| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 插图和附表清单 | 第10-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 研究背景及目的意义 | 第12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-18页 |
| 1.2.1 布鲁氏菌病概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 布鲁氏菌的生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.2.3 布鲁氏菌的致病性 | 第14页 |
| 1.2.4 布鲁氏菌病流行病学 | 第14页 |
| 1.2.5 布鲁氏菌的危害 | 第14-15页 |
| 1.2.6 布鲁氏菌病诊断 | 第15-17页 |
| 1.2.6.1 临床症状 | 第15页 |
| 1.2.6.2 实验室诊断 | 第15-17页 |
| 1.2.7 布鲁氏菌病的防制 | 第17-18页 |
| 1.3 布鲁氏菌 BP26 蛋白的研究进展 | 第18-19页 |
| 第二章 羊种布鲁氏菌的分离与鉴定 | 第19-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-24页 |
| 2.1.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1.1 被检血清和病料 | 第19页 |
| 2.1.1.2 菌株 | 第19页 |
| 2.1.1.3 试剂 | 第19页 |
| 2.1.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.2 方法 | 第20-24页 |
| 2.1.2.1 血清学检测方法 | 第20页 |
| 2.1.2.1.1 虎红平板凝集试验（RBPT） | 第20页 |
| 2.1.2.1.2 试管凝集试验（SAT） | 第20页 |
| 2.1.2.1.3 间接酶联免疫吸附试验（i-ELISA） | 第20页 |
| 2.1.2.1.4 竞争酶联免疫吸附试验（c-ELISA） | 第20页 |
| 2.1.2.2 布鲁氏菌分离培养 | 第20-24页 |
| 2.1.2.2.1 肝浸液琼脂培养基制备 | 第20页 |
| 2.1.2.2.2 选择性培养基的制备 | 第20-21页 |
| 2.1.2.2.3 布鲁氏菌的分离纯化 | 第21页 |
| 2.1.2.2.4 种型鉴定 | 第21-24页 |
| 2.2 结果分析 | 第24-32页 |
| 2.2.1 血清学检测结果 | 第24页 |
| 2.2.2 分离培养结果 | 第24-25页 |
| 2.2.3 分离菌种型鉴定结果 | 第25-26页 |
| 2.2.3.1 形态及染色特点的观察结果 | 第25页 |
| 2.2.3.2 生化鉴定及单相特异性血清 A、M 和 R 凝集试验结果 | 第25-26页 |
| 2.2.3.3 噬菌体裂解试验结果 | 第26页 |
| 2.2.4 PCR 鉴定结果 | 第26-32页 |
| 2.2.4.1 基因组 DNA 提取结果 | 第26页 |
| 2.2.4.2 16srDNA 扩增测序和系统进化分析结果 | 第26-29页 |
| 2.2.4.3 OMP10 基因扩增测序和系统进化分析结果 | 第29-32页 |
| 2.3 讨论 | 第32-34页 |
| 2.3.1 羊布鲁氏菌病流行病学调查 | 第32-33页 |
| 2.3.2 羊布鲁氏菌分离鉴定 | 第33-34页 |
| 第三章 羊种布鲁氏菌分离株的 BP26 基因分析 | 第34-42页 |
| 3.1 材料与方法 | 第34-37页 |
| 3.1.1 材料 | 第34页 |
| 3.1.1.1 菌株 | 第34页 |
| 3.1.1.2 试剂 | 第34页 |
| 3.1.1.3 主要仪器 | 第34页 |
| 3.1.2 方法 | 第34-37页 |
| 3.1.2.1 引物的设计和合成 | 第34-35页 |
| 3.1.2.2 菌株的培养与 DNA 模板的制备 | 第35页 |
| 3.1.2.3 布鲁氏菌 bp26 基因的 PCR 扩增 | 第35页 |
| 3.1.2.4 PCR 产物的回收与纯化 | 第35页 |
| 3.1.2.5 目的片段的连接 | 第35-36页 |
| 3.1.2.6 感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第36页 |
| 3.1.2.7 连接产物转化 | 第36页 |
| 3.1.2.8 蓝白斑筛选 | 第36页 |
| 3.1.2.9 质粒 DNA 的小量提取 | 第36-37页 |
| 3.1.2.10 重组质粒的 PCR 鉴定 | 第37页 |
| 3.1.2.11 重组质粒 DNA 序列的测定 | 第37页 |
| 3.2 结果分析 | 第37-41页 |
| 3.2.1 bp26 基因 PCR 鉴定 | 第37页 |
| 3.2.2 PCR 产物的克隆及重组质粒的筛选和鉴定 | 第37-38页 |
| 3.2.3 重组质粒的序列测定 | 第38页 |
| 3.2.4 bp26 基因的序列分析 | 第38-41页 |
| 3.2.4.1 同源性分析 | 第38-40页 |
| 3.2.4.2 氨基酸序列比对 | 第40-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录 | 第47-59页 |
| 附录1 分离株 B1、B2、B3、B4 和疫苗株 S2、A19、M516S RDNA 核苷酸序列 | 第47-53页 |
| 附录2 分离株 B1、B2、B3、B4 和疫苗株 S2、A19、M5 OMP10 基因核苷酸序列 | 第53-55页 |
| 附录3 分离株 B1、B2、B3、B4 和疫苗株 S2、A19、M5 BP26 基因核苷酸序列 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简历 | 第60页 |
