| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 DNA甲基化 | 第8-10页 |
| 1.1.1 DNA甲基化原理 | 第8-9页 |
| 1.1.2 异常甲基化与肿瘤 | 第9-10页 |
| 1.2 骨髓增生异常综合征研究现状 | 第10-14页 |
| 1.2.1 骨髓增生异常综合征概述 | 第10-12页 |
| 1.2.2 DNA甲基化与骨髓增生异常综合征 | 第12页 |
| 1.2.3 常用治疗方法 | 第12-14页 |
| 1.3 转录因子 | 第14-15页 |
| 1.3.1 转录因子概述 | 第14页 |
| 1.3.2 TWIST1 | 第14-15页 |
| 1.4 蛋白质相互作用 | 第15-16页 |
| 1.5 立题依据及意义 | 第16页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.1.2 培养基 | 第18页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 试验方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第20页 |
| 2.2.2 细胞增殖检测 | 第20页 |
| 2.2.3 细胞凋亡检测 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞周期检测 | 第20-21页 |
| 2.2.5 蛋白质提取 | 第21页 |
| 2.2.6 蛋白质免疫印迹（Western Blot） | 第21页 |
| 2.2.7 细胞转染 | 第21-22页 |
| 2.2.8 原核表达载体的构建 | 第22页 |
| 2.2.9 蛋白诱导表达 | 第22页 |
| 2.2.10 GST-Pull down | 第22-23页 |
| 2.2.11 Epitope Mapping | 第23页 |
| 2.2.12 酶联免疫反应（ELISA） | 第23-24页 |
| 2.2.13 实时荧光定量PCR（real-time PCR） | 第24页 |
| 2.2.14 甲基转移酶活性测定 | 第24-25页 |
| 2.2.15 TAP/MS串联亲和质谱 | 第25页 |
| 2.2.16 甲基化PCR测序 | 第25页 |
| 2.2.17 全基因组甲基化测序 | 第25页 |
| 2.2.18 统计学处理 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-46页 |
| 3.1 TWIST1对于MDS细胞行为的影响及可能机制的研究 | 第26-33页 |
| 3.1.1 过表达TWIST1稳定转染细胞株构建 | 第26页 |
| 3.1.2 地西他滨处理和过表达TWIST1对细胞增殖的影响 | 第26-29页 |
| 3.1.3 过表达TWIST1对凋亡和周期的影响 | 第29-33页 |
| 3.1.4 小结 | 第33页 |
| 3.2 TWIST1与甲基转移酶DNMT3a的相互作用 | 第33-40页 |
| 3.2.1 过表达TWIST1引起甲基转移酶表达水平增加 | 第33-34页 |
| 3.2.2 串联亲和质谱预测TWIST1和DNMT3a相结合 | 第34-36页 |
| 3.2.3 免疫共沉淀和GST-Pull down验证蛋白结合 | 第36-37页 |
| 3.2.4 TWIST1和DNMT3a的结合位点预测 | 第37-40页 |
| 3.2.5 小结 | 第40页 |
| 3.3 TWIST1对甲基化水平调控的研究 | 第40-46页 |
| 3.3.1 过表达TWIST1影响细胞甲基化水平 | 第40-43页 |
| 3.3.2 过表达TWIST1影响下游靶基因甲基化水平 | 第43-45页 |
| 3.3.3 实时荧光定量PCR检测TWIST1靶基因表达量 | 第45页 |
| 3.3.4 小结 | 第45-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第46页 |
| 展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录： 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
