摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 前言 | 第10-23页 |
1 研究背景 | 第10-22页 |
·铜的营养生理功能 | 第10页 |
·铜作为生长促进剂的作用机制 | 第10-12页 |
·猪饲料中高剂量铜的危害 | 第12-13页 |
·细菌对抗重金属的抗性基因 | 第13-16页 |
·大肠杆菌对铜的耐受 | 第16-17页 |
·细菌的抗生素耐药性 | 第17-19页 |
·致病性细菌携带的毒力基因 | 第19-20页 |
·细菌重金属抗性对抗生素抗性基因及毒力基因的协同选择 | 第20-22页 |
2 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 材料和方法 | 第23-37页 |
1 试验材料 | 第23-31页 |
·猪粪样品 | 第23页 |
·土壤样品 | 第23-25页 |
·参考菌株 | 第25页 |
·培养基及各种试剂 | 第25-30页 |
·仪器设备 | 第30-31页 |
2 实验方法 | 第31-37页 |
·样品中肠细菌的分离和纯化 | 第31页 |
·抗铜肠细菌的筛选 | 第31页 |
·最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations, MICs)的测定 | 第31页 |
·DNA 的提取 | 第31-33页 |
·菌种鉴定 | 第33-34页 |
·接合实验 | 第34页 |
·PCR | 第34-36页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
第三章 猪场环境内外铜抗性肠细菌 | 第37-50页 |
1 从猪粪样品及猪场周边土壤中分离筛选抗铜肠细菌 | 第37-38页 |
2 鉴定抗铜肠细菌 | 第38-42页 |
·生理生化鉴定 | 第38页 |
·菌种分子鉴定 | 第38-42页 |
3 抗铜性大肠杆菌 | 第42-47页 |
·9 个猪场猪粪中铜抗大肠杆菌发生率性 | 第42-43页 |
·不同生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率 | 第43-44页 |
·MICs 的测定 | 第44-45页 |
·猪场环境外土样中抗铜细菌出现的百分率 | 第45-46页 |
·抗铜的非大肠杆菌 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-50页 |
·规模化猪场猪粪中铜抗性的肠细菌 | 第47页 |
·鉴定铜抗性肠细菌 | 第47-48页 |
·猪粪中铜抗性大肠杆菌的发生率 | 第48页 |
·猪场外环境分离出抗铜大肠杆菌及其发生率 | 第48-49页 |
·猪粪中抗铜的非大肠杆菌 | 第49-50页 |
第四章 抗铜肠细菌抗性基因PCR 检测 | 第50-65页 |
1 抗铜肠细菌抗性基因的定位 | 第50-51页 |
·抗铜基因的初步定位 | 第50-51页 |
2 抗铜大肠杆菌的抗性基因 | 第51-55页 |
·猪大肠杆菌抗铜基因 | 第51-53页 |
·猪大肠杆菌抗抗生素基因 | 第53-54页 |
·猪大肠杆菌产毒力基因 | 第54-55页 |
3 非大肠杆菌抗性基因 | 第55-61页 |
·抗铜基因 | 第56-58页 |
·抗生素抗性基因 | 第58-60页 |
·产毒力基因 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
·抗铜大肠杆菌中的抗铜基因簇 | 第61-63页 |
·抗铜非大肠杆菌中的抗铜基因 | 第63页 |
·铜盐对抗生素抗性基因及毒力产生基因的协同选择 | 第63-65页 |
第五章 讨论 | 第65-70页 |
1 规模化猪场中的抗铜肠细菌 | 第65-66页 |
2 猪场周边环境的抗铜大肠杆菌 | 第66页 |
3 大肠杆菌抗铜基因 | 第66-67页 |
4 非大肠杆菌抗铜基因 | 第67页 |
5 铜盐对抗生素抗性基因及毒力产生基因的协同选择 | 第67-69页 |
6 结论 | 第69-70页 |
附录一 抗铜大肠杆菌总表 | 第70-78页 |
附录二:英文缩写对照表 | 第78-79页 |
附录三:专利及发表论文情况 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-91页 |
致谢 | 第91页 |