| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-16页 |
| ·癌症的基因治疗现状 | 第9-10页 |
| ·纳米颗粒作为基因递送系统 | 第10-11页 |
| ·壳聚糖及其纳米粒的制备 | 第11-13页 |
| ·水溶性壳聚糖的制备 | 第13-16页 |
| ·本文研究的目的、意义及内容 | 第16-17页 |
| 2 siRNA/壳聚糖纳米粒的制备和表征 | 第17-26页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第17-18页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-20页 |
| ·质粒的扩增 | 第18-19页 |
| ·质粒基因的小量提取 | 第19页 |
| ·质粒DNA 的鉴定及浓度、纯度测定 | 第19页 |
| ·壳聚糖空白纳米粒及壳聚糖/Survivin siRNA纳米粒的制备 | 第19页 |
| ·壳聚糖与质粒的结合实验 | 第19页 |
| ·纳米粒包封率的测定 | 第19-20页 |
| ·纳米粒的形态 | 第20页 |
| ·实验结果和讨论 | 第20-25页 |
| ·质粒纯度影响因素 | 第20页 |
| ·质粒DNA 的鉴定及浓度、纯度测定 | 第20-21页 |
| ·壳聚糖与质粒的结合实验 | 第21-22页 |
| ·纳米粒包封率的测定 | 第22-24页 |
| ·纳米粒的形态 | 第24-25页 |
| ·本章小结 | 第25-26页 |
| 3 水溶性壳聚糖的制备和表征 | 第26-37页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·壳聚糖的改性研究 | 第27页 |
| ·单因素实验设计 | 第27页 |
| ·改性壳聚糖化学结构表征 | 第27-28页 |
| ·实验结果和讨论 | 第28-36页 |
| ·乙酸变化量对D.D.的影响 | 第28-29页 |
| ·乙酸酐变化量对D.D.的影响 | 第29页 |
| ·乙醇变化量对D.D.的影响 | 第29-30页 |
| ·吐温80变化量对D.D.的影响 | 第30-31页 |
| ·吡啶变化量对D.D.的影响 | 第31页 |
| ·搅拌时间变化量对D.D.的影响 | 第31-32页 |
| ·水溶性壳聚糖红外光谱结构表征 | 第32-33页 |
| ·水溶性壳聚糖X 射线衍射结构表征 | 第33-34页 |
| ·均相条件的控制 | 第34-35页 |
| ·脱乙酰度的测定 | 第35页 |
| ·壳聚糖脱乙酰度的影响因素 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 4 siRNA/水溶性壳聚糖纳米粒的制备和表征 | 第37-43页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第37-38页 |
| ·实验仪器 | 第37-38页 |
| ·试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·质粒的小量提取 | 第38页 |
| ·针对Survivin siRNA/壳聚糖及改性壳聚糖纳米粒的制备 | 第38页 |
| ·壳聚糖及改性壳聚糖与siRNA结合实验 | 第38-39页 |
| ·纳米粒的包封率测定 | 第39页 |
| ·纳米粒形态检测 | 第39页 |
| ·实验结果和讨论 | 第39-42页 |
| ·壳聚糖及改性壳聚糖与siRNA的结合情况分析 | 第39-40页 |
| ·NP 的包封率测定结果 | 第40-42页 |
| ·纳米粒形态检测 | 第42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 5 Survivin siRNA/改性壳聚糖纳米粒的体外转染研究 | 第43-48页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·实验仪器和材料 | 第43-44页 |
| ·实验仪器 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·细胞复苏 | 第44页 |
| ·细胞传代 | 第44页 |
| ·细胞计数 | 第44-45页 |
| ·细胞冻存 | 第45页 |
| ·细胞铺板 | 第45页 |
| ·脂质体-pDNA 转染复合物的制备 | 第45页 |
| ·载基因壳聚糖纳米粒的体外基因转染 | 第45-46页 |
| ·实验结果与讨论 | 第46-47页 |
| ·细胞培养 | 第46-47页 |
| ·转染实验 | 第47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 6 结论及展望 | 第48-49页 |
| ·主要结论 | 第48页 |
| ·后续研究工作的展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 附录 | 第54页 |