| 中文摘要 | 第5-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 前言 | 第9-14页 |
| 实验材料 | 第14-23页 |
| 实验方法 | 第23-59页 |
| 1. 常用分子生物学方法 | 第23-31页 |
| 2. RNA制备和cDNA合成 | 第31-33页 |
| 3. 蛋白的表达和纯化 | 第33-36页 |
| 4. 重组蛋白内毒素的去除方法及检测 | 第36-40页 |
| 5. 蛋白浓度测定 | 第40-41页 |
| 6. 蛋白检测技术 | 第41-47页 |
| 7. 酮式-烯醇式互变异构酶活性测定 | 第47页 |
| 8. 细胞生物学方法 | 第47-49页 |
| 9. 细胞凋亡检测 | 第49页 |
| 10. 约氏疟原虫培养策略 | 第49-50页 |
| 11. 小鼠实验 | 第50-52页 |
| 12. 电子显微镜观察样品制备 | 第52-53页 |
| 13. 流式细胞仪检测和分选 | 第53-55页 |
| 14. PyMIF敲除质粒构建和转染过程中用到的实验方法 | 第55-57页 |
| 15. Transwell细胞迁移实验 | 第57-59页 |
| 实验结果 | 第59-101页 |
| 第一部分 PMIF在致死型约氏疟原虫(Py17XL)感染免疫中的功能探索实验 | 第59-96页 |
| 一、Py17XL MIF-KO和MIF-GFP虫株的制备 | 第60-69页 |
| 1. 转染质粒的构建 | 第60-62页 |
| 2. 大量质粒酶切和线性化的条件优化 | 第62页 |
| 3. Py17XL MIF-KO和MIF-GFP虫株的获得与鉴定 | 第62-69页 |
| 二、PyMIF不影响约氏疟原虫红内期生长 | 第69-72页 |
| 1. PyMIF不影响感染小鼠虫血率和生存率 | 第69页 |
| 2. PyMIF不影响血液感染各期的形态 | 第69-72页 |
| 三、PyMIF在红内期约氏疟原虫中定位于虫体胞质内 | 第72-74页 |
| 1. PyMIF-GFP在约氏疟原虫中定位的观察 | 第72页 |
| 2. PyMIF通过其单抗在约氏疟原虫中的定位 | 第72-74页 |
| 四、PyMIF促进宿主炎症因子的分泌 | 第74-80页 |
| 1. PyMIF促进感染小鼠贫血症状的发生 | 第74-75页 |
| 2. PyMIF促进宿主总IgM的产生 | 第75-76页 |
| 3. PyMIF促进宿主炎症因子的分泌 | 第76-80页 |
| 五、PyMIF促进CD11b~+Ly6c~+细胞在感染小鼠脾脏中聚集以促炎 | 第80-90页 |
| 1. PyMIF的缺失下调感染小鼠脾脏CD11b~+Ly6c~+细胞数 | 第80-88页 |
| 2. CD11b~+Ly6c~+细胞比例的增加促进脾细胞炎症因子分泌 | 第88-90页 |
| 六、PyMIF在体外对CD11b~+Ly6c~+细胞有趋化作用 | 第90-96页 |
| 1. PyMIF对感染小鼠来源的CD11b~+Ly6c~+细胞确有趋化作用 | 第90页 |
| 2. CD11b~+细胞表面有高水平CXCR2和CXCR4的表达 | 第90-92页 |
| 3. CXCR2/4的封闭能抑制PyMIF对CD11b~+Ly6c~+细胞的趋化 | 第92页 |
| 4. PyMIF与MmMIF在对CD11b~+Ly6c~+细胞的趋化上有协同效应 | 第92-94页 |
| 5. PyMIF下调CD11b~+Ly6c~+细胞表面ICAM-1、VLA-4水平 | 第94-96页 |
| 第二部分：PMIF在非致死型约氏疟原虫(Py17XNL)感染免疫中功能的初步探索 | 第96-101页 |
| 1. Py17XNL虫株感染小鼠虫血率及PMIF表达变化分析 | 第96页 |
| 2. Py17XNL MIF-KO虫株的制备 | 第96-97页 |
| 3. 17XNL MIF-KO与WT虫株感染Balb/c小鼠基本指标检测的比较 | 第97-101页 |
| 讨论 | 第101-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-110页 |
| 文献综述 | 第110-124页 |
| 参考文献 | 第118-124页 |
| 附录Ⅰ：本论文使用的英文缩略语 | 第124-126页 |
| 附录Ⅱ：直博期间发表的文章和参加的会议 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
