| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-26页 |
| 1.1 脊椎动物的性别决定机制 | 第12-14页 |
| 1.1.1 遗传性别决定机制 | 第12-13页 |
| 1.1.2 环境性别决定机制 | 第13页 |
| 1.1.3 基因-温度性别决定 | 第13-14页 |
| 1.2 环境因素对鱼类性别决定与分化的影响 | 第14-15页 |
| 1.3 鱼类性别逆转研究现状 | 第15-17页 |
| 1.3.1 诱导雄鱼性逆转研究现状 | 第16页 |
| 1.3.2 诱导雌鱼性逆转研究现状 | 第16-17页 |
| 1.4 尼罗罗非鱼简述 | 第17-18页 |
| 1.4.1 尼罗罗非鱼性腺分化 | 第18页 |
| 1.5 尼罗罗非鱼的性别决定机制 | 第18-19页 |
| 1.6 尼罗罗非鱼性别分化基因 | 第19-23页 |
| 1.6.1 参与尼罗罗非鱼卵巢分化的基因 | 第20-23页 |
| 1.6.2 尼罗罗非鱼精巢分化基因 | 第23页 |
| 1.7 鱼类性腺转录组学研究进展 | 第23-24页 |
| 1.8 本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 尼罗罗非鱼全雌家系的建立 | 第26页 |
| 2.1.2 样品的采集和性别鉴定 | 第26-27页 |
| 2.1.3 实验仪器与试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.4 主要试剂及来源 | 第28页 |
| 2.1.5 所用试剂的配制 | 第28-29页 |
| 2.1.6 主要数据库及软件 | 第29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-43页 |
| 2.2.1 尼罗罗非鱼性腺总RNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 RNA检测及定量 | 第30页 |
| 2.2.3 cDNA文库的构建及库检 | 第30-31页 |
| 2.2.4 文库质控 | 第31页 |
| 2.2.5 Illumina Hiseq测序 | 第31页 |
| 2.2.6 RNA-Seq生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 2.2.7 高温处理雌性尼罗罗非鱼性逆转为雄性候选功能基因的表达分析 | 第33-36页 |
| 2.2.8 多克隆抗体的制备 | 第36-38页 |
| 2.2.9 Western blot检测 | 第38-41页 |
| 2.2.10 尼罗罗非鱼性腺石蜡切片的制备 | 第41-42页 |
| 2.2.11 性腺组织学检测 | 第42-43页 |
| 3 结果与分析 | 第43-62页 |
| 3.1 高温处理尼罗罗非鱼雄性率统计 | 第43页 |
| 3.2 高温处理后XX雌鱼性腺转化为精巢 | 第43-44页 |
| 3.3 高温处理尼罗罗非鱼性腺转录组数据统计结果 | 第44-45页 |
| 3.4 高温处理尼罗罗非鱼性腺转录组差异表达基因 | 第45-48页 |
| 3.5 高温处理尼罗罗非鱼差异表达基因注释 | 第48-54页 |
| 3.5.1 GO功能注释 | 第48-51页 |
| 3.5.2 COG功能注释 | 第51-52页 |
| 3.5.3 KEGG代谢通路分类 | 第52-54页 |
| 3.6 高温处理后类固醇合成酶基因及核受体基因的表达模式 | 第54-56页 |
| 3.6.1 高温处理影响IM中类固醇合成酶基因及核受体基因表达 | 第55页 |
| 3.6.2 高温处理影响IM核受体基因表达 | 第55-56页 |
| 3.7 性别分化相关基因验证 | 第56-58页 |
| 3.8 Cyp19a1a多克隆抗体制备 | 第58-61页 |
| 3.8.1 Cyp19a1a重组蛋白原核表达及其纯化 | 第58-60页 |
| 3.8.2 昆明白小鼠免疫及抗体效价检测 | 第60-61页 |
| 3.9 高温处理对尼罗罗非鱼性腺cyp19a1a蛋白表达的影响 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-67页 |
| 4.1 高温处理尼罗罗非鱼性腺产生差异转录组图谱 | 第62-63页 |
| 4.2 高温处理后部分遗传雌鱼性逆转为雄鱼 | 第63-64页 |
| 4.3 不同家系的伪雄鱼后代对高温处理敏感性不同 | 第64页 |
| 4.4 高温处理对尼罗罗非鱼性腺基因的持续性影响 | 第64-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第80页 |
