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牛SYCP3基因的克隆、表达与启动子区甲基化分析

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一部分 文献综述第12-34页
 第一章 牦牛与黄牛种间杂交研究进展第12-22页
  1 牦牛的杂种优势与杂交改良现状第12-13页
  2 犏牛雄性不育研究进展第13-18页
   ·形态学研究第14页
   ·组织解剖学研究第14-15页
   ·细胞遗传学研究第15-16页
   ·内分泌学研究第16页
   ·分子遗传学研究第16-17页
   ·表观遗传学研究第17-18页
  3 总结与展望第18-19页
  参考文献第19-22页
 第二章 雄性哺乳动物SYCP3基因研究进展第22-34页
  1 SYCP3基因的发现及命名第22-23页
  2 SYCP3结构及定位第23-25页
   ·哺乳动物中SYCP3基因的表达第23页
   ·SYCP3蛋白定位与结构第23-25页
  3 雄性哺乳动物中SYCP3蛋白生物功能第25-29页
   ·SYCP3蛋白构成精母细胞SC侧成分第25-28页
   ·SYCP3蛋白参与哺乳动物精子发生第28-29页
  4 总结与展望第29-30页
  参考文献第30-34页
第二部分 实验研究第34-72页
 第三章 牛SYCP3基因的克隆与分析第34-50页
  1 材料与方法第34-38页
   ·实验动物及材料第34页
   ·睾丸组织样中RNA的提取第34-35页
   ·总RNA中mRNA反转录第35页
   ·引物设计与合成第35-36页
   ·PCR扩增反应第36页
   ·PCR产物回收及测序第36-37页
   ·序列的拼接与生物信息学分析第37页
   ·系统发育树的构建第37-38页
  2 结果与分析第38-46页
   ·黄牛、牦牛bSYCP3基因PCR扩增结果第38-39页
   ·bSYCP3基因编码区的序列分析第39页
   ·bSYCP3染色体定位和基因组结构分析第39-40页
   ·bSYCP3基因编码蛋白的结构特征分析第40-43页
   ·bSYCP3蛋白Cor1基序的三级结构预测第43页
   ·哺乳动物SYCP3基因编码区分子进化分析第43-44页
   ·bSYCP3基因Cor1基序分子进化研究第44-45页
   ·系统发育分析第45-46页
  3 讨论第46-47页
  参考文献第47-50页
 第四章 黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织bSYCP3基因mRNA表达水平分析第50-58页
  1 材料与方法第50-52页
   ·实验动物第50页
   ·组织样中RNA的提取第50-51页
   ·总RNA中mRNA反转录第51页
   ·引物设计与合成第51页
   ·bSYCP3基因的组织表达谱第51-52页
   ·Real-time PCR第52页
  2 结果与分析第52-54页
   ·bSYCP3基因及β-actin基因普通PCR扩增结果第52-53页
   ·bSYCP3基因的组织表达谱分析第53页
   ·黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织bSYCP3基因表达水平第53-54页
  3 讨论第54-56页
  参考文献第56-58页
 第五章 牦牛和犏牛睾丸组织bSYCP3基因启动子区甲基化分析第58-72页
  1 材料与方法第58-63页
   ·实验动物第58页
   ·组织样中DNA的提取第58-59页
   ·引物设计第59页
   ·PCR扩增第59-60页
   ·PCR产物回收及测序第60页
   ·序列的生物信息学分析第60页
   ·基因组DNA的亚硫酸氢钠修饰第60-61页
   ·BSP扩增反应第61-62页
   ·将BSP扩增产物连接到T载体上(TA克隆)第62-63页
   ·序列的比对及甲基化程度分析第63页
  2 结果与分析第63-67页
   ·bSYCP3基因5’-UTR克隆与测序第63页
   ·bSYCP3基因启动子区及CpG岛预测第63-65页
   ·bSYCP3基因BSP扩增结果第65页
   ·牦牛与犏牛睾丸组织bSYCP3基因启动子区甲基化分析第65-67页
  3 讨论第67-68页
  参考文献第68-72页
全文结论第72-74页
全文创新第74-76页
附录第76-78页
致谢第78页

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