| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-17页 |
| 1.1 不同类型产气荚膜梭菌研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 A型产气荚膜梭菌 | 第10-11页 |
| 1.1.2 B、C、D型产气荚膜梭菌 | 第11页 |
| 1.1.3 E型产气荚膜梭菌 | 第11页 |
| 1.2 鸡坏死性肠炎概述 | 第11-14页 |
| 1.2.1 α 毒素与坏死性肠炎 | 第12页 |
| 1.2.2 NetB毒素与坏死性肠炎 | 第12页 |
| 1.2.3 鸡坏死性肠炎流行病学 | 第12-13页 |
| 1.2.4 鸡坏死性肠炎发病诱因 | 第13页 |
| 1.2.5 鸡坏死性肠炎临床症状和病理变化 | 第13-14页 |
| 1.2.6 鸡坏死性肠炎的防治 | 第14页 |
| 1.3 产气荚膜梭菌的诊断技术 | 第14-16页 |
| 1.3.1 病原学诊断方法 | 第14页 |
| 1.3.2 分子生物学诊断方法 | 第14-15页 |
| 1.3.3 血清学诊断方法 | 第15-16页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 试验动物和细胞 | 第17页 |
| 2.1.2 菌株、质粒及血清 | 第17页 |
| 2.1.3 主要分子生物学试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第17-20页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 抗原制备 | 第20-23页 |
| 2.2.2 多克隆抗体制备和生物活性鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.3 单克隆抗体腹水制备和生物学活性鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 阻断ELISA方法的建立 | 第25-27页 |
| 2.2.5 阻断ELISA方法的特异性试验 | 第27-28页 |
| 2.2.6 阻断ELISA方法的灵敏度试验 | 第28页 |
| 2.2.7 阻断ELISA方法的重复性试验 | 第28页 |
| 2.2.8 重组NetB蛋白免疫鸡血清抗体效价动态变化检测 | 第28页 |
| 2.2.9 阻断ELISA方法对临床样品的检测 | 第28-29页 |
| 2.2.10 数据统计 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-44页 |
| 3.1 重组NetB蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| 3.2 多克隆抗体的制备及鉴定 | 第31-32页 |
| 3.2.1 NetB多克隆抗血清的效价测定 | 第31-32页 |
| 3.2.2 多克隆抗体的Western blot检测 | 第32页 |
| 3.3 单克隆抗体腹水的制备和生物学活性鉴定 | 第32-34页 |
| 3.3.1 腹水的纯化 | 第32页 |
| 3.3.2 单克隆抗体浓度和效价的测定 | 第32-34页 |
| 3.4 阻断ELISA方法的建立与应用 | 第34-44页 |
| 3.4.1 阻断ELISA方法的优化 | 第34-40页 |
| 3.4.2 阻断ELISA方法的临界值的确定 | 第40页 |
| 3.4.3 阻断ELISA方法的灵敏性的试验 | 第40页 |
| 3.4.4 阻断ELISA方法的特异性试验 | 第40-41页 |
| 3.4.5 阻断ELISA方法的重复性试验 | 第41页 |
| 3.4.6 重组NetB蛋白免疫鸡血清抗体效价动态变化检测 | 第41-42页 |
| 3.4.7 阻断ELISA方法对临床样品的检测 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 4.1 腹水的制备与纯化 | 第44页 |
| 4.2 阻断ELISA方法的建立 | 第44页 |
| 4.3 阻断ELISA方法条件的优化 | 第44-45页 |
| 4.4 阻断ELISA方法特异性试验 | 第45页 |
| 4.5 阻断ELISA方法的应用 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
