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一种南极鱼Ⅲ型抗冻蛋白抵抗低温分子机制的初步研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
引言第9-13页
第一章 绪论第13-25页
    1.1 抗冻蛋白的结构及起源研究进展第13-14页
    1.2 抗冻蛋白的结构特征第14-21页
        1.2.1 抗冻糖蛋白第16-17页
        1.2.2 I型抗冻蛋白(AFPⅠ)第17-18页
        1.2.3 Ⅱ型抗冻蛋白(AFP Ⅱ)第18-19页
        1.2.4 Ⅲ型抗冻蛋白(AFP Ⅲ)第19-20页
        1.2.5 IV型抗冻蛋白(AFP IV)第20-21页
    1.3 抗冻蛋白的适应性调节第21页
    1.4 抗冻蛋白的应用第21-22页
    1.5 AFPⅢ抗冻蛋白的起源第22-23页
    1.6 抵御低温的信号通路第23-25页
第二章 一种南极鱼Ⅲ型抗冻蛋白抵抗低温分子机制的初步研究第25-48页
    2.1 材料与方法第25-27页
        2.1.1 材料第25页
        2.1.2 试剂及试剂盒第25-26页
        2.1.3 仪器第26-27页
    2.2 方法第27-41页
        2.2.1 Tol2-actin-MCS-2A-EGFP载体的示意图第27-28页
        2.2.2 构建载体中的引物设计第28页
        2.2.3 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)克隆目的基因第28-29页
        2.2.4 质粒的提取第29-30页
        2.2.5 质粒序列鉴定第30页
        2.2.6 ZF4斑马鱼成纤维细胞系培养第30页
        2.2.7 ZF4细胞系转染及稳定细胞系的获得第30-31页
        2.2.8 利用LD4抗体检测LD4在细胞中的表达第31-32页
        2.2.9 台盼蓝测细胞存活率第32页
        2.2.10 低温处理后RNA sequence分析第32-37页
        2.2.11 流式细胞仪进行凋亡检测第37页
        2.2.12 LD4蛋白在细胞中的定位第37-39页
        2.2.13 qPCR检测转LD4斑马鱼细胞系中转录因子表达差异第39-41页
    2.3 结果分析第41-46页
        2.3.1 真核表达质粒的构建及鉴定第41-42页
        2.3.2 表达载体转染斑马鱼细胞及蛋白表达第42-43页
        2.3.3 台盼蓝测定低温处理后存活率的结果第43页
        2.3.4 转录组测序结果分析及实时定量PCR鉴定第43-45页
        2.3.5 用流式检测凋亡的分析结果第45-46页
    2.4 讨论第46-47页
    2.5 结论第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53-54页

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