| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 引言 | 第13-16页 |
| 第1章 法庭科学中鉴定体液斑种类的应用研究概述 | 第16-23页 |
| 1.1 体液斑痕鉴定的常规方法 | 第16-17页 |
| 1.2 RNA鉴定体液来源 | 第17-18页 |
| 1.3 RNA提取 | 第18-19页 |
| 1.4 体液斑鉴定系统的缺陷 | 第19-20页 |
| 1.5 人类RNA标准品 | 第20-21页 |
| 1.6 荧光定量PCR | 第21-23页 |
| 第2章 人类RNA定量的方法学建立 | 第23-38页 |
| 2.1 材料和设备 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 引物设计及分析 | 第24-25页 |
| 2.2.2 人类特异性引物电泳检验 | 第25页 |
| 2.2.3 终点法PCR | 第25页 |
| 2.2.4 扩增产物电泳分析 | 第25页 |
| 2.2.5 切胶回收 | 第25-26页 |
| 2.2.6 Qubit测dsDNA浓度，保存DNA标准品 | 第26页 |
| 2.2.7 体外转录 | 第26页 |
| 2.2.8 RNA变性电泳 | 第26-27页 |
| 2.2.9 RNA纯化 | 第27页 |
| 2.2.10 DNA/RNA标准品梯度稀释及逆转录 | 第27-28页 |
| 2.2.11 制作COX1 qPCR标准曲线 | 第28页 |
| 2.3 结果分析 | 第28-35页 |
| 2.3.1 人类特异的COX1扩增子 | 第28-29页 |
| 2.3.2 DNA扩增及转录产物电泳图 | 第29-30页 |
| 2.3.3 标准品 | 第30-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-38页 |
| 2.4.1 控制影响因素 | 第35-36页 |
| 2.4.2 COX1标准品的选定 | 第36-37页 |
| 2.4.3 拷贝数换算 | 第37-38页 |
| 第3章 法医学体液斑鉴定的应用研究 | 第38-54页 |
| 3.1 材料和设备 | 第38-39页 |
| 3.1.1 仪器和试剂 | 第38-39页 |
| 3.1.2 样本来源及处理 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.1 酸性酚提取RNA | 第39-40页 |
| 3.2.2 RIBOgreen-RNA定量 | 第40页 |
| 3.2.3 cDNA合成 | 第40页 |
| 3.2.4 人类特异性体系的灵敏性检测 | 第40页 |
| 3.2.5 利用荧光定量qRT-PCR鉴定体液种类 | 第40-41页 |
| 3.3 结果分析 | 第41-51页 |
| 3.3.1 RNA提取产物电泳 | 第41-42页 |
| 3.3.2 三种样本中RNA提取量 | 第42页 |
| 3.3.3 血液样本 | 第42-45页 |
| 3.3.4 唾液样本 | 第45-48页 |
| 3.3.5 精液样本 | 第48-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-54页 |
| 3.4.1 定量体系性能分析 | 第51-52页 |
| 3.4.2 RNA提取质量判断 | 第52-53页 |
| 3.4.3 实验改进 | 第53页 |
| 3.4.4 实验室核酸污染控制 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
