摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1 环境和生物的相互作用 | 第12-13页 |
1.1 生物与环境 | 第12页 |
1.2 干露胁迫 | 第12-13页 |
2 脊尾白虾的养殖现状 | 第13-15页 |
2.1 脊尾白虾生物学特征 | 第13-14页 |
2.2 脊尾白虾养殖地位 | 第14页 |
2.3 养殖中面临的问题 | 第14-15页 |
3 水生动物对干露胁迫的应激响应 | 第15-18页 |
3.1 干露胁迫对水生动物生理水平的影响 | 第15页 |
3.2 干露胁迫对水生动物分子水平的影响 | 第15-16页 |
3.3 干露胁迫对水生动物体内氧气利用的影响 | 第16-17页 |
3.4 干露胁迫对水生动物抗氧化能力及免疫力的影响 | 第17-18页 |
4 目的意义 | 第18-19页 |
第二章 干露胁迫对脊尾白虾呼吸代谢相关酶的影响 | 第19-30页 |
1 材料和方法 | 第19-21页 |
1.1 实验动物 | 第19页 |
1.2 实验设计 | 第19-20页 |
1.3 样品处理 | 第20页 |
1.4 CCO、FRD、LDH、SDH和乳酸活力的测定 | 第20-21页 |
1.5 数据分析 | 第21页 |
2 结果 | 第21-27页 |
2.1 实验组及对照组脊尾白虾的存活率 | 第21页 |
2.2 干露胁迫对SDH活力的影响 | 第21-22页 |
2.3 干露胁迫对CCO活力的影响 | 第22-23页 |
2.4 干露胁迫对FRD活力的影响 | 第23-24页 |
2.5 干露胁迫对LDH活力的影响 | 第24-25页 |
2.6 脊尾白虾各组织SDH/FRD变化 | 第25-27页 |
2.7 干露胁迫对乳酸含量的影响 | 第27页 |
3 讨论 | 第27-30页 |
第三章 HIF-1 基因的克隆及干露胁迫下的表达分析 | 第30-53页 |
1 实验材料与方法 | 第31-39页 |
1.1 实验材料 | 第31-32页 |
1.1.1 实验动物 | 第31页 |
1.1.2 实验仪器 | 第31页 |
1.1.3 实验试剂 | 第31页 |
1.1.4 常用试剂的配制 | 第31-32页 |
1.2 实验方法 | 第32-39页 |
1.2.1 样品处理 | 第32页 |
1.2.2 总RNA提取 | 第32-33页 |
1.2.3 cDNA及RACE-Ready-c DNA合成 | 第33页 |
1.2.4 HIF-1α 和HIF-1β 基因cDNA的克隆 | 第33-37页 |
1.2.5 HIF-1α 和HIF-1β 基因的 5′ RACE和 3′ RACE的序列扩增 | 第37-38页 |
1.2.6 干露胁迫下HIF-1α 和HIF-1β 基因表达分析 | 第38-39页 |
1.2.7 生物学分析及进化树构建 | 第39页 |
2 实验结果与分析 | 第39-51页 |
2.1 HIF-1α 和HIF-1β 基因cDNA克隆 | 第39-42页 |
2.2 HIF-1α 和HIF-1β 氨基酸序列同源性分析 | 第42-45页 |
2.3 HIF-1α 系统进化树分析 | 第45-46页 |
2.4 干露胁迫下脊尾白虾各组织HIF-1α 的相对表量 | 第46-48页 |
2.4.1 干露胁迫下脊尾白虾鳃HIF-1α 的表达情况 | 第46页 |
2.4.2 干露胁迫下脊尾白虾肝胰腺HIF-1α 的表达情况 | 第46-47页 |
2.4.3 干露胁迫下脊尾白虾肌肉HIF-1α 的表达情况 | 第47-48页 |
2.5 干露胁迫下脊尾白虾各组织HIF-1β 的相对表量 | 第48-51页 |
2.5.1 干露胁迫下脊尾白虾鳃HIF-1β 的表达情况 | 第48-49页 |
2.5.2 干露胁迫下脊尾白虾肝胰腺HIF-1β 的表达情况 | 第49-50页 |
2.5.3 干露胁迫下脊尾白虾肌肉HIF-1β 的表达情况 | 第50-51页 |
3 讨论 | 第51-53页 |
第四章 RNA干扰对干露胁迫下脊尾白虾HIF-1 基因的影响 | 第53-62页 |
1 材料和方法 | 第53-56页 |
1.1 实验动物 | 第53-54页 |
1.2 仪器和试剂 | 第54页 |
1.3 体外制备dsRNA | 第54-55页 |
1.4 注射dsRNA及采集样品 | 第55页 |
1.5 RNA的提取及荧光定量PCR检测 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-60页 |
2.1 注射PBS对HIF-1 基因表达产生的影响 | 第56-57页 |
2.2 不同dsRNA产生的干扰效应 | 第57-58页 |
2.3 干露胁迫下实验组和对照组脊尾白虾的存活率 | 第58页 |
2.4 RNA干扰后HIF-1 基因在干露胁迫下的表达情况 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
硕士期间文章发表情况 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |