摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
常用词语缩写 | 第9-13页 |
1. 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 抗病育种与先天免疫 | 第13-16页 |
1.1.1 抗病育种 | 第13-14页 |
1.1.2 开展抗病育种的现实困难和目标 | 第14页 |
1.1.3 抗病育种的主要手段 | 第14-16页 |
1.2 先天免疫 | 第16-25页 |
1.2.1 肿瘤坏死因子受体相关因子TRAFs(TRAF的家族) | 第17-18页 |
1.2.2 肿瘤坏死因子受体相关因子3/6的发现 | 第18-19页 |
1.2.3 肿瘤坏死因子受体相关因子3/6分子结构,分子作用机制 | 第19-20页 |
1.2.4 TRAF3的功能 | 第20-23页 |
1.2.5 TRAF6的功能 | 第23-25页 |
1.3 研究目的和意义 | 第25-26页 |
2. 材料和方法 | 第26-36页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 试验样品 | 第26页 |
2.1.2 试剂与耗材料 | 第26-27页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.1.4 所用试剂的配制 | 第28-29页 |
2.2 试验方法 | 第29-36页 |
2.2.1 引物设计与合成 | 第29-30页 |
2.2.2 总RNA提取 | 第30-31页 |
2.2.3 cDNA模板的制备 | 第31页 |
2.2.4 目的基因普通PCR的扩增 | 第31-32页 |
2.2.5 DNA片段的克隆测序 | 第32-34页 |
2.2.6 鸡胚成纤维细胞的制备 | 第34-35页 |
2.2.7 转染鸡胚成纤维肌细胞 | 第35页 |
2.2.8 鸡胚成纤维肌细胞RNA的提取及反转录 | 第35页 |
2.2.9 实时荧光定量PCR | 第35-36页 |
2.2.10 统计分析 | 第36页 |
3. 结果与分析 | 第36-59页 |
3.1 TRAF3和TRAF6的克隆、测序 | 第36-43页 |
3.1.1 RNA抽提结果 | 第36-37页 |
3.1.2 PCR扩增结果 | 第37页 |
3.1.3 鸡TRAF3基因的克隆、氨基酸序列比对 | 第37-40页 |
3.1.4 鸡TRAF6基因的克隆、序列 | 第40-43页 |
3.2 TRAF3和T-AF6在鸡的肝、脾、肾等组织中的表达分布 | 第43-45页 |
3.3 鸡胚成纤维细胞抗病毒免疫过程中的作用 | 第45-59页 |
3.3.1 不同浓度的Ploy(dA:dT)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因的表达情况 | 第45-46页 |
3.3.2 不同浓度的Ploy(I:C)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第46-48页 |
3.3.3 Ploy(dA:dT)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第48-49页 |
3.3.4 Ploy(I:C)转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第49-50页 |
3.3.5 NDV不同滴度M毒株转染CEF后TRAF3/6及其下游基因的表达情况 | 第50-51页 |
3.3.6 不同毒力毒株感染转染CEF后TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第51-54页 |
3.3.7 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后胸腺中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第54-56页 |
3.3.8 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后脾脏中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第56-58页 |
3.3.9 标准强毒NDV与中等毒力NDV感染机体后法氏囊中TRAF3/6及其下游基因不同时间点的表达情况 | 第58-59页 |
4 讨论 | 第59-66页 |
4.1 TRAF3和TRAF6的克隆 | 第60页 |
4.2 TRAF3和TRAF6在未感染机体中各个组织器官中的表达 | 第60-61页 |
4.3 Poly(dA:dT)转染对TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响 | 第61-62页 |
4.4 Poly(I:C)转染对TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响 | 第62页 |
4.5 NDV不同滴度和强弱毒株NDV转染CEF后TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响 | 第62-64页 |
4.6 新城疫病毒对不同时期免疫组织中TRAF3、TRAF6及其下游基因相对表达量的影响 | 第64-66页 |
5 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第75页 |