| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 一. 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 ISG60及相关蛋白 | 第12-17页 |
| 1.1.1 IFIT家族简介 | 第12页 |
| 1.1.2 IFIT基因结构特征 | 第12页 |
| 1.1.3 IFIT基因诱导表达的特点 | 第12-13页 |
| 1.1.4 IFIT家族分子的抗病毒作用 | 第13-14页 |
| 1.1.5 IFIT基因的转录调控 | 第14-15页 |
| 1.1.5.1 病毒对IFIT基因的转录调控 | 第14页 |
| 1.1.5.2 I型干扰素对IFIT基因的转录调控 | 第14-15页 |
| 1.1.6 IFIT编码蛋白的结构与功能 | 第15页 |
| 1.1.7 IIT家族分子参与影响IFN产生 | 第15-16页 |
| 1.1.8 ISG60研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2 ISG43及相关蛋白 | 第17-22页 |
| 1.2.1 去泛素化酶简介 | 第17页 |
| 1.2.2 去泛素化酶的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.2.3 去泛素化酶与细胞生理活动 | 第18-19页 |
| 1.2.3.1 生长的调节 | 第18页 |
| 1.2.3.2 周期的调节 | 第18页 |
| 1.2.3.3 信号的调节 | 第18-19页 |
| 1.2.4 去泛素化酶在病理中的作用 | 第19-21页 |
| 1.2.4.1 与神经病变作用 | 第19页 |
| 1.2.4.2 与肿瘤生长的作用 | 第19页 |
| 1.2.4.3 与免疫系统疾病作用 | 第19-20页 |
| 1.2.4.4 与病毒作用 | 第20页 |
| 1.2.4.5 与胰腺疾病作用 | 第20页 |
| 1.2.4.6 与血液系统疾病作用 | 第20-21页 |
| 1.2.5 ISG43研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 二. 材料与方法 | 第24-39页 |
| 2.1 技术路线 | 第24页 |
| 2.2 主要材料、试剂和仪器 | 第24-29页 |
| 2.2.1 材料 | 第24页 |
| 2.2.2 仪器与设备 | 第24-25页 |
| 2.2.3 试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.4 试剂配制 | 第26-29页 |
| 2.2.4.1 细菌培养试剂 | 第26页 |
| 2.2.4.2 DNA电泳试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.4.3 感受态细胞制备 | 第27页 |
| 2.2.4.4 重组蛋白诱导表达试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.4.5 SDS-PAGE电泳试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.4.6 Western Blot试剂 | 第29页 |
| 2.2.4.7 细胞培养试剂 | 第29页 |
| 2.3 试验方法 | 第29-39页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第29-30页 |
| 2.3.2 载体构建策略 | 第30-31页 |
| 2.3.3 基因克隆 | 第31-33页 |
| 2.3.4 构建原核表达载体 | 第33-34页 |
| 2.3.5 重组蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.3.6 重组蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| 2.3.7 Western Blot纯化蛋白的鉴定 | 第36页 |
| 2.3.8 免疫小鼠制备多克隆抗体 | 第36-37页 |
| 2.3.9 PK-15细胞的培养 | 第37-38页 |
| 2.3.10 多克隆抗体特异性鉴定 | 第38-39页 |
| 三. 试验结果 | 第39-56页 |
| 3.1 猪ISG43多克隆抗体的制备 | 第39-47页 |
| 3.1.1 ISG43基因的克隆 | 第40-42页 |
| 3.1.2 ISG43重组菌的诱导及蛋白表达形式的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.1.3 原核表达ISG43蛋白的纯化与鉴定 | 第44页 |
| 3.1.4 ISG43多克隆抗体与原核表达ISG43蛋白的反应性鉴定 | 第44-45页 |
| 3.1.5 ISG43多克隆抗体与PK-15细胞中ISG43蛋白的反应性 | 第45-47页 |
| 3.2 猪ISG60多克隆抗体的制备 | 第47-56页 |
| 3.2.1 ISG60基因的克隆 | 第49-51页 |
| 3.2.2 ISG60重组菌的诱导及蛋白表达形式的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.3 原核表达ISG60蛋白的纯化与鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.4 ISG60多克隆抗体与原核表达ISG60蛋白的反应性鉴定 | 第53-54页 |
| 3.2.5 ISG60多克隆抗体与PK-15细胞中ISG60蛋白的反应性 | 第54-56页 |
| 四. 讨论 | 第56-60页 |
| 4.1 ISG43和ISG60的原核表达 | 第56-57页 |
| 4.2 重组蛋白的纯化 | 第57-58页 |
| 4.3 多克隆抗体制备 | 第58页 |
| 4.4 多克隆抗体的鉴定 | 第58-59页 |
| 4.5 多克隆抗体的重要性及应用前景 | 第59-60页 |
| 五. 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
