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猪场内外环境中抗铜肠细菌及其抗性基因的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 前言第10-23页
 1 研究背景第10-22页
   ·铜的营养生理功能第10页
   ·铜作为生长促进剂的作用机制第10-12页
   ·猪饲料中高剂量铜的危害第12-13页
   ·细菌对抗重金属的抗性基因第13-16页
   ·大肠杆菌对铜的耐受第16-17页
   ·细菌的抗生素耐药性第17-19页
   ·致病性细菌携带的毒力基因第19-20页
   ·细菌重金属抗性对抗生素抗性基因及毒力基因的协同选择第20-22页
 2 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 材料和方法第23-37页
 1 试验材料第23-31页
   ·猪粪样品第23页
   ·土壤样品第23-25页
   ·参考菌株第25页
   ·培养基及各种试剂第25-30页
   ·仪器设备第30-31页
 2 实验方法第31-37页
   ·样品中肠细菌的分离和纯化第31页
   ·抗铜肠细菌的筛选第31页
   ·最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentrations, MICs)的测定第31页
   ·DNA 的提取第31-33页
   ·菌种鉴定第33-34页
   ·接合实验第34页
   ·PCR第34-36页
   ·琼脂糖凝胶电泳第36-37页
第三章 猪场环境内外铜抗性肠细菌第37-50页
 1 从猪粪样品及猪场周边土壤中分离筛选抗铜肠细菌第37-38页
 2 鉴定抗铜肠细菌第38-42页
   ·生理生化鉴定第38页
   ·菌种分子鉴定第38-42页
 3 抗铜性大肠杆菌第42-47页
   ·9 个猪场猪粪中铜抗大肠杆菌发生率性第42-43页
   ·不同生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率第43-44页
   ·MICs 的测定第44-45页
   ·猪场环境外土样中抗铜细菌出现的百分率第45-46页
   ·抗铜的非大肠杆菌第46-47页
 4 讨论第47-50页
   ·规模化猪场猪粪中铜抗性的肠细菌第47页
   ·鉴定铜抗性肠细菌第47-48页
   ·猪粪中铜抗性大肠杆菌的发生率第48页
   ·猪场外环境分离出抗铜大肠杆菌及其发生率第48-49页
   ·猪粪中抗铜的非大肠杆菌第49-50页
第四章 抗铜肠细菌抗性基因PCR 检测第50-65页
 1 抗铜肠细菌抗性基因的定位第50-51页
   ·抗铜基因的初步定位第50-51页
 2 抗铜大肠杆菌的抗性基因第51-55页
   ·猪大肠杆菌抗铜基因第51-53页
   ·猪大肠杆菌抗抗生素基因第53-54页
   ·猪大肠杆菌产毒力基因第54-55页
 3 非大肠杆菌抗性基因第55-61页
   ·抗铜基因第56-58页
   ·抗生素抗性基因第58-60页
   ·产毒力基因第60-61页
 4 讨论第61-65页
   ·抗铜大肠杆菌中的抗铜基因簇第61-63页
   ·抗铜非大肠杆菌中的抗铜基因第63页
   ·铜盐对抗生素抗性基因及毒力产生基因的协同选择第63-65页
第五章 讨论第65-70页
 1 规模化猪场中的抗铜肠细菌第65-66页
 2 猪场周边环境的抗铜大肠杆菌第66页
 3 大肠杆菌抗铜基因第66-67页
 4 非大肠杆菌抗铜基因第67页
 5 铜盐对抗生素抗性基因及毒力产生基因的协同选择第67-69页
 6 结论第69-70页
附录一 抗铜大肠杆菌总表第70-78页
附录二:英文缩写对照表第78-79页
附录三:专利及发表论文情况第79-80页
参考文献第80-91页
致谢第91页

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