| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-13页 |
| 1.1 美国白蛾简介 | 第8页 |
| 1.2 氨肽酶N研究进展 | 第8-10页 |
| 1.3 苏云金杆菌简介 | 第10页 |
| 1.4 Bt Cry蛋白的作用机制 | 第10-11页 |
| 1.5 氨肽酶N多肽对Cry蛋白增效作用研究进展 | 第11-12页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第12-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-25页 |
| 2.1 材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 供试昆虫及细胞 | 第13页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第13页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第13页 |
| 2.1.4 主要培养基及试剂 | 第13-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-25页 |
| 2.2.1 hcapn3 全长基因的获得 | 第15-17页 |
| 2.2.2 序列分析 | 第17页 |
| 2.2.3 HcAPN3 在昆虫细胞系中的表达 | 第17-20页 |
| 2.2.4 HcAPN3 结构域的克隆与表达 | 第20-21页 |
| 2.2.5 HcAPN3 特异性抗体的制备 | 第21页 |
| 2.2.6 HcAPN3 美国白蛾不同组织和结构中的免疫定位 | 第21页 |
| 2.2.7 Bt Cry1Ac及Cry9Ea6 蛋白的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.8 美国白蛾中肠BBMV蛋白的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.9 BBMV蛋白与Cry9Ea6 的结合分析 | 第23页 |
| 2.2.10 HcAPN3 及结构域重组蛋白与Cry9Ea6 蛋白的结合分析 | 第23页 |
| 2.2.11 HcAPN3 结构域重组蛋白对Cry9Ea6 毒蛋白的增效作用 | 第23-24页 |
| 2.2.12 HcAPN3 及结构域重组蛋白与Cry1Ac蛋白的结合分析 | 第24-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-34页 |
| 3.1 中肠总RNA分析 | 第25页 |
| 3.2 PCR及RACE-PCR结果分析 | 第25-26页 |
| 3.3 HcAPN3 序列分析 | 第26-28页 |
| 3.4 重组pFastBac1-hcapn3 的酶切鉴定 | 第28页 |
| 3.5 重组Bacmid-hcapn3 的鉴定 | 第28页 |
| 3.6 HcAPN3 在昆虫细胞系中的表达 | 第28-29页 |
| 3.7 HcAPN3 结构域原核重组表达载体的鉴定 | 第29页 |
| 3.8 HcAPN3 结构域的诱导表达 | 第29-30页 |
| 3.9 HcAPN3 特异抗体的检测 | 第30页 |
| 3.10 HcAPN3 在美国白蛾各组织中的免疫定位 | 第30-31页 |
| 3.11 Cry9Ea6 及Cry1Ac原毒素及毒素片段的SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
| 3.12 美国白蛾BBMV的SDS-PAGE分析 | 第32页 |
| 3.13 Cry9Ea6 毒素与BBMV及HcAPN3 的配体印迹分析 | 第32-33页 |
| 3.14 HcAPN3 结构域重组蛋白对Cry9Ea6 杀虫活性的增效作用 | 第33页 |
| 3.15 Cry1Ac毒素与HcAPN3 的配体印迹分析 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 全文结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 硕士期间发表文章 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
