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shRNA干扰下调膜联蛋白A5基因表达逆转乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR耐药性的研究

中文摘要第8-12页
英文摘要第12-16页
前言第17-19页
材料和方法第19-28页
    1.实验材料第19-20页
        1.1细胞株第19页
        1.2 主要仪器第19页
        1.3 主要试剂第19-20页
        1.4 主要试剂配制第20页
    2.实验方法第20-28页
        2.1 细胞复苏、培养、传代、冻存第20-21页
        2.2 MTT法检测MCF-7 和MCF-7/ADR细胞的药物敏感性第21页
        2.3 Western-blot方法检测MCF-7 和MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5蛋白水平的表达第21-23页
        2.4 MCF-7 和MCF-7/ADR细胞RNA提取和qRT-PCR第23-25页
        2.5 流式细胞仪检测细胞表面P-gp蛋白的表达第25页
        2.6 荧光共聚焦显微镜分别检测细胞内阿霉素的红色荧光强度和罗丹明123的绿色荧光强度第25-26页
        2.7 293T细胞的转染、病毒收获与病毒滴度测定第26-27页
        2.8 嘌呤霉素(Puromycin)最优浓度筛选第27页
        2.9 慢病毒感染细胞第27页
        2.10 Western-blot方法检测PARP蛋白及其水解片段CleavedPARP的蛋白表达水平第27页
        2.11 统计学分析第27-28页
结果第28-37页
    1.人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5的表达高于敏感株MCF-7 细胞第28-29页
    2.人乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADR对阿霉素耐药,顺铂、多西他赛的敏感性低于敏感株MCF-7第29-30页
    3. 膜联蛋白A5敲低序列的构建及下调MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5基因的表达第30-31页
    4.下调MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5的表达可以增加其药物敏感性第31-32页
    5.下调MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5的表达可以增加细胞内阿霉素的荧光强度第32-33页
    6.下调MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5的表达减弱乳腺癌耐药细胞对药物的外排能力第33-35页
    7.下调MCF-7/ADR细胞中膜联蛋白A5的表达可以促进细胞凋.28(四)讨论第35-37页
讨论第37-39页
结论第39页
参考文献第39-42页
综述第42-52页
    参考文献第49-52页
致谢第52-53页

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