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菰黑粉菌T型和MT型菌株差异性研究及b基因功能分析

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1 绪论第16-30页
    1.1 茭白的研究概况第16-18页
        1.1.1 茭白的种植历史及现状第16-17页
        1.1.2 茭白的生长发育第17-18页
    1.2 菰黑粉菌的研究概况第18-20页
        1.2.1 菰黑粉菌的生物学特性第18-19页
        1.2.2 菰黑粉菌在茭白植株中的形态变化第19-20页
    1.3 真菌二型态转换与致病性第20-25页
        1.3.1 环境因素对真菌二型态转换的影响第21页
        1.3.2 真菌二型态转换的分子机制第21-22页
        1.3.3 寄主抗性对真菌致病性的影响第22-24页
        1.3.4 真菌二型态转换对致病性的影响第24页
        1.3.5 黑粉菌形态转换对致病性的影响第24-25页
    1.4 黑粉菌形态转换的分子机制第25-27页
        1.4.1 a、b遗传交配位点对二型态转换的调控第25-27页
        1.4.2 其他基因对二形态转换的调控第27页
    1.5 研究内容与意义第27-30页
2 T型及MT型菰黑粉菌单倍体菌株分离及其差异性研究第30-50页
    2.1 材料与方法第30-34页
        2.1.1 实验材料第30页
        2.1.2 主要培养基及试剂第30-31页
        2.1.3 冬孢子萌发第31-32页
        2.1.4 单倍体的分离及培养第32页
        2.1.5 性亲和菌株的筛选第32页
        2.1.6 单倍体菌株生长速率的测定第32页
        2.1.7 体外融合实验第32-33页
        2.1.8 原生质体转化第33-34页
        2.1.9 DNA的提取第34页
        2.1.10 PCR扩增第34页
    2.2 结果与分析第34-50页
        2.2.1 获得T型及MT型性亲和菌株第34-36页
        2.2.2 T型菰黑粉菌生活史第36-38页
        2.2.3 T型与MT型菰黑粉菌孢子的萌发率存在差异第38-39页
        2.2.4 T型及MT型单倍体对碳源及氮源的偏好性存在差异第39-41页
        2.2.5 T型及MT型融合及菌丝生长过程对营养条件的偏好性存在差异第41-44页
        2.2.6 理化条件对T型及MT型融合及菌丝生长的影响不同第44-47页
        2.2.7 T型与MT型菰黑粉菌基因组序列存在差异第47-50页
3 菰黑粉菌b基因功能分析第50-72页
    3.1 材料与方法第50-55页
        3.1.1 实验菌株及质粒第50页
        3.1.2 主要培养基及试剂第50页
        3.1.3 大肠杆菌感受态的制备第50-51页
        3.1.4 DNA及RNA的提取第51页
        3.1.5 质粒DNA的提取第51-52页
        3.1.6 基因克隆第52页
        3.1.7 敲除载体的构建第52-53页
        3.1.8 原生质体转化及缺失菌株的筛选第53-54页
        3.1.9 荧光定量PCR第54页
        3.1.10 缺失菌株培养及融合第54-55页
    3.2 结果与分析第55-72页
        3.2.1 T型及MT型性亲和菌株b基因的克隆第55-56页
        3.2.2 b基因的生物信息学分析第56-58页
        3.2.3 b基因缺失菌株的构建第58-61页
        3.2.4 b基因缺失影响菌丝的生长第61-63页
        3.2.5 b基因影响Rbf1、Clp1基因对菌丝生长的调节第63-72页
4 全文总结与讨论第72-80页
    4.1 全文总结第72-74页
        4.1.1 菰黑粉菌T型和MT型菌株差异性第72-73页
        4.1.2 菰黑粉菌b位点基因的功能分析第73-74页
    4.2 讨论第74-78页
        4.2.1 菰黑粉菌的生活史第74-75页
        4.2.2 MT型和T型差异性与茭白表型的关系第75-76页
        4.2.3 菰黑粉菌中b基因的功能模型第76-78页
    4.3 课题展望第78-80页
参考文献第80-86页
附录第86-93页
    附录一 部分差异基因验证引物第86页
    附录二 a、b基因的特异性检测引物第86-87页
    附录三 b基因全长序列引物第87页
    附录四 b基因敲除载体构建引物第87-88页
    附录五 荧光定量PCR引物第88-89页
    附录六 bE基因及bW基因序列比对分析第89-93页
作者简历第93页

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