| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 β-1,3-葡聚糖 | 第10-13页 |
| 1.1.1 真菌细胞壁中的 β-1,3-葡聚糖 | 第10-12页 |
| 1.1.2 昆布多糖 | 第12页 |
| 1.1.3 凝胶多糖 | 第12页 |
| 1.1.4 大麦 β-葡聚糖 | 第12-13页 |
| 1.2 β-1,3-葡聚糖酶 | 第13-21页 |
| 1.2.1 β-1,3-葡聚糖酶及其分类 | 第13页 |
| 1.2.2 昆虫 β-1,3-葡聚糖酶 | 第13-14页 |
| 1.2.3 细菌 β-1,3-葡聚糖酶 | 第14-18页 |
| 1.2.4 植物 β-1,3-葡聚糖酶 | 第18-20页 |
| 1.2.5 真菌 β-1,3-葡聚糖酶 | 第20-21页 |
| 1.3 β-1,3-葡聚糖酶的应用 | 第21-23页 |
| 1.3.1 β-1,3-葡聚糖酶在抗真菌中的应用 | 第22页 |
| 1.3.2 β-1,3-葡聚糖酶在酿酒工业中的应用 | 第22-23页 |
| 1.3.3 β-1,3-葡聚糖酶的其他应用 | 第23页 |
| 1.4 本论文的选题依据和研究内容 | 第23-25页 |
| 1.4.1 选题依据 | 第23-24页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第24-25页 |
| 2 亚洲玉米螟 β-1,3-葡聚糖酶基因Of Lam的调取及序列分析 | 第25-37页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 供试昆虫 | 第25页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 cDNA合成 | 第26-27页 |
| 2.2.4 同源序列的获取 | 第27页 |
| 2.2.5 序列分析 | 第27页 |
| 2.2.6 组织表达特异性检测 | 第27-28页 |
| 2.2.7 发育表达特异性检测 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第29-36页 |
| 2.3.1 亚洲玉米螟总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.3.2 亚洲玉米螟 β-1,3-葡聚糖酶基因OfLam的获得 | 第29-30页 |
| 2.3.3 亚洲玉米螟 β-1,3-葡聚糖酶基因OfLam的序列分析 | 第30页 |
| 2.3.4 OfLam编码蛋白质性质的预测 | 第30-31页 |
| 2.3.5 OfLam蛋白的多重序列比对 | 第31-33页 |
| 2.3.6 OfLam的进化分析 | 第33-34页 |
| 2.3.7 OfLam在不同组织中的表达模式 | 第34-35页 |
| 2.3.8 OfLam在不同生长发育时期的表达模式 | 第35-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 3 亚洲玉米螟OfLam的重组表达、分离纯化与表征 | 第37-49页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 pET28a-OfLam表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.2.2 重组Of Lam在E.coli BL21（DE3）中表达 | 第38页 |
| 3.2.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38-39页 |
| 3.2.4 Western Blot | 第39页 |
| 3.2.5 重组Of Lam的分离纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.6 重组Of Lam的酶活测定 | 第40-41页 |
| 3.2.7 重组Of Lam的最适pH测定 | 第41页 |
| 3.2.8 重组Of Lam的最适温度测定 | 第41页 |
| 3.2.9 重组Of Lam的动力学参数测定 | 第41页 |
| 3.2.10 重组Of Lam的底物选择性 | 第41-42页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第42-47页 |
| 3.3.1 pET28a-OfLam载体的构建和E.coli的转化 | 第42-43页 |
| 3.3.2 重组Of Lam的诱导表达、分离纯化和酶活测定 | 第43-45页 |
| 3.3.3 重组Of Lam的最适催化条件 | 第45-46页 |
| 3.3.4 重组Of Lam的动力学参数 | 第46-47页 |
| 3.3.5 重组Of Lam对于多糖底物的选择性 | 第47页 |
| 3.4 小结 | 第47-49页 |
| 4 环状芽孢杆菌（Bacillus circulans）β-1,3-葡聚糖酶BcLam的重组表达、分离纯化及性质表征 | 第49-65页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第49-54页 |
| 4.2.1 pET28a-Bc Lam表达载体的构建 | 第49页 |
| 4.2.2 重组BcLam在E.coli BL21（DE3）中表达 | 第49-50页 |
| 4.2.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第50页 |
| 4.2.4 Western Blot | 第50页 |
| 4.2.5 重组BcLam的分离纯化 | 第50页 |
| 4.2.6 重组BcLam的酶活测定 | 第50页 |
| 4.2.7 重组BcLam的最适pH测定 | 第50页 |
| 4.2.8 重组BcLam的最适温度测定 | 第50页 |
| 4.2.9 重组BcLam的动力学参数测定 | 第50-51页 |
| 4.2.10 重组BcLam的底物选择性 | 第51页 |
| 4.2.11 重组BcLam水解真菌细胞壁 | 第51页 |
| 4.2.12 重组BcLam与烟曲霉几丁质酶B（AfChiB）水解真菌细胞壁时的协同作用 | 第51-52页 |
| 4.2.13 重组BcLam与重组AfChiB抑制尖孢镰孢菌孢子生长的研究 | 第52页 |
| 4.2.14 重组BcLam结晶条件的初筛 | 第52-54页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第54-64页 |
| 4.3.1 pET28a-Bc Lam载体的构建和E.coli的转化 | 第54-55页 |
| 4.3.2 重组BcLam的诱导表达和分离纯化 | 第55-57页 |
| 4.3.3 重组BcLam的最适催化条件 | 第57-58页 |
| 4.3.4 重组BcLam的底物选择性 | 第58-59页 |
| 4.3.5 重组BcLam水解真菌细胞壁 | 第59-61页 |
| 4.3.6 重组BcLam与重组AfChiB的协同作用 | 第61-62页 |
| 4.3.7 重组BcLam与重组AfChiB抑制尖孢镰孢菌孢子生长 | 第62-63页 |
| 4.3.8 重组BcLam结晶条件的初筛 | 第63-64页 |
| 4.4 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录A OfLam的cDNA序列及编码氨基酸序列 | 第73-75页 |
| 附录B 亚洲玉米螟 β-1,3-葡聚糖酶基因OfLam与欧洲玉米螟 β-1,3-葡聚糖酶基因OnLam的序列比对 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
