摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略词表 | 第9-14页 |
第一章 绪论 | 第14-25页 |
1.1 BSP在乳腺癌转移中的研究进展 | 第14-17页 |
1.1.1 BSP与乳腺癌的关系 | 第14-15页 |
1.1.2 BSP的结构与功能 | 第15-17页 |
1.2 整合素在乳腺癌中的作用 | 第17-22页 |
1.2.1 整合素简介 | 第17-18页 |
1.2.2 整合素的功能 | 第18-20页 |
1.2.3 整合素 αvβ3 | 第20-21页 |
1.2.4 整合素 αv、β3 与BSP关系的研究 | 第21-22页 |
1.3 本课题研究意义 | 第22-23页 |
1.4 本课题的技术路线 | 第23-25页 |
第二章 乳腺癌组织中BSP与整合素 αv、β3 表达相关性检测 | 第25-30页 |
2.1 引言 | 第25页 |
2.2 实验材料 | 第25-27页 |
2.2.1 实验对象 | 第25-26页 |
2.2.2 主要试剂 | 第26页 |
2.2.3 主要溶液 | 第26页 |
2.2.4 主要仪器 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-29页 |
2.3.1 石蜡切片 | 第27页 |
2.3.2 苏木素-伊红染色(HE染色) | 第27页 |
2.3.3 免疫组化 | 第27-28页 |
2.3.4 结果判断 | 第28页 |
2.3.5 统计学处理 | 第28-29页 |
2.4 结果与讨论 | 第29-30页 |
第三章 整合素 β3 慢病毒表达质粒转染BSP基因沉默的乳腺癌细胞 | 第30-49页 |
3.1 引言 | 第30-31页 |
3.2 材料和试剂 | 第31-34页 |
3.2.1 细胞和质粒 | 第31-32页 |
3.2.2 主要试剂 | 第32-33页 |
3.2.3 相关溶液的配置 | 第33页 |
3.2.4 主要仪器 | 第33-34页 |
3.3 实验方法 | 第34-43页 |
3.3.1 大肠杆菌感受态的制备(CaCl2法) | 第34-35页 |
3.3.2 质粒DNA转化 | 第35-37页 |
3.3.3 质粒测序 | 第37页 |
3.3.4 细胞培养 | 第37页 |
3.3.5 231BO-BSP27细胞筛选 | 第37-38页 |
3.3.6 新霉素对 231BO-BSP27细胞杀伤曲线的测定 | 第38页 |
3.3.7 慢病毒质粒包装转染 231BO-BSP27细胞 | 第38-40页 |
3.3.8 流式细胞术检测细胞 β3 的表达水平 | 第40页 |
3.3.9 免疫细胞化学检测细胞 β3 的表达水平 | 第40-41页 |
3.3.10 Western Blot检测 β3 表达水平 | 第41-43页 |
3.4 结果与讨论 | 第43-48页 |
3.4.1 质粒测序结果 | 第43页 |
3.4.2 231BO-BSP27细胞嘌呤霉素筛选结果 | 第43-44页 |
3.4.3 新霉素对 231BO-BSP27细胞杀伤曲线的测定 | 第44页 |
3.4.4 重组慢病毒转染 231BO-BSP27细胞系的新霉素筛选 | 第44-45页 |
3.4.5 流式细胞术检测细胞表面 β3 的表达水平 | 第45-46页 |
3.4.6 免疫细胞化学检测细胞 β3 表达 | 第46页 |
3.4.7 Western Blot检测细胞 β3 蛋白表达水平检测 | 第46-48页 |
3.5 小结 | 第48-49页 |
第四章 整合素 β3 基因转染对乳腺癌细胞 231BO-BSP27生物学性质的影响 | 第49-56页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 材料和试剂 | 第49-50页 |
4.2.1 细胞和质粒 | 第49页 |
4.2.2 主要试剂 | 第49页 |
4.2.3 相关溶液配制 | 第49-50页 |
4.2.4 主要仪器设备 | 第50页 |
4.3 实验方法 | 第50-53页 |
4.3.1 细胞培养 | 第50-51页 |
4.3.2 CCK8检测细胞增殖活性 | 第51页 |
4.3.3 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第51-52页 |
4.3.4 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第52-53页 |
4.4 实验结果 | 第53-55页 |
4.4.1 CCK8检测细胞增殖活性 | 第53-54页 |
4.4.2 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第54-55页 |
4.4.3 Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力 | 第55页 |
4.5 小结 | 第55-56页 |
结论与展望 | 第56-57页 |
结论 | 第56页 |
本论文的创新之处 | 第56页 |
展望 | 第56-57页 |
References | 第57-64页 |
附表 | 第64-68页 |
攻读博士/硕士学位期间取得的研究成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附件 | 第70页 |