| 摘要 | 第3-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章文献综述 | 第10-21页 |
| 1 口蹄疫病毒 | 第10-14页 |
| 1.1 口蹄疫病毒基因组与分子生物学 | 第10-11页 |
| 1.2 口蹄疫病毒病原学和抗原表位 | 第11-12页 |
| 1.3 口蹄疫病毒防治和疫苗研究 | 第12-14页 |
| 1.3.1 口蹄疫病毒的防治 | 第12页 |
| 1.3.2 口蹄疫病毒的疫苗研究 | 第12-14页 |
| 2 猪细小病毒 | 第14-17页 |
| 2.1 猪细小病毒基因组学和分子生物学 | 第14页 |
| 2.2 猪细小病毒抗原表位 | 第14-15页 |
| 2.3 猪细小病毒诊断与防治 | 第15-16页 |
| 2.3.1 猪细小病毒的诊断 | 第15页 |
| 2.3.2 猪细小病毒的防治 | 第15-16页 |
| 2.4 病毒样粒子疫苗的研究 | 第16-17页 |
| 3 杆状病毒-昆虫细胞表达系统概述 | 第17-21页 |
| 3.1 杆状病毒表达系统 | 第17-19页 |
| 3.1.1 昆虫Sf-9 细胞 | 第18页 |
| 3.1.2 杆状病毒生物学特性 | 第18-19页 |
| 3.2 杆状病毒表达系统在病毒样粒子疫苗的应用研究 | 第19-20页 |
| 3.3 昆虫Sf-9 细胞的悬浮培养工艺的研究 | 第20-21页 |
| 第二章 重组蛋白的表达与检测 | 第21-33页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| 1.1 重组毒株 | 第21-22页 |
| 1.2 试剂 | 第22页 |
| 1.3 仪器 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 昆虫细胞培养 | 第23页 |
| 2.1.1 复苏昆虫细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 悬浮Sf-9 细胞复制动力学曲线 | 第23页 |
| 2.2 重组病毒感染昆虫细胞 | 第23-25页 |
| 2.2.1 P1代重组病毒的扩增 | 第23-24页 |
| 2.2.2 重组病毒PCR鉴定 | 第24页 |
| 2.2.3 测定P3代重组病毒滴度 | 第24-25页 |
| 2.3 重组病毒增值工艺的研究 | 第25页 |
| 2.4 重组蛋白的表达与检测 | 第25-26页 |
| 2.4.1 重组蛋白最适表达条件的优化 | 第25页 |
| 2.4.2 重组蛋白的Western-blotting分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-31页 |
| 3.1 昆虫Sf-9 细胞的培养 | 第26页 |
| 3.2 悬浮昆虫Sf-9 细胞复制动力学曲线 | 第26-27页 |
| 3.3 重组病毒PCR鉴定 | 第27页 |
| 3.4 重组病毒转染昆虫Sf-9 细胞 | 第27-28页 |
| 3.5 测定重组病毒滴度 | 第28页 |
| 3.6 重组病毒增值工艺的研究 | 第28-29页 |
| 3.7 重组蛋白的Western-blotting检测 | 第29-30页 |
| 3.8 重组蛋白表达策略的研究 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 大量表达PPV-VLPS及其动物实验 | 第33-50页 |
| 1 材料 | 第33页 |
| 1.1 质粒与菌株 | 第33页 |
| 1.2 试剂 | 第33页 |
| 1.3 试验动物 | 第33页 |
| 1.4 试验仪器 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-39页 |
| 2.1 重组病毒转染大量悬浮Sf-9 细胞 | 第33-34页 |
| 2.2 重组蛋白的检测与浓度测定 | 第34-35页 |
| 2.2.1 重组蛋白的表达与鉴定 | 第34页 |
| 2.2.2 重组蛋白浓度的测定 | 第34-35页 |
| 2.3 免疫豚鼠试验 | 第35页 |
| 2.4 猪细小病毒VP2蛋白主要抗原区蛋白表达与纯化 | 第35-38页 |
| 2.4.1 蛋白的诱导表达 | 第35-36页 |
| 2.4.2 包涵体裂解 | 第36页 |
| 2.4.3 蛋白纯化 | 第36-37页 |
| 2.4.4 蛋白复性 | 第37页 |
| 2.4.5 SDS-PAGE分析 | 第37页 |
| 2.4.6 Western-blotting分析 | 第37-38页 |
| 2.5 间接ELISA检测抗体水平 | 第38页 |
| 2.6 血清中和实验 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-48页 |
| 3.1 重组蛋白Western-blotting表达与浓度测定 | 第39-40页 |
| 3.2 猪细小病毒VP2主要抗原表位蛋白表达与纯化 | 第40-41页 |
| 3.3 复性蛋白的Western-blotting分析 | 第41-42页 |
| 3.4 间接ELISA检测 | 第42-43页 |
| 3.4.1 间接ELISA检测FMDV抗体水平 | 第42页 |
| 3.4.2 间接ELISA检测PPV抗体水平 | 第42-43页 |
| 3.5 用SPSS软件分析间接ELISA结果 | 第43-47页 |
| 3.5.1 用SPSS软件分析检测PPV抗体结果 | 第43-45页 |
| 3.5.2 用SPSS软件分析检测FMDV抗体结果 | 第45-47页 |
| 3.6 中和抗体检测结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 导师简介 | 第59-60页 |
