| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-16页 |
| 第一章 APL 发病及ATRA 对APL 的分化治疗和机理 | 第16-21页 |
| ·ATRA 对APL 的分化治疗 | 第17-19页 |
| ·体外研究 | 第17-18页 |
| ·ATRA 对APL 的缓解诱导治疗 | 第18-19页 |
| ·A TRA 在APL 分化治疗中的机理 | 第19-21页 |
| ·APL 成因分析 | 第19页 |
| ·t(11;17)和PLZF-RARα以及其它染色体易位 | 第19-20页 |
| ·ATRA 治疗的机理 | 第20-21页 |
| 第二章 RIG-I 基因的生物学功能 | 第21-38页 |
| ·RIG-I 在先天性免疫中的作用 | 第21-37页 |
| ·前言 | 第21-23页 |
| ·RIG-I | 第23-24页 |
| ·MDA-5 | 第24-25页 |
| ·LGP2 | 第25-26页 |
| ·核酸识别 | 第26-27页 |
| ·RLRs 信号传导途径 | 第27-29页 |
| ·信号通路的负向调控 | 第29-34页 |
| ·病毒的对抗措施 | 第34-37页 |
| ·RIG-I 在造血发育中的作用 | 第37-38页 |
| 第三章 PI3K-AKT-m TORC1 信号通路概述 | 第38-50页 |
| ·PI3K-AKT-m TORC1 信号通路主要成员 | 第38-42页 |
| ·PI3K | 第38页 |
| ·PTEN | 第38-39页 |
| ·AKT | 第39页 |
| ·mTOR | 第39-40页 |
| ·4EBP | 第40-41页 |
| ·S6K | 第41页 |
| ·FOXO | 第41-42页 |
| ·PI3K-AKT-m TORC1 信号通路 | 第42-44页 |
| ·PI3K-AKT 信号通路 | 第42-43页 |
| ·m TORC1 信号通路 | 第43-44页 |
| ·PI3K-AKT-m TORC1 信号通路与肿瘤的发生 | 第44-46页 |
| ·信号通路成员抑制剂对于肿瘤的治疗 | 第46-50页 |
| ·抑制PI3K 对于肿瘤的治疗 | 第47页 |
| ·抑制m TOR 活性对肿瘤的治疗 | 第47-50页 |
| 第四章 小鼠Rig-I 基因的原核表达、纯化及其抗体制备 | 第50-67页 |
| ·材料与方法 | 第50-60页 |
| ·材料 | 第50-52页 |
| ·方法 | 第52-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·mRig-I-N 的PCR 扩增 | 第60-61页 |
| ·重组质粒pGEX-4T2-m Rig-I-N 的鉴定 | 第61-62页 |
| ·原核表达载体pGEX-4T2-m Rig-I 的鉴定 | 第62页 |
| ·融合蛋白GST-mRig-I 的原核表达 | 第62-63页 |
| ·融合蛋白GST-mRig-I 的纯化 | 第63-64页 |
| ·抗体的效价检测 | 第64页 |
| ·制备抗体对293T 过表达mRig-I 蛋白的Western blot 特异性分析 | 第64-65页 |
| ·制备抗体对小鼠内源Rig-I 蛋白的Western blot 特异性分析 | 第65页 |
| ·讨论 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-67页 |
| 第五章 人Rig-I 蛋白N 端CARD 结构域多克隆抗体制备与鉴定 | 第67-76页 |
| ·材料与方法 | 第67-69页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·方法 | 第68-69页 |
| ·结果 | 第69-74页 |
| ·hRig-I-N 的PCR 结果 | 第69-70页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第70-71页 |
| ·GST-hRig-I-N 融合蛋白的诱导表达 | 第71页 |
| ·融合蛋白GST-hRig-I-N 的纯化 | 第71-72页 |
| ·抗体的效价检测 | 第72页 |
| ·制备抗体对纯化的人Rig-I-N 蛋白的Western blot 特异性分析 | 第72-73页 |
| ·制备抗体对293T 过表达hRig-I-N 蛋白的Western blot 特异性分析 | 第73-74页 |
| ·免疫荧光分析 | 第74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 第六章 利用Tet-Off 系统建立诱导表达人Rig-I 的U937 细胞 | 第76-86页 |
| ·材料和方法 | 第76-80页 |
| ·材料 | 第76-77页 |
| ·方法 | 第77-80页 |
| ·结果 | 第80-84页 |
| ·pTRE2-Rig-I-hyg 反应质粒的构建 | 第80-82页 |
| ·pTRE2-Rig-I-hyg 反应质粒表达Rig-I 的验证 | 第82页 |
| ·利用Tet-Off 调控系统诱导表达人Rig-I 的U937 细胞筛选 | 第82页 |
| ·单克隆细胞的获取 | 第82-83页 |
| ·最佳单克隆细胞的获取 | 第83-84页 |
| ·R19 的Rig-I 表达动力学变化 | 第84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| ·小结 | 第85-86页 |
| 第七章 基于Tet-Off 系统的Doxycycline 调控Rig-I 基因RNA 干扰U937 稳定细胞系的建立 | 第86-103页 |
| ·材料和方法 | 第86-93页 |
| ·材料 | 第86-87页 |
| ·方法 | 第87-93页 |
| ·结果 | 第93-100页 |
| ·p201-Con~(miR-30)，p201-Rig-I-ShRNA-1~(miR-30)，p201-Rig-I-ShRNA-2~(miR-30) 慢病毒表达质粒的构建 | 第93页 |
| ·Western blot 验证Rig-I-ShRNA-1~(miR-30) 和Rig-I-ShRNA-2~(miR-30) 对人Rig-I 的干扰效果 | 第93-94页 |
| ·pTRE2-GFP-Con~(miR-30)-hyg，pTRE2-GFP-Rig-I-ShRNA-1~(miR-30)-hyg 和pTRE2-GFP- Rig-I-ShRNA-2~(miR-30)-hyg 可调控RNAi 质粒的构建 | 第94-96页 |
| ·可调控RNAi 稳定细胞系U937(Tet-Off)-Con，U937(Tet-Off)-ShRNA-1，U937 (Tet- Off)-ShRNA-2 的建立和单克隆化 | 第96-98页 |
| ·U(Tet-Off)-Con，U(Tet-Off)-shRNA-1，U(Tet-Off)-shRNA-2 最佳单克隆细胞的获取 | 第98-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| ·基于Tet-Off 系统Doxycycline 调控的Rig-I 基因稳定RNAi U937 细胞特点 | 第100-101页 |
| ·基于Tet-Off 系统Doxycycline 调控的稳定RNAi U937 细胞的不足 | 第101-102页 |
| ·小结 | 第102-103页 |
| 第八章 Rig-I 负调控AKT 通路参与ATRA 和IFNα合用诱导的U937 细胞增殖抑制、分化、凋亡和周期阻滞 | 第103-121页 |
| ·材料与方法 | 第103-109页 |
| ·材料 | 第103-104页 |
| ·方法 | 第104-109页 |
| ·结果 | 第109-118页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用对U937 细胞增殖的影响 | 第109页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用对U937 细胞分化的影响 | 第109-110页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用对U937 细胞凋亡的影响 | 第110-111页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用对U937 细胞周期的影响 | 第111-112页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用不同时间点U937 细胞Rig-I 表达的Real-time PCR 分析 | 第112-113页 |
| ·ATRA，IFNα，IFNγ单用和组合使用U937 细胞Rig-I 表达的Western blot分析 | 第113页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞增殖的影响 | 第113-114页 |
| ·Western blot 检测ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞Rig-I 的表达 | 第114-115页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞分化的影响 | 第115页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞凋亡的影响 | 第115页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞周期的影响 | 第115-116页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1，U937shRNA-2 细胞分化的形态学观察 | 第116页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937Con，U937shRNA-1 信号通路的Western blot分析 | 第116-118页 |
| ·讨论 | 第118-120页 |
| ·ATRA 和IFNα合用对U937 增殖抑制、分化、凋亡和周期阻滞具有协同作用 | 第118页 |
| ·Rig-I 表达参与ATRA 和IFNα合用诱导U937 的增殖抑制、分化、凋亡和周期阻滞 | 第118页 |
| ·Rig-I 负调控AKT-m TOR 信号通路参与ATRA 和IFNα合用诱导U937 增殖抑制、分化、凋亡和周期阻滞 | 第118-119页 |
| ·Rig-I 负调控AKT-FOXO3α信号通路参与ATRA 和IFNα合用诱导U937增殖抑制、分化、凋亡和周期阻滞 | 第119-120页 |
| ·小结 | 第120-121页 |
| 结论 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-145页 |
| 缩略词表 | 第145-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 作者简介 | 第150页 |
