致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 绪论 | 第16-30页 |
1.1 茭白的研究概况 | 第16-18页 |
1.1.1 茭白的种植历史及现状 | 第16-17页 |
1.1.2 茭白的生长发育 | 第17-18页 |
1.2 菰黑粉菌的研究概况 | 第18-20页 |
1.2.1 菰黑粉菌的生物学特性 | 第18-19页 |
1.2.2 菰黑粉菌在茭白植株中的形态变化 | 第19-20页 |
1.3 真菌二型态转换与致病性 | 第20-25页 |
1.3.1 环境因素对真菌二型态转换的影响 | 第21页 |
1.3.2 真菌二型态转换的分子机制 | 第21-22页 |
1.3.3 寄主抗性对真菌致病性的影响 | 第22-24页 |
1.3.4 真菌二型态转换对致病性的影响 | 第24页 |
1.3.5 黑粉菌形态转换对致病性的影响 | 第24-25页 |
1.4 黑粉菌形态转换的分子机制 | 第25-27页 |
1.4.1 a、b遗传交配位点对二型态转换的调控 | 第25-27页 |
1.4.2 其他基因对二形态转换的调控 | 第27页 |
1.5 研究内容与意义 | 第27-30页 |
2 T型及MT型菰黑粉菌单倍体菌株分离及其差异性研究 | 第30-50页 |
2.1 材料与方法 | 第30-34页 |
2.1.1 实验材料 | 第30页 |
2.1.2 主要培养基及试剂 | 第30-31页 |
2.1.3 冬孢子萌发 | 第31-32页 |
2.1.4 单倍体的分离及培养 | 第32页 |
2.1.5 性亲和菌株的筛选 | 第32页 |
2.1.6 单倍体菌株生长速率的测定 | 第32页 |
2.1.7 体外融合实验 | 第32-33页 |
2.1.8 原生质体转化 | 第33-34页 |
2.1.9 DNA的提取 | 第34页 |
2.1.10 PCR扩增 | 第34页 |
2.2 结果与分析 | 第34-50页 |
2.2.1 获得T型及MT型性亲和菌株 | 第34-36页 |
2.2.2 T型菰黑粉菌生活史 | 第36-38页 |
2.2.3 T型与MT型菰黑粉菌孢子的萌发率存在差异 | 第38-39页 |
2.2.4 T型及MT型单倍体对碳源及氮源的偏好性存在差异 | 第39-41页 |
2.2.5 T型及MT型融合及菌丝生长过程对营养条件的偏好性存在差异 | 第41-44页 |
2.2.6 理化条件对T型及MT型融合及菌丝生长的影响不同 | 第44-47页 |
2.2.7 T型与MT型菰黑粉菌基因组序列存在差异 | 第47-50页 |
3 菰黑粉菌b基因功能分析 | 第50-72页 |
3.1 材料与方法 | 第50-55页 |
3.1.1 实验菌株及质粒 | 第50页 |
3.1.2 主要培养基及试剂 | 第50页 |
3.1.3 大肠杆菌感受态的制备 | 第50-51页 |
3.1.4 DNA及RNA的提取 | 第51页 |
3.1.5 质粒DNA的提取 | 第51-52页 |
3.1.6 基因克隆 | 第52页 |
3.1.7 敲除载体的构建 | 第52-53页 |
3.1.8 原生质体转化及缺失菌株的筛选 | 第53-54页 |
3.1.9 荧光定量PCR | 第54页 |
3.1.10 缺失菌株培养及融合 | 第54-55页 |
3.2 结果与分析 | 第55-72页 |
3.2.1 T型及MT型性亲和菌株b基因的克隆 | 第55-56页 |
3.2.2 b基因的生物信息学分析 | 第56-58页 |
3.2.3 b基因缺失菌株的构建 | 第58-61页 |
3.2.4 b基因缺失影响菌丝的生长 | 第61-63页 |
3.2.5 b基因影响Rbf1、Clp1基因对菌丝生长的调节 | 第63-72页 |
4 全文总结与讨论 | 第72-80页 |
4.1 全文总结 | 第72-74页 |
4.1.1 菰黑粉菌T型和MT型菌株差异性 | 第72-73页 |
4.1.2 菰黑粉菌b位点基因的功能分析 | 第73-74页 |
4.2 讨论 | 第74-78页 |
4.2.1 菰黑粉菌的生活史 | 第74-75页 |
4.2.2 MT型和T型差异性与茭白表型的关系 | 第75-76页 |
4.2.3 菰黑粉菌中b基因的功能模型 | 第76-78页 |
4.3 课题展望 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-86页 |
附录 | 第86-93页 |
附录一 部分差异基因验证引物 | 第86页 |
附录二 a、b基因的特异性检测引物 | 第86-87页 |
附录三 b基因全长序列引物 | 第87页 |
附录四 b基因敲除载体构建引物 | 第87-88页 |
附录五 荧光定量PCR引物 | 第88-89页 |
附录六 bE基因及bW基因序列比对分析 | 第89-93页 |
作者简历 | 第93页 |