| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 植物抗病信号传导途径与防卫反应相关基因表达的转录调控 | 第17-55页 |
| 1.1 植物的抗病性 | 第18-20页 |
| 1.1.1 植物抗病基因和病原菌无毒基因对(R-Avr)互作介导的抗病性 | 第18-19页 |
| 1.1.2 植物的诱导抗病性 | 第19-20页 |
| 1.2 植物抗病反应中的信号传导途径 | 第20-24页 |
| 1.2.1 由R基因介导的信号传导途径 | 第20-22页 |
| 1.2.2 诱导抗病性中的信号传导途径 | 第22-24页 |
| 1.2.2.1 依赖于水杨酸(SA)的信号途径 | 第22-23页 |
| 1.2.2.2 NPR1是SAR信号传导途径中的关键组分 | 第23-24页 |
| 1.3 植物转录因子 | 第24-38页 |
| 1.3.1 转录因子的结构与功能 | 第25-27页 |
| 1.3.1.1 DNA结合区 | 第25页 |
| 1.3.1.2 转录调控区 | 第25-26页 |
| 1.3.1.3 核定位信号区 | 第26-27页 |
| 1.3.1.4 寡聚化位点 | 第27页 |
| 1.3.2 植物转录因子的种类 | 第27-35页 |
| 1.3.2.1 bHLH(basic helix-loop-helix) | 第27-28页 |
| 1.3.2.2 bZIP(碱性亮氨酸拉链) | 第28-29页 |
| 1.3.2.3 homeodomain蛋白 | 第29-30页 |
| 1.3.2.4 MADS-box蛋白 | 第30-31页 |
| 1.3.2.5 锌指(zinc-finger)蛋白 | 第31-32页 |
| 1.3.2.6 Myb蛋白 | 第32页 |
| 1.3.2.7 Ap2／EREBP蛋白 | 第32-33页 |
| 1.3.2.8 HMG蛋白 | 第33-34页 |
| 1.3.2.9 HSF蛋白 | 第34页 |
| 1.3.2.10 AT hook蛋白 | 第34-35页 |
| 1.3.3 植物转录因子功能的分析方法 | 第35-38页 |
| 1.4 植物防卫反应基因表达的转录调控 | 第38-49页 |
| 1.4.1 与植物抗病反应有关的转录因子 | 第38-43页 |
| 1.4.1.1 bZIP家族 | 第39页 |
| 1.4.1.2 ERF型转录因子 | 第39-41页 |
| 1.4.1.3 WRKY家族 | 第41-42页 |
| 1.4.1.4 MYB类因子 | 第42页 |
| 1.4.1.5 homeodomain蛋白 | 第42-43页 |
| 1.4.2 顺式作用元件 | 第43-47页 |
| 1.4.2.1 GCC盒 | 第43-44页 |
| 1.4.2.2 as-1(activator sequence-1) | 第44-45页 |
| 1.4.2.3 W盒 | 第45页 |
| 1.4.2.4 MYB识别元件(MYB recognition elements，MREs) | 第45-46页 |
| 1.4.2.5 G盒 | 第46页 |
| 1.4.2.6 E盒和N盒 | 第46页 |
| 1.4.2.7 其它类型的顺式作用元件 | 第46-47页 |
| 1.4.3 植物转录因子的活性调节 | 第47-49页 |
| 1.5 植物转录因子的应用 | 第49-52页 |
| 1.5.1 植物锌指技术的应用 | 第49-50页 |
| 1.5.2 植物转录因子在植物代谢工程中的应用 | 第50-51页 |
| 1.5.3 植物转录因子在植物抗逆性方面的利用 | 第51-52页 |
| 1.6 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第52-55页 |
| 1.6.1 选题依据及研究的目的和意义 | 第52页 |
| 1.6.2 主要研究内容 | 第52-53页 |
| 1.6.3 研究的技术路线: | 第53-55页 |
| 第二章 水稻抗病反应相关的BELL型转录因子OSBIHD1的克隆鉴定 | 第55-86页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 前言 | 第57-59页 |
| 2.1 材料与方法 | 第59-67页 |
| 2.1.1 水稻幼苗的培育与处理 | 第59页 |
| 2.1.2 OsBIHD1 cDNA基因的克隆 | 第59-60页 |
| 2.1.3 DNA的序列测定和分析 | 第60-61页 |
| 2.1.4 OsBIHD1融合蛋白的原核表达及体外DNA结合活性分析 | 第61-64页 |
| 2.1.4.1 原核表达载体pET-30a-OsBIHD1的构建 | 第61页 |
| 2.1.4.2 OsBIHD1蛋白的诱导表达及制备 | 第61-62页 |
| 2.1.4.3 OsBIHD1蛋白的纯化及复性 | 第62-63页 |
| 2.1.4.4 OsBIHD1蛋白的EMSA分析 | 第63-64页 |
| 2.1.5 pSGFP-OsBIHD1蛋白的核定位分析 | 第64-65页 |
| 2.1.5.1 pSGFP-OsBIHD1重组质粒的构建 | 第64页 |
| 2.1.5.2 金粉悬浮液制备及金粉pSGFP-OsBIHD1的包埋 | 第64-65页 |
| 2.1.5.3 基因枪轰击 | 第65页 |
| 2.1.6 水稻基因组的Southern分析 | 第65-66页 |
| 2.1.6.1 水稻基因组DNA的提取 | 第65页 |
| 2.1.6.2 Southern杂交 | 第65-66页 |
| 2.1.7 Northern分析 | 第66-67页 |
| 2.1.7.1 水稻总RNA的提取 | 第66页 |
| 2.1.7.2 Northern杂交 | 第66-67页 |
| 2.2 结果与分析 | 第67-70页 |
| 2.2.1 OsBIHD1基因编码水稻的一个homeodomain蛋白 | 第67-68页 |
| 2.2.2 OsBIHD1是一种BELL型的homeodomain蛋白 | 第68页 |
| 2.2.3 OsBIHD1在水稻基因组中的结构分析 | 第68-69页 |
| 2.2.4 OsBIHD1蛋白的DNA结合活性 | 第69页 |
| 2.2.5 OsBIHD1蛋白位于植物细胞核 | 第69-70页 |
| 2.2.6 OsBIHD1基因在水稻抗病反应中的差异表达 | 第70页 |
| 2.3 讨论 | 第70-86页 |
| 第三章 OSBIHD1过量表达转基因烟草植株的生物学特性 | 第86-116页 |
| 摘要 | 第87-90页 |
| 3.1 供试材料 | 第90页 |
| 3.1.1 转化的受体植物 | 第90页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第90页 |
| 3.1.3 培养基与抗生素 | 第90页 |
| 3.2 试验方法 | 第90-96页 |
| 3.2.1 植物转化双元表达载体CHF3-OsBIHD1的构建 | 第91页 |
| 3.2.2 烟草叶盘转化与卡那抗性植株的再生 | 第91-92页 |
| 3.2.3 转基因烟草的分子鉴定 | 第92-94页 |
| 3.2.3.1 PCR检测 | 第92-93页 |
| 3.2.3.2 Southern印迹杂交 | 第93页 |
| 3.2.3.3 Northern印迹杂交 | 第93页 |
| 3.2.3.4 转基因烟草植株PR-1基因的表达分析 | 第93-94页 |
| 3.2.4 转OsBIHD1基因烟草T1代抗病性测定 | 第94-95页 |
| 3.2.4.1 番茄花叶病毒(ToMV)和烟草花叶病毒(TMV)的接种处理 | 第94页 |
| 3.2.4.2 烟草黑胫病菌的接种 | 第94-95页 |
| 3.2.5 转OsBIHD1基因烟草T1代抗盐性生物测定 | 第95页 |
| 3.2.6 转OsBIHD1基因烟草T1代抗氧化胁迫测定 | 第95-96页 |
| 3.3 结果与分析 | 第96-100页 |
| 3.3.1 OsBIHD1基因植物双元表达载体CHF_3-OsBIHD1的鉴定 | 第96页 |
| 3.3.2 转OsBIHD1基因的烟草植株的获得 | 第96页 |
| 3.3.3 转OsBIHD1基因烟草植株的异常表型 | 第96-97页 |
| 3.3.4 转OsBIHD1基因烟草植株的分子鉴定 | 第97-98页 |
| 3.3.4.1 PCR检测 | 第97页 |
| 3.3.4.2 转OsBIHD1基因烟草植株的拷贝数分析 | 第97页 |
| 3.3.4.3 OsBIHD1基因在烟草植株中的转录 | 第97页 |
| 3.3.4.4 过量表达OsBIHD1基因的转烟草植株中PR-1基因组成型表达 | 第97-98页 |
| 3.3.5 T1代转OsBIHD1基因烟草植株的抗逆性分析结果 | 第98-100页 |
| 3.3.5.1 转基因烟草株对番茄花叶病毒(ToMV)病的抗性 | 第98-99页 |
| 3.3.5.2 转基因烟草株对烟草花叶病毒(TMV)病的抗性 | 第99页 |
| 3.3.5.3 转基因烟草株对烟草黑胫病的抗性 | 第99页 |
| 3.3.5.4 T1代转OsBIHD1基因烟草植株的抗盐性下降 | 第99-100页 |
| 3.3.5.5 T1代转OsBIHD1基因烟草植株的抗氧化胁迫结果 | 第100页 |
| 3.4 讨论 | 第100-116页 |
| 参考文献 | 第116-132页 |
| 讨论及今后研究 | 第132-136页 |
