摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
引言 | 第9-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
1.1 抗冻蛋白的结构及起源研究进展 | 第13-14页 |
1.2 抗冻蛋白的结构特征 | 第14-21页 |
1.2.1 抗冻糖蛋白 | 第16-17页 |
1.2.2 I型抗冻蛋白(AFPⅠ) | 第17-18页 |
1.2.3 Ⅱ型抗冻蛋白(AFP Ⅱ) | 第18-19页 |
1.2.4 Ⅲ型抗冻蛋白(AFP Ⅲ) | 第19-20页 |
1.2.5 IV型抗冻蛋白(AFP IV) | 第20-21页 |
1.3 抗冻蛋白的适应性调节 | 第21页 |
1.4 抗冻蛋白的应用 | 第21-22页 |
1.5 AFPⅢ抗冻蛋白的起源 | 第22-23页 |
1.6 抵御低温的信号通路 | 第23-25页 |
第二章 一种南极鱼Ⅲ型抗冻蛋白抵抗低温分子机制的初步研究 | 第25-48页 |
2.1 材料与方法 | 第25-27页 |
2.1.1 材料 | 第25页 |
2.1.2 试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
2.1.3 仪器 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-41页 |
2.2.1 Tol2-actin-MCS-2A-EGFP载体的示意图 | 第27-28页 |
2.2.2 构建载体中的引物设计 | 第28页 |
2.2.3 聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)克隆目的基因 | 第28-29页 |
2.2.4 质粒的提取 | 第29-30页 |
2.2.5 质粒序列鉴定 | 第30页 |
2.2.6 ZF4斑马鱼成纤维细胞系培养 | 第30页 |
2.2.7 ZF4细胞系转染及稳定细胞系的获得 | 第30-31页 |
2.2.8 利用LD4抗体检测LD4在细胞中的表达 | 第31-32页 |
2.2.9 台盼蓝测细胞存活率 | 第32页 |
2.2.10 低温处理后RNA sequence分析 | 第32-37页 |
2.2.11 流式细胞仪进行凋亡检测 | 第37页 |
2.2.12 LD4蛋白在细胞中的定位 | 第37-39页 |
2.2.13 qPCR检测转LD4斑马鱼细胞系中转录因子表达差异 | 第39-41页 |
2.3 结果分析 | 第41-46页 |
2.3.1 真核表达质粒的构建及鉴定 | 第41-42页 |
2.3.2 表达载体转染斑马鱼细胞及蛋白表达 | 第42-43页 |
2.3.3 台盼蓝测定低温处理后存活率的结果 | 第43页 |
2.3.4 转录组测序结果分析及实时定量PCR鉴定 | 第43-45页 |
2.3.5 用流式检测凋亡的分析结果 | 第45-46页 |
2.4 讨论 | 第46-47页 |
2.5 结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |