| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-27页 |
| 1.1 骨髓间充质干细胞(MSCs)的研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 MSCs 的定义 | 第11页 |
| 1.1.2 MSCs 的分离与培养 | 第11页 |
| 1.1.3 MSCs 的生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.4 MSCs 表型鉴定方法 | 第12页 |
| 1.1.5 MSCs 的体外分化 | 第12页 |
| 1.1.6 MSCs 应用前景及存在的问题 | 第12-13页 |
| 1.2 动物体细胞核移植的研究概况 | 第13-15页 |
| 1.2.1 动物克隆技术 | 第13-15页 |
| 1.3 影响体细胞核移植效率的因素 | 第15-22页 |
| 1.3.1 供核细胞类型对核移植效率的影响 | 第16页 |
| 1.3.2 供体细胞的细胞周期对核移植效率的影响 | 第16-18页 |
| 1.3.3 受体胞质对核移植效率的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.4 核质相互作用 | 第19-20页 |
| 1.3.5 核移植步骤对克隆效率的影响 | 第20-22页 |
| 1.4 异种细胞核移植的概况 | 第22-26页 |
| 1.4.1 异种细胞核移植的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4.2 影响异种细胞核移植相关因素的机理探索 | 第23-25页 |
| 1.4.3 动物异种核移植技术的应用前景 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 实验动物与试剂 | 第27页 |
| 2.1.2 主要器材 | 第27页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.2.1 猪胎儿成纤维细胞（PFs）的分离培养 | 第28-29页 |
| 2.2.2 pMSCs 分离培养及生物学特性测定 | 第29-31页 |
| 2.2.3 猪卵母细胞体外成熟培养 | 第31页 |
| 2.2.4 猪成熟卵母细胞的孤雌激活 | 第31页 |
| 2.2.5 体细胞核移植 | 第31-33页 |
| 2.2.6 体细胞核移植后重构胚核形态的观察 | 第33页 |
| 2.3 数据处理 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-48页 |
| 3.1 猪胎儿成纤维细胞（PFs）的分离培养 | 第34-35页 |
| 3.1.1 PFs 两种原代培养方法的比较 | 第34页 |
| 3.1.2 PFs 生长曲线的测定 | 第34-35页 |
| 3.2 猪骨髓间充质干细胞（pMSCs）原代培养及生物学特性分析 | 第35-40页 |
| 3.2.1 pMSCs 两种原代培养方法的比较 | 第35-36页 |
| 3.2.2 pMSCs 表面标志测定 | 第36-37页 |
| 3.2.3 pMSCs 生长曲线的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.4 pMSCs 分裂指数的测定 | 第38-40页 |
| 3.2.5 pMSCs 贴壁率的测定 | 第40页 |
| 3.3 PFs 与pMSCs 重构胚发育能力的比较 | 第40-42页 |
| 3.3.1 去核效率的检测 | 第40-41页 |
| 3.3.2 PFs 与pMSCs 重构胚的体外发育 | 第41-42页 |
| 3.4 人-猪异种核移植胚胎发育的初步研究 | 第42-48页 |
| 3.4.1 hMSCs-猪异种重构胚的体外发育 | 第42-44页 |
| 3.4.2 hMSCs-猪异种重构胚激活后2h 和6h 的核形态 | 第44-46页 |
| 3.4.3 hMSCs-猪异种重构胚体外发育阻滞 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-53页 |
| 4.1 核移植供体细胞的分离培养 | 第48-49页 |
| 4.1.1 PFs 的分离培养 | 第48页 |
| 4.1.2 pMSCs 的分离培养 | 第48-49页 |
| 4.2 pMSCs 生物学特性的分析 | 第49页 |
| 4.3 关于去核 | 第49-50页 |
| 4.4 供体细胞类型对核移植效率的影响 | 第50页 |
| 4.5 供核细胞周期对核移植效率的影响 | 第50-51页 |
| 4.6 hMSCs-猪异种重构胚的体外发育 | 第51页 |
| 4.7 两种供核细胞核移植激活后2h 和6h 核形态的比较 | 第51页 |
| 4.8 hMSCs-猪异种重构胚体外发育停滞情况 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第62页 |
