| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-25页 |
| 1 果胶质的概念 | 第12页 |
| 2 果胶酶的概念 | 第12-13页 |
| 3 果胶酶的应用 | 第13-15页 |
| 3.1 果胶酶在果汁加工中的应用 | 第13页 |
| 3.2 果胶酶在果肉食品中的应用 | 第13页 |
| 3.3 果胶酶在茶叶发酵和咖啡加工中的应用 | 第13页 |
| 3.4 果胶酶在天然产物提取中的作用 | 第13-14页 |
| 3.5 果胶酶在纺织行业中的应用 | 第14页 |
| 3.6 果胶酶在造纸业中的应用 | 第14页 |
| 3.7 果胶酶在环境保护中的应用 | 第14页 |
| 3.8 果胶酶在生物研究中的应用 | 第14-15页 |
| 3.9 果胶酶在动物饲料中的应用 | 第15页 |
| 3.10 果胶酶在洗涤产品中的应用 | 第15页 |
| 4 微生物产果胶酶的研究 | 第15-16页 |
| 4.1 国外微生物产果胶酶的研究 | 第15页 |
| 4.2 国内微生物产果胶酶的研究 | 第15-16页 |
| 5 枯草芽孢杆菌及其表达系统 | 第16-18页 |
| 5.1 枯草芽孢杆菌 | 第16页 |
| 5.2 枯草芽孢杆菌表达系统 | 第16-17页 |
| 5.3 枯草芽孢杆菌系统的缺陷 | 第17-18页 |
| 6 生物过程优化 | 第18-20页 |
| 6.1 单因素水平优化法 | 第18页 |
| 6.2 响应面分析法 | 第18-20页 |
| 6.2.1 Plackett-Burman实验 | 第19页 |
| 6.2.2 最陡爬坡实验 | 第19页 |
| 6.2.3 Box-Behnken实验 | 第19-20页 |
| 7 酶的固定化研究 | 第20-23页 |
| 7.1 固定化意义 | 第20页 |
| 7.2 固定化的方法 | 第20-22页 |
| 7.2.1 吸附法 | 第21页 |
| 7.2.2 结合法 | 第21页 |
| 7.2.3 交联法 | 第21-22页 |
| 7.2.4 包埋法 | 第22页 |
| 7.3 固定化方法示意图 | 第22-23页 |
| 7.4 果胶酶的固定化 | 第23页 |
| 8 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 碱性果胶酶Pel-4A在枯草芽孢杆菌WB700中分泌表达 | 第25-34页 |
| 1 引言 | 第25页 |
| 2 材料 | 第25-27页 |
| 2.1 菌株和质粒 | 第25页 |
| 2.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.3 培养基 | 第26页 |
| 2.3.1 LB培养基 | 第26页 |
| 2.3.2 枯草芽孢杆菌基础表达培养基 | 第26页 |
| 2.4 转化枯草芽孢杆菌常用试剂 | 第26-27页 |
| 2.5 主要仪器 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-31页 |
| 3.1 穿梭质粒pAcc-pAUB110-Pel-4A的提取 | 第27-28页 |
| 3.2 穿梭质粒pAcc-pAUB110-Pel-4A的酶切反应 | 第28-29页 |
| 3.3 酶切后枯草芽孢杆菌表达质粒部分电泳回收 | 第29页 |
| 3.4 回收产物的连接反应 | 第29页 |
| 3.5 连接产物SP法转化枯草芽孢杆菌WB700 | 第29-30页 |
| 3.6 酶活力检测方法 | 第30页 |
| 3.7 果胶酶Pel-4A产酶检测时间的确定 | 第30-31页 |
| 4 结果 | 第31-33页 |
| 4.1 酶切结果 | 第31-32页 |
| 4.2 摇瓶检测酶活实验结果 | 第32-33页 |
| 5 讨论 | 第33-34页 |
| 第三章 响应面法优化碱性果胶酶Pel-4A产酶条件和发酵实验 | 第34-47页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料 | 第34-35页 |
| 2.1 菌种 | 第34页 |
| 2.2 主要试剂 | 第34页 |
| 2.3 主要仪器 | 第34-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.1 培养基的配置 | 第35页 |
| 3.1.1 发酵培养基 | 第35页 |
| 3.2 摇瓶培养的方法 | 第35页 |
| 3.3 发酵培养的方法 | 第35-36页 |
| 4 结果 | 第36-46页 |
| 4.1 单因素水平优化的结果 | 第36-39页 |
| 4.1.1 蛋白胨浓度对枯草芽孢杆菌WB700/ pAUB110-Pel-4A产酶活性的影响 | 第36页 |
| 4.1.2 可溶性淀粉浓度对枯草芽孢杆菌WB700/ pAUBllO-PeMA产酶活性的影响 | 第36-37页 |
| 4.1.3 酵母粉浓度对枯草芽孢杆菌\VB700/ pAUB110-Pel-4A产酶活性的影响 | 第37页 |
| 4.1.4 磷酸盐浓度对枯草芽孢杆菌WB700/ pAUBllO-Pe丨-4A产酶活性的影响 | 第37-38页 |
| 4.1.5 硫酸镁浓度对枯草芽孢杆菌WB700/ pAUB110-Pel-4A产酶活性的影响 | 第38页 |
| 4.1.6 氯化韩浓度对枯草芽孢杆菌WB700/ pAUB110-Pel-4A产酵活性的影响 | 第38-39页 |
| 4.2 Plackett-Burman实验结果 | 第39-41页 |
| 4.3 最陡爬坡实验结果 | 第41页 |
| 4.4 Box-Behnken实验结果 | 第41-45页 |
| 4.5 发酵培养优化结果 | 第45-46页 |
| 5 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 碱性果胶酶Pel-4A酶学性质的研究 | 第47-52页 |
| 1 引言 | 第47页 |
| 2 材料 | 第47-48页 |
| 2.1 菌种 | 第47页 |
| 2.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 2.3 主要仪器 | 第48页 |
| 3 实验方法 | 第48-49页 |
| 3.1 Pel-4A最适温度的研究 | 第48页 |
| 3.2 Pel-4A温度稳定性的研究 | 第48页 |
| 3.3 Pel-4A最适pH的研究 | 第48页 |
| 3.4 Pel-4A的pH稳定性的研究 | 第48-49页 |
| 4 结果 | 第49-51页 |
| 4.1 Pel-4A最适温度曲线 | 第49页 |
| 4.2 Pel-4A温度稳定性曲线 | 第49-50页 |
| 4.3 Pel-4A最适DH曲线 | 第50页 |
| 4.4 Pel-4A pH稳定性曲线 | 第50-51页 |
| 5 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 碱性果胶酶Pel-4A的固定化初步研究 | 第52-59页 |
| 1 引言 | 第52页 |
| 2 材料 | 第52-53页 |
| 2.1 主要试剂 | 第52页 |
| 2.2 主要仪器 | 第52-53页 |
| 3 实验方法 | 第53-54页 |
| 3.1 固定化步骤 | 第53-54页 |
| 4 结果 | 第54-58页 |
| 4.1 时间对酶的固定化影响 | 第54-55页 |
| 4.1.1 不同固定化时间点对固定化酶上清液的酶活力的影响 | 第54页 |
| 4.1.2 不同固定化时间点对固定化酶上清蛋白的影响 | 第54-55页 |
| 4.1.3 不同固定化时间点对固定化酶活力的影响 | 第55页 |
| 4.2 pH对酶固定化的影响 | 第55-56页 |
| 4.3 酶液浓度对固定化的影响 | 第56页 |
| 4.4 固定化酶使用次数的检测 | 第56-57页 |
| 4.5 固定化酶与游离酶最适温度的比较 | 第57页 |
| 4.6 固定化酶与游离酶最适pH的比较 | 第57-58页 |
| 5 讨论 | 第58-59页 |
| 第六章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读学位论文期间研究成果 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
