| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 植物器官大小调控的研究 | 第10-13页 |
| 1.2.1 植物器官大小调控的研究背景 | 第10-11页 |
| 1.2.2 细胞分裂对植物器官大小调控的研究 | 第11-12页 |
| 1.2.3 细胞体积扩增对植物器官大小调控的研究 | 第12-13页 |
| 1.3 PUB基因研究 | 第13-16页 |
| 1.3.1 U-box的研究背景及现状 | 第13-15页 |
| 1.3.2 PUB基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 重组表达载体的构建 | 第16-17页 |
| 1.4.1 重组表达载体的构建方法 | 第16页 |
| 1.4.2 Gateway技术构建重组表达载体 | 第16-17页 |
| 1.5 研究内容、研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-23页 |
| 2.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株 | 第19页 |
| 2.1.3 载体 | 第19-21页 |
| 2.1.4 数据库和生物软件 | 第21页 |
| 2.1.5 实验中使用的培养基及抗生素配方 | 第21页 |
| 2.1.6 实验仪器与试剂 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-37页 |
| 2.2.1 拟南芥植株培养 | 第23页 |
| 2.2.2 CTAB法提取植物基因组DNA | 第23-24页 |
| 2.2.3 纯合突变体PCR鉴定 | 第24页 |
| 2.2.4 突变体表型分析 | 第24页 |
| 2.2.5 Gateway入门载体的构建 | 第24-28页 |
| 2.2.6 Gateway终载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.2.7 重组表达载体导入农杆菌 | 第30-31页 |
| 2.2.8 农杆菌介导法进行拟南芥的遗传转化 | 第31页 |
| 2.2.9 转基因植株的筛选 | 第31页 |
| 2.2.10 RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.11 反转录PCR(RT-RCR) | 第32-33页 |
| 2.2.12 实时定量PCR(Real-time PCR) | 第33-35页 |
| 2.2.13 GUS融合载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.14 GUS组织化学染色 | 第36页 |
| 2.2.15 花瓣生长曲线 | 第36-37页 |
| 第3章 结果与分析 | 第37-54页 |
| 3.1 PUB基因本身信息和同源基因比对结果 | 第37页 |
| 3.2 突变体鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 突变体表型分析 | 第38-41页 |
| 3.4 花瓣生长曲线 | 第41-43页 |
| 3.5 过表达植株载体构建 | 第43-50页 |
| 3.5.1 PUB基因的PCR扩增 | 第43-44页 |
| 3.5.2 PUB基因构建至入门载体TSK108 | 第44页 |
| 3.5.3 PUB基因构建至终载体p EarleyGate100 | 第44-45页 |
| 3.5.4 终载体导入农杆菌 | 第45页 |
| 3.5.5 过表达转基因植物筛选 | 第45-46页 |
| 3.5.6 35S:PUBX1和 35S:PUBX2过表达转基因植株验证 | 第46-50页 |
| 3.5.7 35S:ΔPUBX1和 35S:ΔPUBX2过表达转基因植株验证 | 第50页 |
| 3.6 PUB基因的表达模式分析 | 第50-54页 |
| 3.6.1 GUS融合载体的构建 | 第50-51页 |
| 3.6.2 构建GUS转基因植株 | 第51-52页 |
| 3.6.3 抗性植株筛选及GUS活性检测 | 第52-54页 |
| 第4章 讨论 | 第54-56页 |
| 4.1 PUB基因功能研究 | 第54页 |
| 4.2 PUBX1和PUBX2具有功能冗余 | 第54-55页 |
| 4.3 PUBX1和PUBX2在花瓣发育过程中的表达模式 | 第55-56页 |
| 第5章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 硕士期间公开发表论文情况 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
