摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 绪论 | 第10-22页 |
第一节 ENO1的概述 | 第10-16页 |
1.1 ENO1简介 | 第10页 |
1.2 ENO1基因结构和功能 | 第10-11页 |
1.3 ENO1蛋白结构和功能 | 第11-16页 |
1.4 ENO1蛋白翻译后修饰 | 第16页 |
第二节 SirT3概述 | 第16-22页 |
2.1 SirT3简介 | 第16-17页 |
2.2 SirT3蛋白结构和分布 | 第17-19页 |
2.3 SirT3蛋白剪切体形式 | 第19页 |
2.4 SirT3蛋白生物学功能 | 第19-22页 |
第二章 实验材料和方法 | 第22-32页 |
第一节 实验材料 | 第22-24页 |
1.1 细胞株和菌株 | 第22页 |
1.2 质粒载体和引物 | 第22-23页 |
1.3 耗材和仪器 | 第23页 |
1.4 实验试剂和药品 | 第23-24页 |
1.5 抗体 | 第24页 |
第二节 实验原理与方法 | 第24-32页 |
2.1 质粒构建技术 | 第24页 |
2.2 细胞培养技术 | 第24-25页 |
2.3 细胞转染技术 | 第25-26页 |
2.4 慢病毒包装与感染技术 | 第26-27页 |
2.5 细胞免疫荧光技术 | 第27页 |
2.6 蛋白质免疫印迹技术 | 第27-28页 |
2.7 免疫共沉淀技术 | 第28页 |
2.8 GST融合诱导蛋白表达实验 | 第28-29页 |
2.9 蛋白质体外结合实验 | 第29-30页 |
2.10 分泌蛋白实验 | 第30页 |
2.11 细胞迁移实验 | 第30-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-49页 |
第一节 SirT3与ENO1相互作用的研究 | 第32-38页 |
1.1 体外纯化SirT3蛋白 | 第32-33页 |
1.2 质谱分析SirT3结合蛋白 | 第33-34页 |
1.3 初步发现ENO1与SirT3的结合 | 第34-35页 |
1.4 ENO1与SirT3共定位 | 第35-36页 |
1.5 ENO1与SirT3细胞内结合 | 第36-37页 |
1.6 ENO1与SirT3细胞外结合 | 第37-38页 |
第二节 SirT3与ENO1结合区域的研究 | 第38-40页 |
第三节 SirT3对ENO1去乙酰化修饰 | 第40-43页 |
第四节 SirT3调控ENO1的分泌 | 第43-49页 |
4.1 ENO1的分泌条件 | 第43-44页 |
4.2 分泌条件下ENO1与SirT3相互作用的变化 | 第44-45页 |
4.3 SirT3表达高低对ENO1分泌的影响 | 第45-47页 |
4.4 SirT3对ENO1片段分泌的影响 | 第47-49页 |
第四章 总结与讨论 | 第49-52页 |
第一节 总结 | 第49-50页 |
第二节 讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录Ⅰ 英文缩写 | 第58-59页 |
附录Ⅱ 硕士期间参与发表论文情况 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |