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慢性结肠炎症诱导代谢重编程的功能和机制研究

缩略语表第7-9页
中文摘要第9-13页
Abstract第13-18页
前言第19-21页
文献回顾第21-29页
第一部分 代谢关键酶在DSS诱导小鼠急性结肠炎模型中表达上调第29-41页
    引言第29页
    1 材料第29-31页
        1.1 动物第29页
        1.2 主要试剂第29-30页
        1.3 仪器第30-31页
        1.4 相关试剂的配制第31页
    2 方法第31-37页
        2.1 建立DSS诱导小鼠急性结肠炎模型第31-32页
        2.2 免疫组化实验第32-33页
        2.3 组织总RNA提取第33页
        2.4 RNA反转录为cDNA第33-34页
        2.5 Real-time PCR检测代谢关键酶的RNA表达第34-35页
        2.6 组织蛋白提取第35页
        2.7 BCA法蛋白定量第35-36页
        2.8 Western blot实验第36-37页
    3 结果第37-39页
        3.1 建立DSS诱导小鼠急性结肠炎模型第37-38页
        3.2 代谢关键酶以及p-STAT3, c-Myc等在小鼠急性结肠炎模型中表达升高(免疫组化分析)第38页
        3.3 DSS诱导急性炎症过程中代谢关键酶的mRNA以及蛋白水平表达升高第38-39页
    4 讨论第39-41页
第二部分 持续的肠道慢性炎症发生代谢重编程诱发肿瘤第41-48页
    引言第41页
    1 材料第41页
        1.1 动物第41页
        1.2 主要试剂第41页
        1.3 仪器第41页
    2 方法第41-44页
        2.1 建立DSS诱导小鼠慢性结肠炎模型第41-43页
        2.2 免疫组化实验第43页
        2.3 组织总RNA提取第43页
        2.4 RNA反转录为cDNA第43页
        2.5 Real-Time PCR检测代谢关键酶的RNA表达第43页
        2.6 提取细胞蛋白第43页
        2.7 BCA法蛋白定量第43页
        2.8 Western blot实验第43-44页
    3 结果第44-47页
        3.1 建立DSS诱导小鼠慢性结肠炎模型第44-45页
        3.2 代谢关键酶及p-STAT3, c-Myc在慢性结肠炎模型中表达升高(免疫组化)第45页
        3.3 代谢关键酶的蛋白水平在慢性炎症过程中表达升高第45-46页
        3.4 代谢关键酶在DSS诱导急性炎症过程中mRNA水平表达升高第46-47页
    4 讨论第47-48页
第三部分 IL-6诱导代谢关键酶表达以及乳酸产生增加第48-62页
    引言第48页
    1 材料第48页
        1.1 细胞株第48页
        1.2 主要试剂第48页
        1.3 仪器第48页
        1.4 相关试剂的配制第48页
    2 方法第48-56页
        2.1 细胞培养第48-49页
        2.2 MTT实验第49页
        2.3 细胞总RNA提取第49-50页
        2.4 RNA反转录为cDNA第50页
        2.5 Real-time PCR检测代谢关键酶的mRNA表达第50-51页
        2.6 提取细胞蛋白第51-52页
        2.7 BCA法蛋白定量第52页
        2.8 Western blot实验第52页
        2.9 平板克隆实验第52页
        2.10 流式细胞术测凋亡第52-53页
        2.11 乳酸检测第53-54页
        2.12 LDH-A活性检测第54-55页
        2.13 PKM2活性检测第55-56页
    3 结果第56-60页
        3.1 IL-6 刺激作用下细胞增殖能力增强第56-57页
        3.2 IL-6 促进细胞存活第57-58页
        3.3 IL-6 诱导的炎性微环境促使代谢关键酶表达上调第58-59页
        3.4 IL-6 使代谢酶的活性增强第59页
        3.5 IL-6 作用下乳酸生成量增加第59-60页
    4 讨论第60-62页
第四部分 IL-6 通过激活STAT3/c-Myc通路诱导肠上皮细胞发生代谢重编程第62-66页
    引言第62页
    1 材料第62页
    2 方法第62-63页
        2.1 细胞培养第62页
        2.6 阻断STAT3/c-Myc通路实验提取细胞蛋白第62-63页
        2.7 BCA法蛋白定量第63页
        2.8 Western blot实验第63页
    3 结果第63-65页
        3.1 抑制STAT3活性可下调代谢关键酶的表达第63-64页
        3.2 抑制c-Myc可下调代谢关键酶的表达第64-65页
    4 讨论第65-66页
小结第66-68页
参考文献第68-76页
个人简历与研究成果第76-77页
致谢第77页

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