARP1响应选择性分析 | 第40页 |
2.3.6 scGFP-AuNCs平台对PARP1抑制剂分析 | 第40-41页 |
2.4 本章小结 | 第41-42页 |
第3章 一种新颖的DNA酶活性抑制效应用于UDG活性检测 | 第42-49页 |
3.1 前言 | 第42-43页 |
3.2 实验部分 | 第43-44页 |
3.2.1 实验材料和仪器 | 第43-44页 |
3.2.2 DNAzyme实验 | 第44页 |
3.2.3 UDG检测实验 | 第44页 |
3.2.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)实验 | 第44页 |
3.3 结果与讨论 | 第44-48页 |
3.3.1 G4-DNAzyme邻位抑制效应分析UDG原理 | 第44-45页 |
3.3.2 G4-DNAzyme分析UDG活性 | 第45-46页 |
3.3.3 G4-DNAzyme分析UDG与其他方法比较 | 第46-48页 |
3.4 本章小结 | 第48-49页 |
第4章 基于目标物触发G-四链体形成的一种比色的智能手机可读的UDG的检测 | 第49-60页 |
4.1 前言 | 第49-50页 |
4.2 实验部分 | 第50-51页 |
4.2.1 实验材料和仪器 | 第50页 |
4.2.2 UDG活性分析 | 第50-51页 |
4.2.3 荧光检测方法检测UDG的活性 | 第51页 |
4.2.4 聚丙烯酰胺凝胶(20%)电泳 | 第51页 |
4.3 结果与讨论 | 第51-58页 |
4.3.1 UDG检测平台可行性分析 | 第51-52页 |
4.3.2 UDG检测实验条件的优化 | 第52-54页 |
4.3.3 UDG活性检测 | 第54-55页 |
4.3.4 RGB色度分析法用于UDG检测 | 第55-56页 |
4.3.5 G4-ThT荧光法用于UDG检测 | 第56-57页 |
4.3.6 UDG传感平台UDG抑制剂与选择性研究 | 第57-58页 |
4.4 本章小结 | 第58-60页 |
总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
附录 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |