中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
英文缩写词 | 第14-15页 |
文献综述 | 第15-24页 |
引言 | 第24-25页 |
1 材料与方法 | 第25-36页 |
1.1 试验材料 | 第25页 |
1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
1.3 溶液配制 | 第26-27页 |
1.4 PC12细胞的培养及处理 | 第27页 |
1.4.1 PC12细胞培养 | 第27页 |
1.4.2 PC12细胞冻存与复苏 | 第27页 |
1.5 DON母液配制及试验分组 | 第27页 |
1.6 形态学观察 | 第27-28页 |
1.6.1 光学显微镜 | 第27页 |
1.6.2 透射电子显微镜 | 第27-28页 |
1.7 细胞存活率的检测—CCK-8 法 | 第28页 |
1.8 乳酸脱氢酶的测定 | 第28页 |
1.9 Hoechst 33258 荧光染色观察 | 第28页 |
1.10 Annexin V-FITC/PI双染法分析PC12细胞凋亡率 | 第28页 |
1.11 Caspase3最佳检测时间点 | 第28-29页 |
1.12 线粒体膜电位检测 | 第29页 |
1.13 实时荧光定量PCR | 第29-31页 |
1.13.1 细胞总RNA的提取 | 第29页 |
1.13.2 RNA反转录成c DNA | 第29-30页 |
1.13.3 目的基因引物设计 | 第30页 |
1.13.4 实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
1.14 Western-blot分析蛋白表达水平 | 第31-33页 |
1.14.1 细胞蛋白的提取 | 第31页 |
1.14.2 细胞蛋白含量的测定 | 第31页 |
1.14.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第31-32页 |
1.14.4 转膜 | 第32页 |
1.14.5 免疫印迹杂交(Western-blot) | 第32-33页 |
1.15 免疫荧光染色法观察Caspase3激活情况 | 第33页 |
1.16 EMSA法检测转录因子转录活性 | 第33-35页 |
1.16.1 核蛋白制备与浓度测定 | 第33页 |
1.16.2 聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第33页 |
1.16.3 EMSA结合反应 | 第33-34页 |
1.16.4 电泳分析 | 第34页 |
1.16.5 电转膜 | 第34页 |
1.16.6 紫外交联 | 第34页 |
1.16.7 化学发光法检测生物素标记的探针 | 第34-35页 |
1.17 数据处理 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-46页 |
2.1 DON对PC12细胞形态的影响 | 第36-37页 |
2.2 DON对PC12细胞活性的影响 | 第37-38页 |
2.3 DON对PC12细胞LDH活性的影响 | 第38页 |
2.4 DON对PC12细胞核的影响 | 第38-39页 |
2.5 DON对PC12细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
2.6 Caspase3最佳检测时间点 | 第40-41页 |
2.7 DON对PC12细胞线粒体膜电位的影响 | 第41-42页 |
2.8 DON对PC12细胞凋亡相关基因表达的影响 | 第42-43页 |
2.9 DON对PC12细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
2.10 DON对Caspase3激活情况的影响 | 第44-45页 |
2.11 DON对转录因子转录活性的影响 | 第45-46页 |
3 讨论 | 第46-50页 |
3.1 形态学变化 | 第46页 |
3.2 细胞活性、LDH以及凋亡率 | 第46-47页 |
3.3 细胞核变化 | 第47页 |
3.4 线粒体膜电位 | 第47页 |
3.5 凋亡相关基因 | 第47-48页 |
3.6 凋亡相关蛋白 | 第48-49页 |
3.7 转录因子 | 第49-50页 |
4 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |