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鸡TRAF3、TRAF6基因的克隆、表达及其在鸡抗病毒免疫应答过程中的作用研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
常用词语缩写第9-13页
1. 文献综述第13-26页
    1.1 抗病育种与先天免疫第13-16页
        1.1.1 抗病育种第13-14页
        1.1.2 开展抗病育种的现实困难和目标第14页
        1.1.3 抗病育种的主要手段第14-16页
    1.2 先天免疫第16-25页
        1.2.1 肿瘤坏死因子受体相关因子TRAFs(TRAF的家族)第17-18页
        1.2.2 肿瘤坏死因子受体相关因子3/6的发现第18-19页
        1.2.3 肿瘤坏死因子受体相关因子3/6分子结构,分子作用机制第19-20页
        1.2.4 TRAF3的功能第20-23页
        1.2.5 TRAF6的功能第23-25页
    1.3 研究目的和意义第25-26页
2. 材料和方法第26-36页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 试验样品第26页
        2.1.2 试剂与耗材料第26-27页
        2.1.3 主要仪器设备第27-28页
        2.1.4 所用试剂的配制第28-29页
    2.2 试验方法第29-36页
        2.2.1 引物设计与合成第29-30页
        2.2.2 总RNA提取第30-31页
        2.2.3 cDNA模板的制备第31页
        2.2.4 目的基因普通PCR的扩增第31-32页
        2.2.5 DNA片段的克隆测序第32-34页
        2.2.6 鸡胚成纤维细胞的制备第34-35页
        2.2.7 转染鸡胚成纤维肌细胞第35页
        2.2.8 鸡胚成纤维肌细胞RNA的提取及反转录第35页
        2.2.9 实时荧光定量PCR第35-36页
        2.2.10 统计分析第36页
3. 结果与分析第36-59页
    3.1 TRAF3和TRAF6的克隆、测序第36-43页
        3.1.1 RNA抽提结果第36-37页
        3.1.2 PCR扩增结果第37页
        3.1.3 鸡TRAF3基因的克隆、氨基酸序列比对第37-40页
        3.1.4 鸡TRAF6基因的克隆、序列第40-43页
    3.2 TRAF3和T-AF6在鸡的肝、脾、肾等组织中的表达分布第43-45页
    3.3 鸡胚成纤维细胞抗病毒免疫过程中的作用第45-59页
        3.3.1 不同浓度的Ploy(dA:dT)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因的表达情况第45-46页
        3.3.2 不同浓度的Ploy(I:C)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第46-48页
        3.3.3 Ploy(dA:dT)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第48-49页
        3.3.4 Ploy(I:C)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第49-50页
        3.3.5 NDV不同滴度M毒株转染CEF后TRAF3/6及其下游基因的表达情况第50-51页
        3.3.6 不同毒力毒株感染转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第51-54页
        3.3.7 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后胸腺中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第54-56页
        3.3.8 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后脾脏中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第56-58页
        3.3.9 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后法氏囊中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况第58-59页
4 讨论第59-66页
    4.1 TRAF3和TRAF6的克隆第60页
    4.2 TRAF3和TRAF6在未感染机体中各个组织器官中的表达第60-61页
    4.3 Poly(dA:dT)转染对TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响第61-62页
    4.4 Poly(I:C)转染对TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响第62页
    4.5 NDV不同滴度和强弱毒株NDV转染CEF后TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响第62-64页
    4.6 新城疫病毒对不同时期免疫组织中TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响第64-66页
5 结论第66-67页
参考文献第67-74页
致谢第74-75页
攻读硕士期间发表论文情况第75页

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