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地方品系鸡群中ALV和REV感染的检测及其与疫苗外源病毒污染的关系

中文摘要第1-13页
ABSTRACT第13-15页
1 前言第15-46页
   ·禽网状内皮组织增生症病毒研究进展第15-28页
     ·病原学第15页
     ·基因组结构及功能介绍第15-18页
       ·病毒核酸第15-17页
       ·蛋白质第17-18页
         ·核心蛋白第17-18页
         ·酶蛋白第18页
         ·囊膜蛋白第18页
     ·REV的复制第18-19页
     ·REV的分类第19-20页
     ·致病性第20-23页
     ·流行病学第23-24页
       ·宿主第23页
       ·病毒的传播第23-24页
         ·水平传播第23-24页
         ·垂直传播第24页
     ·REV诊断第24-27页
       ·病毒分离第25页
       ·血清学检测第25-26页
       ·分子生物学检测第26页
       ·与其他病毒的鉴别诊断第26-27页
     ·生物制品中的REV污染第27-28页
   ·禽白血病病毒研究进展第28-45页
     ·病原学第29-34页
       ·形态及理化特性第29-30页
       ·基因组结构第30-31页
       ·蛋白及其功能第31-34页
     ·流行病学第34-37页
       ·发生和传播第34-35页
       ·宿主第35页
       ·传播方式第35-37页
     ·临床特征和病理变化第37-39页
       ·临床特征第37页
       ·病理变化第37-39页
     ·禽白血病的检测和诊断第39-43页
       ·病毒的分离与鉴定第39-40页
       ·血清学检测方法第40-41页
         ·病毒中和试验第40页
         ·琼脂扩散试验第40页
         ·免疫荧光检测方法第40-41页
         ·酶联免疫吸附试验第41页
       ·分子生物学检测方法第41-43页
         ·直接PCR法第41-42页
         ·RT-PCR法第42页
         ·实时定量PCR第42页
         ·环介导等温扩增方法第42-43页
     ·预防和控制第43-44页
       ·免疫与治疗第43页
       ·净化第43-44页
     ·兽用生物制品ALV污染第44-45页
   ·本研究的目的与意义第45-46页
2. 材料与方法第46-62页
   ·材料第46-48页
     ·鸡胚与细胞第46页
     ·细胞培养试剂与耗材第46页
     ·分子生物学试剂第46页
     ·病毒与抗体第46-47页
     ·其他常规试剂第47页
     ·常规溶液的配制第47页
     ·血清样品的采集与保存第47页
     ·抗体检测试剂盒第47-48页
     ·疫苗第48页
     ·主要仪器设备第48页
   ·方法第48-62页
     ·血清样品的ELISA检测第48-49页
     ·血清样品的IFA鉴定第49-52页
       ·鸡胚成纤维细胞的制备第49-50页
       ·REV感染阳性细胞的制备与鉴定第50页
       ·ALV感染阳性细胞的制备与鉴定第50-51页
       ·待检血清样品的IFA鉴定第51-52页
     ·接种SPF鸡法检测疫苗中ALV和REV污染第52页
     ·应用核酸斑点分子杂交检测试剂盒检测弱毒疫苗中ALV和REV污染第52-55页
       ·病毒总RNA的提取第53页
       ·疫苗核酸样品的RT-PCR扩增第53-54页
       ·应用核酸斑点分子杂交检测试剂盒检测弱毒疫苗中ALV和REV污染第54-55页
     ·应用RT-PCR扩增测序法检测弱毒疫苗中ALV和REV污染第55-62页
       ·REV的RT-PCR扩增第55-57页
       ·ALV的RT-PCR扩增第57-59页
       ·扩增产物的回收与纯化第59-60页
       ·PCR产物与T载体的连接第60页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第60-61页
       ·连接产物的转化第61页
       ·重组克隆细菌的筛选第61页
       ·质粒DNA的提取第61页
       ·质粒DNA的酶切鉴定第61-62页
       ·阳性克隆的测序与序列分析第62页
3. 结果第62-72页
   ·地方品系种鸡中REV和ALV抗体阳性率统计第62-63页
   ·ELISA和IFA鉴定结果的对比第63-65页
   ·接种SPF鸡法检测疫苗中ALV和REV污染第65-67页
   ·核酸斑点分子杂交检测试剂盒检测疫苗中ALV和REV污染第67-70页
   ·RT-PCR测序检测疫苗中ALV和REV污染第70-72页
4. 讨论第72-76页
   ·不同地方品系鸡群中REV和ALV感染状况分析第72-73页
   ·不同疫苗中REV和ALV污染状况分析第73-76页
参考文献第76-92页
致谢第92页

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