| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 大熊猫疾病研究概况 | 第12-13页 |
| ·病毒性疾病 | 第12-13页 |
| ·寄生虫疾病 | 第13页 |
| 2 干扰素研究概况 | 第13-21页 |
| ·干扰素的发现 | 第14页 |
| ·干扰素γ的产生与结构 | 第14-15页 |
| ·干扰素γ的受体及信号传导 | 第15-16页 |
| ·干扰素γ的主要生物活性 | 第16-19页 |
| ·抗病毒作用 | 第16-17页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第17-18页 |
| ·免疫调节作用 | 第18页 |
| ·抗寄生虫作用 | 第18-19页 |
| ·长效干扰素的研究情况 | 第19-21页 |
| ·PFG修饰 | 第19页 |
| ·定点突变技术 | 第19-20页 |
| ·糖基化修饰 | 第20页 |
| ·融合蛋白 | 第20页 |
| ·缓释系统 | 第20-21页 |
| 3 PBCA-NS载药系统研究概况 | 第21-26页 |
| ·制作工艺 | 第22-23页 |
| ·乳化聚合法 | 第22页 |
| ·界面聚合法 | 第22-23页 |
| ·纳米沉淀法 | 第23页 |
| ·嵌段共聚物合成法 | 第23页 |
| ·PBCA-NS载药系统的应用 | 第23-25页 |
| ·脑靶向性 | 第23-24页 |
| ·肝靶向性 | 第24页 |
| ·骨髓靶向性 | 第24-25页 |
| ·其他靶向性 | 第25页 |
| ·毒理学研究 | 第25-26页 |
| 4 研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 IFNγ的原核表达 | 第27-47页 |
| 1 实验材料 | 第27-31页 |
| ·载体、菌株和细胞 | 第27-28页 |
| ·实验动物 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28页 |
| ·试剂与配制 | 第28-31页 |
| 2 实验方法 | 第31-39页 |
| ·干扰素γ克隆载体的构建 | 第31-35页 |
| ·引物的设计与合成 | 第31页 |
| ·大熊猫外周血淋巴细胞的分离 | 第31页 |
| ·总RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·cDNA的合成 | 第32页 |
| ·目的基因的扩增与回收纯化 | 第32-33页 |
| ·克隆载体的连接 | 第33页 |
| ·质粒的转化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·干扰素γ原核表达载体的构建 | 第35-39页 |
| ·表达载体的连接 | 第35页 |
| ·重组质粒的转化 | 第35页 |
| ·重组表达菌的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE检测 | 第36页 |
| ·原核表达的条件优化 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白可溶性检测 | 第37页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的浓度与活性测定 | 第38页 |
| ·重组蛋白的免疫印迹(Western blotting)检测 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-44页 |
| ·干扰素γ克隆载体的构建 | 第39-40页 |
| ·目的基因的扩增 | 第39页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| ·干扰素γ原核表达载体的构建 | 第40-44页 |
| ·表达载体双酶切鉴定 | 第40页 |
| ·重组蛋白SDS-PAGE检测结果 | 第40-41页 |
| ·原核表达的条件优化结果 | 第41-43页 |
| ·重组蛋白可溶性检测结果 | 第43页 |
| ·重组蛋白的纯化结果 | 第43-44页 |
| ·表达蛋白的浓度与活性结果 | 第44页 |
| ·表达蛋白的免疫印迹(Western blotting)检测结果 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| ·原核表达系统 | 第44-45页 |
| ·包涵体蛋白的纯化与复性 | 第45-47页 |
| 第三章 干扰素γ纳米球的制备 | 第47-59页 |
| 1 实验材料 | 第47-48页 |
| ·病毒与细胞 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·实验仪器 | 第47页 |
| ·试剂与配制 | 第47-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-50页 |
| ·纳米球的制备 | 第48页 |
| ·纳米球的质量评价 | 第48-49页 |
| ·纳米球包封率、载药量的测定 | 第48-49页 |
| ·纳米球表征 | 第49页 |
| ·纳米球的药效测定 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-55页 |
| ·IFNγ-PBCA-NS的制备 | 第50-51页 |
| ·纳米球的包封率与载药量 | 第51-52页 |
| ·纳米球的表征 | 第52-53页 |
| ·纳米球药效测定结果 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·大熊猫IFN-γ纳米球的制备情况 | 第55-56页 |
| ·纳米球制备的影响因素 | 第56-57页 |
| ·pH值 | 第56页 |
| ·稳定剂 | 第56-57页 |
| ·其他影响因素 | 第57页 |
| ·冻干保护剂 | 第57页 |
| ·纳米球的表征 | 第57-58页 |
| ·纳米球的药效 | 第58-59页 |
| 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 附件 | 第66页 |