| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一部分 高通量筛选蛋白复性缓冲液平台建立 | 第11-17页 |
| 一、实验材料 | 第11页 |
| 二、实验方法 | 第11-13页 |
| 1. 包涵体复性筛选系统所包含复性条件 | 第11页 |
| 2. 包涵体复性筛选系统的成分 | 第11-12页 |
| 3. 包涵体蛋白复性缓冲液筛选流程 | 第12-13页 |
| 三、实验结果 | 第13-15页 |
| 四、讨论 | 第15-17页 |
| 第二部分 rhBMP-2m的原核表达,纯化及细胞生物学活性检测 | 第17-35页 |
| 一、实验材料 | 第17-18页 |
| 1. 试剂 | 第17页 |
| 2. 生物材料 | 第17页 |
| 3. 仪器 | 第17页 |
| 4. 溶液配置 | 第17-18页 |
| 二、实验方法 | 第18-24页 |
| 1. 质粒DNA小提提取方法 | 第18页 |
| 2. DNA重组 | 第18-21页 |
| 3. BL21(DE3)/pET24-rhBMP-2m表达与纯化 | 第21-23页 |
| 4. rhBMP-2m理化性质及活性测定 | 第23-24页 |
| 三、实验结果 | 第24-32页 |
| 5. 表达载体pET-24-rhBMP-2m的构建 | 第24-26页 |
| 6. rhBMP-2m的诱导表达 | 第26页 |
| 7. rhBMP-2m包涵体分离,纯化及复性结果 | 第26-31页 |
| 8. rhBMP-2m活性鉴定结果 | 第31-32页 |
| 四、讨论 | 第32-35页 |
| 1. rhBMP-2m包涵体的洗涤 | 第32-33页 |
| 2. 变性rhBMP-2m的复性 | 第33页 |
| 3. 复性后rhBMP-2m的可溶性及活性 | 第33-35页 |
| 第三部分 抗rhBMP-2m单克隆抗体的制备 | 第35-43页 |
| 一、实验材料 | 第35-36页 |
| 1. 实验动物 | 第35页 |
| 2. 主要试剂及抗体 | 第35页 |
| 3. 溶液配制 | 第35-36页 |
| 二、方法 | 第36-40页 |
| 1. 抗原制备 | 第36页 |
| 2. 免疫小鼠 | 第36-37页 |
| 3. ELISA法检测被免疫小鼠血清效价流程 | 第37页 |
| 4. 单克隆抗体制备 | 第37-39页 |
| 5. 抗体鉴定 | 第39页 |
| 6. 抗体纯化 | 第39-40页 |
| 三、实验结果 | 第40-41页 |
| 四、讨论 | 第41-43页 |
| 小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 综述1 骨形态发生蛋白研究进展 | 第47-59页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 综述2 蛋白复性研究进展 | 第59-69页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
