| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩写词表 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-29页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 青蒿简介 | 第15-16页 |
| 1.3 青蒿素的生物合成途径 | 第16-20页 |
| 1.4 青蒿素代谢调控的研究 | 第20-24页 |
| 1.4.1 青蒿素生物合成途径中的关键基因 | 第21-23页 |
| 1.4.2 青蒿素的含量与环境因子的关系 | 第23-24页 |
| 1.5 应用生物技术生产青蒿素 | 第24-27页 |
| 1.5.1 细胞与组织培养 | 第25-26页 |
| 1.5.2 利用基因工程提高青蒿中青蒿素的含量 | 第26-27页 |
| 1.5.3 利用微生物生产青蒿素 | 第27页 |
| 1.6 结论和展望 | 第27-28页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 过量表达青蒿素合成关键基因提高青蒿素含量 | 第29-68页 |
| 2.1 引言 | 第29页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第29-32页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第29页 |
| 2.2.2 菌株 | 第29-30页 |
| 2.2.3 常用质粒载体 | 第30页 |
| 2.2.4 酶与试剂盒 | 第30页 |
| 2.2.5 常用试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.6 常用试剂及培养基的制备 | 第31-32页 |
| 2.3 方法 | 第32-51页 |
| 2.3.1 青蒿无菌苗培养 | 第32页 |
| 2.3.2 青蒿素合成途径关键酶编码基因的克隆 | 第32-36页 |
| 2.3.3 植物表达载体的构建 | 第36-43页 |
| 2.3.4 青蒿叶片的遗传转化 | 第43-44页 |
| 2.3.5 转基因青蒿的分子检测 | 第44-50页 |
| 2.3.6 转基因青蒿中青蒿素含量的检测 | 第50-51页 |
| 2.4 结果 | 第51-64页 |
| 2.4.1 青蒿素生物合成途径中关键基因的克隆 | 第51-52页 |
| 2.4.2 植物表达载体的构建 | 第52-53页 |
| 2.4.3 青蒿的遗传转化及再生 | 第53-54页 |
| 2.4.4 转基因青蒿的PCR 检测 | 第54-56页 |
| 2.4.5 转基因青蒿的Southern blot 分析 | 第56-60页 |
| 2.4.6 转基因青蒿中青蒿素含量的测定 | 第60-64页 |
| 2.5 讨论 | 第64-68页 |
| 第三章 ABA 处理对青蒿素含量及青蒿素合成途径中关键基因的影响 | 第68-76页 |
| 3.1 引言 | 第68页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第68-69页 |
| 3.3 方法 | 第69-71页 |
| 3.3.1 青蒿苗的准备及ABA 处理 | 第69页 |
| 3.3.2 青蒿素含量的测定 | 第69页 |
| 3.3.3 青蒿悬浮细胞的培养 | 第69页 |
| 3.3.4 RT-PCR 半定量分析关键基因的表达情况 | 第69-71页 |
| 3.4 结果 | 第71-73页 |
| 3.4.1 ABA 处理后青蒿中青蒿素含量的变化 | 第71-72页 |
| 3.4.2 ABA 处理对青蒿素生物合成关键基因表达的影响 | 第72-73页 |
| 3.5 讨论 | 第73-76页 |
| 第四章 cyp71av1 基因启动子的克隆及功能分析 | 第76-89页 |
| 4.1 引言 | 第76页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第76-77页 |
| 4.3 方法 | 第77-83页 |
| 4.3.1 植物材料及DNA 提取 | 第77页 |
| 4.3.2 Thermal Asymmetric Interlaced PCR (TAIL-PCR) | 第77-79页 |
| 4.3.3 Genomic DNA walking | 第79-81页 |
| 4.3.4 转录起始位点的确定 | 第81-82页 |
| 4.3.5 5’端缺失启动子与gus 报告基因的融合 | 第82-83页 |
| 4.4 结果 | 第83-88页 |
| 4.4.1 cyp71av1 基因启动子的克隆 | 第83-84页 |
| 4.4.2 转录起始位点的确定 | 第84-85页 |
| 4.4.3 cyp71av1 基因启动子的序列分析 | 第85-87页 |
| 4.4.4 5’端缺失启动子与gus 报告基因的融合 | 第87-88页 |
| 4.5 讨论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第100-101页 |
