| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 1. 前言 | 第9-11页 |
| 2. 材料与方法 | 第11-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第11-17页 |
| 2.1.1 主要药品和试剂 | 第11-12页 |
| 2.1.2 主要实验仪器及设备 | 第12页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制及贮存 | 第12-17页 |
| 2.1.4 细胞和肿瘤组织 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-29页 |
| 2.2.1 喉癌Hep-2细胞的复苏及传代培养 | 第17-18页 |
| 2.2.2 喉癌Hep-2细胞的冻存 | 第18页 |
| 2.2.3 肿瘤组织总RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.2.4 cDNA合成 | 第19-20页 |
| 2.2.5 PCR | 第20页 |
| 2.2.6 Western-bloting | 第20-22页 |
| 2.2.7 石蜡切片 | 第22-23页 |
| 2.2.8 免疫组化 | 第23-24页 |
| 2.2.9 采用SPSS 17.0统计软件 | 第24-25页 |
| 2.2.10 采用RNAi方法敲低Hep-2细胞中4EBP1蛋白表达量 | 第25-27页 |
| 2.2.11 转染有效4EBP1 siRNA对细胞内p-4EBP1含量的影响 | 第27页 |
| 2.2.12 有效4EBP1 siRNA转染不同时间后对Hep-2细胞增殖的影响 | 第27-28页 |
| 2.2.13 4EBP1敲低以及4EBP1敲低与5-FU处理联用对Hep-2细胞周期的影响 | 第28-29页 |
| 3. 实验结果 | 第29-43页 |
| 3.1 4EBP1和eIF4E mRNA在4种脑肿瘤中的表达 | 第29页 |
| 3.2 4EBP1、eIF4E以及LAMP-2A、LC-3在4种肿瘤组织中的表达情况 | 第29-30页 |
| 3.3 免疫组化法检测4EBP1和eIF4E在四种肿瘤组织中的表达情况 | 第30-31页 |
| 3.4 采用荧光标记的RNA FAM Oligo确定最佳转染效率 | 第31-32页 |
| 3.5 敲低效率最高的4EBP1 siRNA的筛选 | 第32-33页 |
| 3.6 转染有效4EBP1 siRNA对细胞内p-4EBP1含量的影响 | 第33-34页 |
| 3.7 转染有效4EBP1 siRNA不同时间对Hep-2细胞增殖和细胞形态的影响 | 第34-35页 |
| 3.8 转染有效4EBP1 siRNA不同时间对Hep-2细胞增殖的影响 | 第35-39页 |
| 3.9 敲低4EBP1蛋白表达量联合5-FU处理对细胞周期的影响 | 第39-40页 |
| 3.10 敲低4EBP1蛋白表达量联合5-FU处理对细胞自噬活性的影响 | 第40-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 综述：自噬相关蛋白4EBP1与肿瘤发生相关性的初步研究 | 第49-83页 |
| 1. mTOR信号通路与肿瘤细胞生长调控 | 第49-52页 |
| 1.1 mTOR信号通路的分子组成 | 第49-50页 |
| 1.2 mTORC1的上游调节因子 | 第50-51页 |
| 1.3 mTORC1的效应蛋白 | 第51-52页 |
| 2. eIF4E的结构和功能 | 第52-55页 |
| 2.1 eIF4E的结构 | 第52-53页 |
| 2.2 eIF4E的生物学功能 | 第53-55页 |
| 2.2.1 eIF4E参与帽子依赖的蛋白合成 | 第53-54页 |
| 2.2.2 eIF4E与核输出 | 第54页 |
| 2.2.3 eIF4E与无帽子结构的病毒mRNA翻译 | 第54页 |
| 2.2.4 eIF4E的过表达与肿瘤发生 | 第54-55页 |
| 3. 4EBP1的结构和功能 | 第55-59页 |
| 3.1 4EBP1的结构 | 第55-56页 |
| 3.2 4EBP1的功能 | 第56-59页 |
| 3.2.1 4EBP1与帽子结构依赖的翻译 | 第56页 |
| 3.2.2 4EBP1与肿瘤 | 第56页 |
| 3.2.3 p-4EBP1与前列腺癌 | 第56-59页 |
| 4. 自噬与肿瘤 | 第59-69页 |
| 4.1 肿瘤细胞中的自噬调节过程 | 第59-60页 |
| 4.2 自噬过程和凋亡过程在肿瘤细胞中的分子交叉 | 第60-63页 |
| 4.2.1 mTOR信号通路 | 第61页 |
| 4.2.2 Atg5 | 第61-62页 |
| 4.2.3 Bcl-2蛋白家族 | 第62页 |
| 4.2.4 p53 | 第62-63页 |
| 4.2.5 ARF | 第63页 |
| 4.2.6 DAPk | 第63页 |
| 4.3 自噬过程与凋亡过程在癌细胞中的关系 | 第63-64页 |
| 4.4 自噬过程在肿瘤的发生过程中是一把“双刃剑” | 第64-67页 |
| 4.4.1 自噬与肿瘤抑制因子 | 第64-65页 |
| 4.4.2 自噬与肿瘤发生 | 第65页 |
| 4.4.3 自噬调节过程在肿瘤治疗过程中的应用 | 第65页 |
| 4.4.4 自噬诱导剂在肿瘤治疗过程中的应用 | 第65-66页 |
| 4.4.5 自噬抑制剂的应用 | 第66-67页 |
| 4.5 靶向自噬抗癌药物的筛选新策略 | 第67-69页 |
| 4.5.1 采用系统生物学方法探寻新的自噬调节因子 | 第67-68页 |
| 4.5.2 miRNA在靶向自噬治疗癌症中的应用 | 第68页 |
| 4.5.3 以LC-3为基础的自噬调节因子的筛选 | 第68-69页 |
| 总结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第85-86页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第86页 |
