| 提要 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第1章 绪论 | 第18-26页 |
| 1.1 Med19与肿瘤 | 第18-19页 |
| 1.2 RNA干扰技术 | 第19页 |
| 1.3 RNAi技术与胃癌治疗 | 第19-26页 |
| 1.3.1 RNAi直接作用于胃癌的靶向基因 | 第20-22页 |
| 1.3.2 通过抑制肿瘤血管新生而起到间接治疗胃癌的目的 | 第22页 |
| 1.3.3 RNAi在胃癌化疗多药耐药方面的研究 | 第22-26页 |
| 第2章 文献综述 | 第26-40页 |
| 2.1 中介体的发现 | 第26-28页 |
| 2.2 中介体的结构 | 第28-32页 |
| 2.2.1 酵母中介体结构 | 第28-29页 |
| 2.2.2 哺乳动物的中介体 | 第29-32页 |
| 2.3 中介体在转录调节中的功能和作用机制 | 第32-36页 |
| 2.3.1 中介体与RNA聚合酶Ⅱ | 第32-33页 |
| 2.3.2 中介体与转录激活 | 第33-34页 |
| 2.3.3 中介体与转录阻抑 | 第34-35页 |
| 2.3.4 中介体对转录调节的作用机制 | 第35-36页 |
| 2.4 Med19的发现和功能 | 第36-37页 |
| 2.5 Med19在肿瘤中的应用 | 第37-40页 |
| 第3章 Med19在人胃癌中的表达及其临床意义 | 第40-54页 |
| 3.1 材料与方法 | 第41-47页 |
| 3.1.1 标本和细胞株 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第42页 |
| 3.1.4 人胃癌细胞株SGC7901、MGC803的培养 | 第42-43页 |
| 3.1.5 免疫组织化学方法检测胃癌组织、癌旁胃组织、正常胃组织中Med19的蛋白表达 | 第43-44页 |
| 3.1.6 real-time PCR方法检测Med19 mRNA在胃癌细胞株和胃癌组织、癌旁胃组织及正常胃组织中的表达 | 第44-47页 |
| 3.1.7 统计学处理 | 第47页 |
| 3.2 结果 | 第47-51页 |
| 3.2.1 Med19蛋白在胃癌组织、癌旁胃组织、正常胃组织中的表达 | 第47-48页 |
| 3.2.2 Med19表达与临床病理特征的关系 | 第48-49页 |
| 3.2.3 人胃癌组织、癌旁胃组织、正常胃组织和胃癌细胞株中Med | 第49-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-54页 |
| 第4章 Med19靶向RNA干扰重组慢病毒的构建与包装 | 第54-78页 |
| 4.1 材料与方法 | 第55-68页 |
| 4.1.1 质粒、载体及菌株 | 第55页 |
| 4.1.2 常用酶类、分子量标准品、试剂盒 | 第55-56页 |
| 4.1.3 主要试剂配制 | 第56页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第56-57页 |
| 4.1.5 重组质粒pLVTHM-siMed19的构建 | 第57-60页 |
| 4.1.6 重组si-Med19慢病毒的包装 | 第60-62页 |
| 4.1.7 重组shRNA慢病毒体外感染效率的测定 | 第62页 |
| 4.1.8 shRNA慢病毒在胃癌细胞SGC7901中有效沉默Med19靶点的筛选 | 第62-67页 |
| 4.1.9 统计学处理 | 第67-68页 |
| 4.2 结果 | 第68-73页 |
| 4.2.1 重组质粒pLVTHM-siMed19的PCR鉴定 | 第68-69页 |
| 4.2.2 pLVTHM-siMed19慢病毒载体的测序鉴定 | 第69页 |
| 4.2.3 慢病毒质粒共转染293T细胞 | 第69-70页 |
| 4.2.4 慢病毒滴度测定 | 第70-71页 |
| 4.2.5 pLVTHM-siMed19慢病毒表达载体感染SGC-7901细胞 | 第71-72页 |
| 4.2.6 有效沉默Med19基因的siRNA靶点筛选 | 第72-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-78页 |
| 第5章 RNAi靶向抑制Med19表达对人胃癌细胞株SGC7901、MGC | 第78-92页 |
| 5.1 材料与方法 | 第79-84页 |
| 5.1.1 主要试剂、细胞株 | 第79-80页 |
| 5.1.2 主要仪器 | 第80页 |
| 5.1.3 人胃癌细胞株SGC7901、MGC803的体外培养 | 第80-81页 |
| 5.1.4 慢病毒感染SGC7901、MGC803细胞株 | 第81页 |
| 5.1.5 MTT法检测shRNA慢病毒对SGC7901、MGC803细胞增殖的影响 | 第81-82页 |
| 5.1.6 流式细胞仪检测shRNA慢病毒对胃癌细胞周期的影响 | 第82-83页 |
| 5.1.7 克隆形成实验 | 第83页 |
| 5.1.8 体外细胞侵袭试验 | 第83-84页 |
| 5.1.9 统计学处理 | 第84页 |
| 5.2 结果 | 第84-89页 |
| 5.2.1 MTT法检测shRNA慢病毒对SGC7901、MGC803细胞增殖的影响 | 第84-86页 |
| 5.2.2 流式细胞仪检测shRNA慢病毒对胃癌细胞周期的影响 | 第86-87页 |
| 5.2.3 RNA干扰沉默Med19基因的表达对胃癌细胞克隆形成的影响 | 第87-88页 |
| 5.2.4 siRNA干扰抑制Med19基因的表达对胃癌细胞侵袭转移的影响 | 第88-89页 |
| 5.3 讨论 | 第89-92页 |
| 第6章 结论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-110页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
