| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 第一章 食管鳞癌中miR-199a-3p对细胞增殖和凋亡的影响 | 第18-38页 |
| 引言 | 第18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第18-21页 |
| 1.1.1 实验设备 | 第18-19页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第20-21页 |
| 1.1.4 食管鳞癌细胞株 | 第21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第21-23页 |
| 1.2.2 细胞转染 | 第23-24页 |
| 1.2.3 荧光定量PCR实验 | 第24-28页 |
| 1.2.4 平板克隆形成实验 | 第28页 |
| 1.2.5 CCK-8 法检测细胞增殖实验 | 第28-29页 |
| 1.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡实验 | 第29-30页 |
| 1.2.7 统计学分析 | 第30-31页 |
| 2 结果 | 第31-36页 |
| 2.1 miR-199a-3p在五株食管鳞癌细胞中的表达情况 | 第31页 |
| 2.2 转染miR-199a-3p mimics前后miR-199a-3p在三株食管鳞癌细胞中的表达情况 | 第31页 |
| 2.3 miR-199a-3p对食管鳞癌细胞克隆形成能力的影响 | 第31-33页 |
| 2.4 miR-199a-3p对食管鳞癌细胞增殖的影响 | 第33-34页 |
| 2.5 miR-199a-3p对食管鳞癌细胞凋亡的影响 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-37页 |
| 4 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 食管鳞癌细胞中miR-199a-3p对细胞增殖和凋亡影响的机制探讨 | 第38-51页 |
| 引言 | 第38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-45页 |
| 1.1 实验材料 | 第38-41页 |
| 1.1.1 实验设备 | 第38-39页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第39-40页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第40-41页 |
| 1.2 实验方法 | 第41-45页 |
| 1.2.1 Western blots实验 | 第41-45页 |
| 1.2.2 细胞转染 | 第45页 |
| 1.2.3 荧光定量PCR实验 | 第45页 |
| 1.2.4 统计学处理 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-49页 |
| 2.1 miR-199a-3p对mTORC1/p70S6K信号通路相关因子及mRNA表达水平的影响 | 第45-47页 |
| 2.2 miR-199a-3p对自噬和凋亡蛋白表达水平的影响 | 第47-48页 |
| 2.3 mTORC1特异性抑制剂RAD001对miR-199a-3p在食管鳞癌细胞中表达水平的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 食管鳞癌细胞中下调Rictor表达PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂对细胞增殖和凋亡影响的变化 | 第51-65页 |
| 引言 | 第51页 |
| 1 材料与方法 | 第51-55页 |
| 1.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 1.1.1 实验设备 | 第51页 |
| 1.1.2 实验试剂 | 第51-52页 |
| 1.1.3 试剂配制 | 第52页 |
| 1.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 1.2.1 ECa109 Rictor-shRNA稳定表达细胞株筛选实验 | 第52-53页 |
| 1.2.2 平板克隆形成实验 | 第53-54页 |
| 1.2.3 流式细胞术检测细胞凋亡实验 | 第54页 |
| 1.2.4 统计学数据分析 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-63页 |
| 2.1 ECa109细胞中下调Rictor表达后LY294002对细胞克隆形成能力的影响 | 第55-56页 |
| 2.2 ECa109细胞中下调Rictor表达后RAD001对细胞克隆形成能力的影响 | 第56-58页 |
| 2.3 ECa109细胞中下调Rictor表达后PP242对细胞克隆形成能力的影响 | 第58-59页 |
| 2.4 ECa109细胞中下调Rictor表达后LY294002对细胞凋亡的影响 | 第59-61页 |
| 2.5 ECa109细胞中下调Rictor表达后RAD001对细胞凋亡的影响 | 第61-62页 |
| 2.6 ECa109细胞中下调Rictor表达后PP242对细胞凋亡的影响 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-64页 |
| 4 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 综述：miRNA研究进展 | 第71-78页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 个人简历 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
