| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 致病疫霉研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 马铃薯晚疫病危害 | 第13页 |
| 1.1.2 致病疫霉概述 | 第13-14页 |
| 1.1.3 致病疫霉的生活史 | 第14-15页 |
| 1.2 蛋白质组学概述 | 第15-18页 |
| 1.2.1 比较蛋白质组学研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.2 iTRAQ技术简介 | 第16-18页 |
| 1.2.3 生物信息学分析 | 第18页 |
| 1.3 基因功能研究的相关技术 | 第18-21页 |
| 1.3.1 实时定量PCR | 第18-19页 |
| 1.3.2 原生质体转化 | 第19-20页 |
| 1.3.3 蛋白质亚细胞定位 | 第20-21页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第21页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-47页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 致病疫霉菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 载体 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂及试剂盒 | 第22-23页 |
| 2.1.4 试验溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.1.5 试验仪器及厂家 | 第24-25页 |
| 2.1.6 培养基配制方法 | 第25页 |
| 2.1.7 试验相关引物 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-47页 |
| 2.2.1 α1性激素诱导下A2交配型致病疫霉比较蛋白质组学分析 | 第26-33页 |
| 2.2.2 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0 cDNA克隆与序列分析 | 第33-38页 |
| 2.2.3 致病疫霉产孢子囊培养基及诱导方法的筛选 | 第38-39页 |
| 2.2.4 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0在不同发育阶段表达量的分析 | 第39-40页 |
| 2.2.5 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0蛋白亚细胞定位 | 第40-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-93页 |
| 3.1 α1性激素诱导下A2交配型致病疫霉P7723比较蛋白质组学分析 | 第47-72页 |
| 3.1.1 致病疫霉P7723蛋白提取结果 | 第47页 |
| 3.1.2 肽段SCX分级结果 | 第47-48页 |
| 3.1.3 质谱分析结果 | 第48-49页 |
| 3.1.4 蛋白质鉴定结果 | 第49页 |
| 3.1.5 One way anova分析 | 第49-57页 |
| 3.1.6 T Test分析 | 第57-72页 |
| 3.2 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0 cDNA克隆与序列分析 | 第72-78页 |
| 3.2.1 致病疫霉菌株P7723 RNA的提取 | 第72-73页 |
| 3.2.2 PITG-08690T0及PITG-09593T0 cDNA蛋白编码区的PCR扩增 | 第73-74页 |
| 3.2.3 PITG-08690T0及PITG-09593T0 cDNA蛋白编码区序列PCR产物的纯化回收 | 第74页 |
| 3.2.4 重组质粒pEASY-08及pEASY-09的鉴定 | 第74-75页 |
| 3.2.5 PITG-08690T0及PITG-09593T0 cDNA蛋白编码区序列分析 | 第75-78页 |
| 3.3 致病疫霉产孢子囊培养基及诱导方法的筛选 | 第78-82页 |
| 3.3.1 不同培养基上菌落形态特征 | 第78-79页 |
| 3.3.2 培养基种类与菌落生长直径的关系 | 第79-80页 |
| 3.3.3 不同培养基对致病疫霉菌株P7723产孢子囊量的影响 | 第80页 |
| 3.3.4 不同处理对致病疫霉菌株P7723产孢子囊量的影响 | 第80-82页 |
| 3.4 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0基因在不同发育阶段表达量的分析 | 第82-83页 |
| 3.5 致病疫霉PITG-08690T0及PITG-09593T0蛋白亚细胞定位 | 第83-93页 |
| 3.5.1 荧光蛋白融合表达载体的构建 | 第83-87页 |
| 3.5.2 致病疫霉原生质体的制备 | 第87-90页 |
| 3.5.3 PITG-08690T0及PITG-09593T0荧光蛋白融合表达载体的转化及荧光显微镜观察 | 第90-93页 |
| 4 讨论与结论 | 第93-99页 |
| 4.1 讨论 | 第93-97页 |
| 4.1.1 蛋白质组学分析 | 第93-95页 |
| 4.1.2 致病疫霉孢子囊的诱导 | 第95-96页 |
| 4.1.3 致病疫霉遗传转化体系的建立 | 第96-97页 |
| 4.1.4 PITG-08690T0和PITG-09593T0基因在不同发育阶段的表达及蛋白的亚细胞定位 | 第97页 |
| 4.2 结论 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-107页 |
| 作者简介 | 第107页 |
