缩略语表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-13页 |
Abstract | 第13-18页 |
前言 | 第19-21页 |
文献回顾 | 第21-29页 |
第一部分 代谢关键酶在DSS诱导小鼠急性结肠炎模型中表达上调 | 第29-41页 |
引言 | 第29页 |
1 材料 | 第29-31页 |
1.1 动物 | 第29页 |
1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
1.3 仪器 | 第30-31页 |
1.4 相关试剂的配制 | 第31页 |
2 方法 | 第31-37页 |
2.1 建立DSS诱导小鼠急性结肠炎模型 | 第31-32页 |
2.2 免疫组化实验 | 第32-33页 |
2.3 组织总RNA提取 | 第33页 |
2.4 RNA反转录为cDNA | 第33-34页 |
2.5 Real-time PCR检测代谢关键酶的RNA表达 | 第34-35页 |
2.6 组织蛋白提取 | 第35页 |
2.7 BCA法蛋白定量 | 第35-36页 |
2.8 Western blot实验 | 第36-37页 |
3 结果 | 第37-39页 |
3.1 建立DSS诱导小鼠急性结肠炎模型 | 第37-38页 |
3.2 代谢关键酶以及p-STAT3, c-Myc等在小鼠急性结肠炎模型中表达升高(免疫组化分析) | 第38页 |
3.3 DSS诱导急性炎症过程中代谢关键酶的mRNA以及蛋白水平表达升高 | 第38-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第二部分 持续的肠道慢性炎症发生代谢重编程诱发肿瘤 | 第41-48页 |
引言 | 第41页 |
1 材料 | 第41页 |
1.1 动物 | 第41页 |
1.2 主要试剂 | 第41页 |
1.3 仪器 | 第41页 |
2 方法 | 第41-44页 |
2.1 建立DSS诱导小鼠慢性结肠炎模型 | 第41-43页 |
2.2 免疫组化实验 | 第43页 |
2.3 组织总RNA提取 | 第43页 |
2.4 RNA反转录为cDNA | 第43页 |
2.5 Real-Time PCR检测代谢关键酶的RNA表达 | 第43页 |
2.6 提取细胞蛋白 | 第43页 |
2.7 BCA法蛋白定量 | 第43页 |
2.8 Western blot实验 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-47页 |
3.1 建立DSS诱导小鼠慢性结肠炎模型 | 第44-45页 |
3.2 代谢关键酶及p-STAT3, c-Myc在慢性结肠炎模型中表达升高(免疫组化) | 第45页 |
3.3 代谢关键酶的蛋白水平在慢性炎症过程中表达升高 | 第45-46页 |
3.4 代谢关键酶在DSS诱导急性炎症过程中mRNA水平表达升高 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
第三部分 IL-6诱导代谢关键酶表达以及乳酸产生增加 | 第48-62页 |
引言 | 第48页 |
1 材料 | 第48页 |
1.1 细胞株 | 第48页 |
1.2 主要试剂 | 第48页 |
1.3 仪器 | 第48页 |
1.4 相关试剂的配制 | 第48页 |
2 方法 | 第48-56页 |
2.1 细胞培养 | 第48-49页 |
2.2 MTT实验 | 第49页 |
2.3 细胞总RNA提取 | 第49-50页 |
2.4 RNA反转录为cDNA | 第50页 |
2.5 Real-time PCR检测代谢关键酶的mRNA表达 | 第50-51页 |
2.6 提取细胞蛋白 | 第51-52页 |
2.7 BCA法蛋白定量 | 第52页 |
2.8 Western blot实验 | 第52页 |
2.9 平板克隆实验 | 第52页 |
2.10 流式细胞术测凋亡 | 第52-53页 |
2.11 乳酸检测 | 第53-54页 |
2.12 LDH-A活性检测 | 第54-55页 |
2.13 PKM2活性检测 | 第55-56页 |
3 结果 | 第56-60页 |
3.1 IL-6 刺激作用下细胞增殖能力增强 | 第56-57页 |
3.2 IL-6 促进细胞存活 | 第57-58页 |
3.3 IL-6 诱导的炎性微环境促使代谢关键酶表达上调 | 第58-59页 |
3.4 IL-6 使代谢酶的活性增强 | 第59页 |
3.5 IL-6 作用下乳酸生成量增加 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-62页 |
第四部分 IL-6 通过激活STAT3/c-Myc通路诱导肠上皮细胞发生代谢重编程 | 第62-66页 |
引言 | 第62页 |
1 材料 | 第62页 |
2 方法 | 第62-63页 |
2.1 细胞培养 | 第62页 |
2.6 阻断STAT3/c-Myc通路实验提取细胞蛋白 | 第62-63页 |
2.7 BCA法蛋白定量 | 第63页 |
2.8 Western blot实验 | 第63页 |
3 结果 | 第63-65页 |
3.1 抑制STAT3活性可下调代谢关键酶的表达 | 第63-64页 |
3.2 抑制c-Myc可下调代谢关键酶的表达 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-66页 |
小结 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-76页 |
个人简历与研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |